凉血通瘀方干预高血压大鼠急性脑出血模型对脑组织中差异miRNA表达的影响＊

目的 研究凉血通瘀方对高血压大鼠急性脑出血模型脑组织miRNA表达的影响，对差异表达的miRNA靶基因进行分析，探索凉血通瘀方可能的药效机制。方法 将自发性高血压大鼠随机分成对照组（B）和实验组（C）。适应性饲养一周后，C组灌胃凉血通瘀方，B组灌胃等体积生理盐水，连续5天，每天1次。构建脑出血模型后收集脑组织，借助全转录组测序技术获得miRNA表达量，与miRBase数据库比对获取已知miRNA，使用miRDeep2预测新miRNA。差异分析软件为DESeq2，筛选阈值为|log₂FC| ≥1 并且P <0.05。对显著差异表达的miRNA进行靶基因预测，对靶基因进行GO功能、KEGG通路富集和PPI网络分析。结果 实验组和对照组对比，共发现21个显著差异表达的miRNA，上调有9个，下调有12个，共预测得到1243个有统计学意义的靶基因。GO富集分析发现，生物过程中突触囊泡分泌的调节、神经递质分泌的调节和神经递质运输的调节占前三位，神经元投射终点、全膜、质膜区域和细胞投射则是主要的细胞成分。分子功能分别为小GTPase绑定、底物特异性跨膜转运蛋白活性和离子跨膜转运体活性。通路分析结果显示，靶基因在癌证通路、pI3K-Akt信号通路、人类乳头瘤病毒感染、神经活性配体-受体相互作用和MAPK通路等分布广泛。采用STRING网站和Cytoscape软件，根据MCC算法筛选出ADRA2C、CASR、CCL28、CCR1、DRD2、GNAT3、GRM2、DYNC1LI1、GABBR1、GNAI1等核心靶基因。结论 凉血通瘀方对脑出血急性期鼠脑组织内miRNA的表达有重要影响；显著差异表达miRNAs可能通过靶向核心基因调控凉血通瘀方干预急性脑出血的病理过程及预后。     

甘松乙酸乙酯提取物对高原缺氧诱导脑组织损伤的保护作用

目的明确甘松乙酸乙酯提取物(EFNC)对高原缺氧诱导脑组织损伤的保护作用。方法建立低压低氧诱导小鼠脑组织损伤模型,经EFNC预处理后,利用相关试剂盒检测脑组织中氧化应激和能量代谢相关指标,利用Western blot技术检测脑组织相关蛋白的表达。结果给予EFNC预处理后,能够减少低压低氧小鼠脑组织中H_2O_2和MDA含量,增加GSH和ATP的水平,提高SOD、CAT、GSH-Px和ATP酶的活力以及Nrf2和HO-1的表达。结论 EFNC对高原缺氧诱导脑组织损伤具有保护作用,其作用机制可能与激活Nrf2-HO-1信号通路,提高抗氧化能力以及改善能量代谢障碍有关。     

蜘蛛香环烯醚萜部位干预CUMS致抑郁小鼠脑组织的1H-NMR代谢组学分析

目的:利用代谢组学技术分析慢性温和不可预知应激(CUMS)抑郁模型小鼠脑组织样本,寻找与抑郁相关的差异代谢物,探讨蜘蛛香环烯醚萜部位(IEFV)可能的抗抑郁作用机制。方法:42只昆明小鼠随机分为6组,包括正常组,模型组,氟西汀组(2.5 mg·kg-1),IEFV低、中、高剂量组(给药剂量分别为5.73,11.47,22.94 mg·kg-1)。采用CUMS对小鼠造模,以IEFV及阳性药(氟西汀)为干预药物,用行为指标和生化指标进行药效学评价。采用核磁共振氢谱(1H-NMR)代谢组学技术分析IEFV对CUMS抑郁模型小鼠脑组织中内源性物质的影响,结合多变量统计分析方法来确认差异代谢物,并对差异代谢物参与的代谢通路进行富集。结果:造模后,小鼠的不动时间大幅度提高、蔗糖偏好率明显下降,兴奋性神经递质5-羟色胺和去甲肾上腺素显著下降,表明造模成功。给予IEFV和氟西汀后,小鼠不动时间、蔗糖偏好率和兴奋性神经递质向正常水平回调,提示给药后抑郁状态得到了一定程度的缓解。脑组织中内源性代谢物主成分分析(PCA)结果显示,模型组可与正常组明显分开,同时IEFV低、中、高剂量组和氟西汀组均显示有偏离模型组向正常组靠拢的趋势,与行为学结果一致。模型组与正常组进行正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)得到了16个变化显著的差异代谢物,包括12个水溶性差异代谢物和4个脂溶性差异代谢物。通过MetPA数据库分析得到7条潜在靶标代谢通路,包括三羧酸循环(TCA),牛磺酸和亚牛磺酸的代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢等。IEFV高剂量组可显著回调11种差异代谢物。结论:IEFV可能主要通过影响能量代谢,氨基酸代谢和神经递质水平发挥抗抑郁作用,可为IEFV抗抑郁作用机制的深入研究提供参考依据。     

大鼠脑组织厚冷冻切片的经验探讨

正现阶段利用动物模型可以帮助我们发现引起精神疾病临床症状的脑部异常变化,进而为治疗提供重要的理念与依据。动物模型的脑组织切片的特殊染色、免疫组化染色、免疫荧光染色等病理学技术是观察脑部组织异常改变非常重要的方法。如对大鼠脑组织行振动切片高尔基染色,以对神经元的形态进行定性或定量的观察[1]。相关文献中也经常会进行冷冻厚切片(25～50 μm)的制作[2-3]。与临床病理相比,动物实验性研究的冷冻切片病理技术操作及结果展示上会有所不同[4]     

小骨窗开颅显微手术治疗对高血压脑出血患者术后神经功能恢复及并发症的影响

高血压脑出血属于神经外科疾病,在临床中较为常见。据相关研究显示,不同的手术时间会对手术效果造成重要影响,若患者出血至手术时间越长,其脑组织损伤就越严重,治疗难度也随之增大,由此不仅会增加患者的死亡风险,还会不利于恢复患者的神经功能。小骨窗显微手术优势在于彻底清除血肿,减少脑组织损伤等,因而临床在治疗高血压脑出血患者中广泛应用该手术方式[1]。为此,本研究将我院收治的60例患者中针对不同手术时机实施小骨窗开颅显微手术,探讨其应用效果,现报告如下。     

脑CT灌注成像联合CTA在超早期急性缺血性脑血管病诊断中的应用

急性缺血性脑血管病 (ａｃｕｔｅｉｓｃｈｅｍｉｃｃｅｒｅｂｒａｌｖａｓｓｃｕｌａｒｄｉｓｅａｓｅ ,ＡＩＣＶＤ)是严重危害人类健康的常见病 ,具有较高的发病率、致残率和死亡率等特点 ,严重危害人们的身心健康。如何早期明确诊断 ,争取及时有效的治疗 ,最大程度减少缺血性坏死的范围 ,一直是人们关注的热点问题。近年来 ,随着医学影像技术的发展 ,脑ＣＴ灌注成像引起了人们的关注 ,它能在缺血性脑血管病发病的超早期(6ｈ内 )显示出缺血性病变的部位和范围 ,评价缺血脑组织的血流灌注情况 ,并且从影像学方面证实了半暗带的存在[1 3 ] ;…     

大鼠胎脑神经细胞与胶原复合体移植对脑损伤的修复

目的:评价胶原蛋白(Collagen)的细胞相容性;研究胶原蛋白(C)与大鼠胎脑神经细胞(FBN)复合体(C-FBN)脑内移植对脑损伤的修复作用。方法:将大鼠FBN与胶原蛋白联合体外培养,进行光镜、扫描电镜观察。并将体外联合培养3～5d的C-FBN(移植前48h培养液中加入BrdU)移植到大脑皮质损伤模型的大鼠脑损伤部位,术后3,6,10,15及30d光镜、BrdU免疫细胞化学染色(ICC)、透射电镜观察脑组织对移植物的反应、移植细胞生长状态及载体在体内的降解情况等。结果:胶原蛋白对FBN生长无不良影响;脑组织对移植物无明显的免疫排斥反应;胶原蛋白与周围脑组织整合好,有血管长入移植物中;载体内有大量存活神经细胞,而且术后各时段都检出BrdU阳性细胞;移植区有突触形成;胶原蛋白海绵吸收、降解快,可诱导组织再生。结论:胶原具有良好的细胞相容性和组织相容性,是神经组织工程的一种较为理想的生物载体材料;生物材料与胎脑神经细胞联合培养移植是治疗脑损伤较有前途的新方法。     

Neuroprotective effects of vagus nerve stimulation on traumatic brain injury

Previous studies have shown that vagus nerve stimulation can improve the prognosis of traumatic brain injury. The aim of this study was to elucidate the mechanism of the neuroprotective effects of vagus nerve stimulation in rabbits with brain explosive injury. Rabbits with brain explosive injury received continuous stimulation(10 V, 5 Hz, 5 ms, 20 minutes) of the right cervical vagus nerve. Tumor necrosis factor-α, interleukin-1β and interleukin-10 concentrations were detected in serum and brain tissues, and water content in brain tissues was measured. Results showed that vagus nerve stimulation could reduce the degree of brain edema, decrease tumor necrosis factor-α and interleukin-1β concentrations, and increase interleukin-10 concentration after brain explosive injury in rabbits. These data suggest that vagus nerve stimulation may exert neuroprotective effects against explosive injury via regulating the expression of tumor necrosis factor-α, interleukin-1β and interleukin-10 in the serum and brain tissue.     

补阳还五汤对中风后遗症“气虚血瘀”大鼠脑组织Na^＋，K^＋，Ca^2＋和Mg^2＋的影响

目的：在中风后遗症“气虚血瘀”大鼠模型的基础上，观察补阳还五汤对其脑组织中Na^+，K^+，Ca^2+，Mg^2+的影响，从而探讨补阳还五汤治疗中风后遗症的作用机制。方法：复制了中风后遗症“气虚血瘀”大鼠模型，并设空白对照组(正常组)、病理对照组(模型组)、低、中、高剂量组和梗死率判断组，补阳还五汤用传统方法煎制，大鼠灌胃15d后取脑组织，用原子分光光度计法测定其中Na^+，K^+，Ca^2+，Mg^2+的含量。结果：低、中剂量组症状改善明显，饮食和饮水增加，体质量增加，行动相对敏捷，毛发较以前有光泽，高剂量组症状亦有好转，但精神略显不振且大便溏稀，模型组也日渐活跃，但伤口愈合较慢。模型组Na^+(1．2300&;#177;0．0943)mg／g显著高于正常组(1．0671&;#177;0．0256)mg／g(F=3．295，P&;lt;0．01)，中剂量组Na^+(1．1169&;#177;0．1432）mg／g显著低于模型组(1．2300&;#177;0．0943)mg／g（F=3．295，P&;lt;0.05)；中剂量组Ga^2+(44．1820&;#177;6．3996)μg／g显著低于模型组）（55．3992&;#177;3．8868)μg／g(F=2．686，P&;lt;0．01)；中剂量组Mg^2+(0．1467&;#177;0．0010)mg／g显著高于模型组(0．1336&;#177;0．0059)mg／g(F=2．969，P&;lt;0．01)。结论：补阳还五汤对“气虚血瘀”中风后遗症的治疗作用与其纠正脑组织中的离子紊乱有关，反映了该方补气活血药理作用的部分内涵。     

134例脐带绕颈患者的分娩方式与围产儿预后临床观察

脐带因素一直是导致分娩期急性胎儿宫内窘迫的常见而又难以防范的高危因素之一，正确预测脐带异常并准确评估分娩的潜在风险，是目前产科急待解决的难点之一，任何影响脐带血运通畅的因素均可导致胎儿窘迫，包括：脐带过长或过短、脐带扭曲或缠绕、脐带打结或受压、脐带脱垂或破裂以及脐带畸形等，其中以脐带绕颈的胎儿宫内窘迫率较多。有文报道为24．5％，窒息率为10．20％，死胎率为20．40％。脐带亦有受压可能，脐带绕颈及随产程进展而相对变短、狭窄受压致血循环受阻，使胎儿脑组织缺血、缺氧，引起胎儿宫内窘迫，甚至胎粪吸入综合征、窒息、死胎、死产等更为常见。