香薷-广藿香药对挥发油β-环糊精包合物的制备与评价

目的:对香薷-广藿香挥发油进行药效学实验考察;建立气相色谱法(GC)同时测定香薷-广藿香挥发油中指标成分麝香草酚、香荆芥酚、百秋李醇含量的方法;优选香薷-广藿香挥发油β-环糊精包合物的制备工艺并确证包合物的形成。方法:采用透明质酸酶活性抑制试验建立了体外炎症反应模型,对挥发油进行抗炎测试;采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法对挥发油进行抗氧化活性研究;分别采用饱和水溶液法、胶体磨法、研磨法对香薷-广藿香挥发油进行β-环糊精的包合,采用GC对挥发油中麝香草酚、香荆芥酚、百秋李醇进行含量测定,优选挥发油的提取工艺和包合工艺;通过扫描电子显微镜、红外光谱法、热差分析法及X射线衍射法验证包合物的形成。结果:挥发油对透明质酸酶活性有一定程度的抑制作用,对DPPH有消除作用,且随质量浓度的升高而增强。麝香草酚、香荆芥酚、百秋李醇分别在0.021 3～0.426,0.020 04～0.400 8,0.022 6～0.452 g·L~(-1)与峰面积呈良好的线性关系(R~20.999);三者的加样回收率分别为99.59%(RSD1.6%),100.15%(RSD 1.5%),100.70%(RSD 1.4%);胶体磨法测得指标性成分含量最高;扫描电子显微镜、红外光谱法、热差分析法以及X射线衍射法均可验证挥发油β-环糊精包合物的形成。结论:挥发油具有一定抗炎活性及抗氧化能力;胶体磨法为香薷-广藿香挥发油最佳包合工艺。建立的GC具有简便灵敏、准确可靠、重复性好等优点,满足同时测定包合物中麝香草酚、香荆芥酚、百秋李醇含量的要求,提高了分析效率,可为该制剂的质量控制研究提供参考。     

广藿香酮传递体包封率测定方法的筛选研究

目的考察超速离心法、超滤离心法、鱼精蛋白沉淀法和微柱离心法用于测定传递体包封率的可行性,并从中优选出适用于测定广藿香酮传递体包封率的最佳方法。方法采用薄膜分散法制备空白传递体及广藿香酮传递体;建立广藿香酮HPLC含量测定方法;采用4种方法分离游离广藿香酮和传递体,并进行样品包封率测定,以回收率和分离度为指标评价方法的适用性。结果在广藿香酮和传递体混合物分离试验中,除超速离心法外,其余3种方法均能较好地分离游离广藿香酮和传递体。间接测定包封率的超滤离心法和鱼精蛋白沉淀法广藿香酮回收率分别为93.8%、103.0%,RSD分别为1.0%、0.80%。在广藿香酮传递体样品包封率测定试验中,4种方法测得的包封率分别为41.83%、46.79%、44.40%、4.24%,其RSD分别为5.4%、4.0%、0.14%、5.4%。结论鱼精蛋白沉淀法操作简单,分离度、重复性较好,适用于广藿香酮传递体包封率的测定。     

免疫调节抗病毒中药的特性与应用

近期中国及世界各国的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情严重,目前尚无特效药。西医抗新型冠状病毒(SARS-Co V-2)药物的安全性和有效性均在考察和试验中。中国多地用中医药治疗COVID-19临床治愈率较高,且治疗经济性较好。免疫调节抗病毒中药在调节免疫力的同时具有抗病毒作用,在治疗COVID-19中应用较多。筛选2000-2020年中国知网、万方、维普和Pubmed数据库明确报道具有抗病毒和免疫调节作用的11种免疫调节抗病毒中药(甘草、广藿香、金银花、黄芩、连翘、厚朴、柴胡、板蓝根、大黄、黄芪、鱼腥草),总结了其有效成分的抗病毒和免疫调节作用、理化性质及药动学特性,以及在临床方剂和中成药中的应用,以期为中医药更好地用于COVID-19临床防治提供参考。     

HPLC波长切换法同时测定广藿香配方颗粒中咖啡酸、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷和广藿香酮的含量

目的:建立广藿香配方颗粒中咖啡酸、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷和广藿香酮的含量测定方法,为其质量标准的研究提供依据。方法:采用高效液相色谱法。Wondasil C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱,流速1.0 m L·min~(-1),检测波长分别为325 nm(0~18 min,咖啡酸),330 nm(18~30 min,毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷),311 nm(30~55 min,广藿香酮),柱温30℃。结果:广藿香配方颗粒中咖啡酸、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷和广藿香酮进样量分别在0.021 8~0.218μg(r=0.999 8),0.032 6~0.326μg(r=0.999 8),0.099 4~0.994μg(r=0.999 7),0.174 2~1.742μg(r=0.999 9)与峰面积呈良好的线性关系,供试品溶液中4种被测指标成分在24 h内稳定性良好,平均加样回收率分别为98.85%,99.53%,99.37%,100.58%,RSD分别为1.9%,1.1%,1.4%,2.0%。结论:该方法同时测定了广藿香配方颗粒中非挥发性成分咖啡酸、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷和挥发性成分广藿香酮的含量,方法可行,重复性好,准确度高,可以为广藿香配方颗粒的质量控制提供方法参考。     

广藿香叶挥发油抗炎作用机制实验研究

目的对广藿香叶挥发油抗炎机制进行实验研究。方法通过研究广藿香叶挥发油对角叉菜胶致大鼠足肿炎症模型组织和血清中前列腺素E2(PGE2)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量的影响,探讨广藿香叶抗炎作用机理。结果广藿香叶挥发油能明显降低大鼠角叉菜胶性炎症模型组织和血清中的PGE2和MDA的含量,能降低角叉菜胶致大鼠足肿炎症模型血清中NO的含量。结论广藿香叶挥发油抗炎作用机制与抑制炎症组织PGE2合成、减少炎症组织中MDA堆积,降低NO含量有关。     

广藿香叶不同采收阶段质量比较

目的：研究不同采收阶段广藿香叶的质量情况,为确定广藿香叶最佳采收方法提供依据。方法：采用挥发油及浸出物测定法测定GC含量。结果与结论：绿叶采收时的样品质量最好,其次是叶子变红时采收的样品,变黄落地及落地较久的样品质量最差。     

广藿香酮抗金黄色葡萄球菌分子机制的研究

目的 为了初步了解广藿香酮抗金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的分子机制。方法 本研究用琼脂稀释法测定广藿香酮的药物敏感性，通过对金黄色葡萄球菌ATCC25923在1倍最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)广藿香酮药物浓度作用1h时进行转录组的高通量测序然后对数据进行KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)和GO(gene ontology)差异基因表达以及热图聚类分析。结果 药敏实验发现广藿香酮对金黄色葡萄球菌有抑制活性，经广藿香酮处理后，筛选出225个差异表达的基因，发现广藿香酮使金黄色葡萄球菌膜蛋白的表达、蛋白质的合成发生变化，并且使葡萄糖以及多糖的转运和合成受到控制。结论 广藿香酮可能与金黄色葡萄球菌的细胞膜蛋白相互作用从而抑制细菌生长，为进一步的实验提供数据支持。     

川藿香对胃肠动力障碍模型小鼠胃肠动力吸收及有氧代谢影响的相关性研究

目的:探索川藿香对胃肠动力障碍模型的影响,为川藿香的开发利用提供实验依据。方法:建立小鼠胃肠动力障碍模型,将小鼠分为正常组、模型组、西沙比利(3.375mg/kg)组、广藿香(2.25g/kg)组、川藿香(4.5g/kg、2.25g/kg、1.125g/kg)组和自然恢复组。实验过程中,观察小鼠生长状况、饮食量、粪便性状、精神活动状态、被毛光泽度等变化。给药结束当天,眼球取血,脱颈处死小鼠,检测小鼠胃排空、肠推进率、血清中D-木糖、胃动素和胃泌素的含量观测胃肠动力变化;制备10%肝脏组织匀浆,按试剂盒要求检测肝脏组织葡萄糖、丙酮酸含量和琥珀酸脱氢酶活性。结果:与正常组比较,模型组小鼠胃残留明显升高,胃肠激素含量及丙酮酸、葡萄糖和琥珀酸脱氢酶活性都有不同程度的降低;与模型组比较,川藿香(2.25g/kg)可明显改善胃肠动力障碍小鼠一般状况,对模型小鼠的胃排空和肠推进以及D-木糖吸收有明显促进作用,同时对胃肠激素胃动素和胃泌素的分泌有明显的修复作用;川藿香(2.25g/kg、1.125g/kg)组对丙酮酸、葡萄糖和琥珀酸脱氢酶活性水平明显升高;川藿香(4.5g/kg)组虽对上述指标有影响,但效果不及川藿香(2.25g/kg、1.125g/kg)组。结论:川藿香(2.25g/kg)对胃肠动力障碍模型小鼠胃肠动力吸收和有氧代谢具有明显调节作用。     

高效液相色谱法测定广藿香中毛蕊花糖苷的含量

目的建立广藿香中毛蕊花糖苷含量的测定方法。方法采用HPLC法,色谱条件为Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-0.1%醋酸水溶液(40:60);流速为1 m L·min-1;检测波长334 nm。结果毛蕊花糖苷进样量在0.900¹8.00μg与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 9,低、中、高浓度加样平均回收率在99.9%18.00μg与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 9,低、中、高浓度加样平均回收率在99.9%¹04.1%(n=3),RSD<1.5%。结论该方法简单可行,重复性好,可作为广藿香药材质量标准控制的方法。