难复性疝30例手术治疗体会

目的探讨难复性疝的手术方式，以减少其复发。方法回顾性分析难复性疝的手术治疗方式及结果。结果30例全部手术治疗，除1例阴囊血肿，1例术后疼痛外，均获的良好的疗效，无1例复发。结论要根据患者的情况采取个体化差异手术方式。     

A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体.方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B.对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因.分别插入原核表达载体pQE-30,再转化E.coli M15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定.结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在E.coli中以包涵体形式获得高效表达.Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性.Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应.     

透明质酸钠关节腔注射治疗颞下颌关节盘不可复性前移位

透明质酸是关节的主要成分 ,近年来的研究证明 ,它在关节病的治疗中有重要价值[1 ,2 ] 。本研究通过对比的方法 ,评价透明质酸钠关节腔注射治疗颞下颌关节盘不可复性前移位的疗效。　　作者单位 :116 0 11大连医科大学附一院口腔科 (齐东元、潘巨利 ) ;鞍钢铁西医院口腔科 (刘成海 )　　一、材料和方法1 .临床资料 :2 7例患者男 1 1例 ,女 1 6例 ,年龄 1 5至 62岁 ,平均 2 9.6岁。均具有颞下颌关节盘不可复性前移位的特殊病史和典型症状 ,即既往有较长时期的关节弹响史 ,以后关节弹响突然消失 ,而出现严重的张口受限 ,并伴有疼痛 ,张口时下…     

RNase等10种标准蛋白质在高效疏水作用色谱上的复性

目的: 研究变性蛋白质在高效疏水作用色谱(HPHIC)上的保留行为及复性效率. 方法: 分别用盐酸胍(GuHCl)、尿素(Urea)和十二烷基磺酸钠(SDS)将核糖核酸酶(Rnase)等10种标准蛋白质变性,然后在流动相为硫酸铵的条件下,用HPHIC对变性蛋白质进行复性,并测定其保留时间、Z值、质量及活性回收率. 结果: 在10种变性蛋白质中有5种在HPHIC上得到复性,其保留时间、峰形、Z值与天然蛋白基本一致,其中溶菌酶和核糖核酸酶的质量和活性回收率高,复性效果好. 结论: 用HPHIC对变性的标准蛋白质进行复性,得到较好的复性效果.     

大鼠肝再生过程中碱性磷酸酶活性变化及其超微细胞化学研究

目的 研究2／3肝切除后大鼠肝再生过程中碱性磷酸酶(AKP)活性的变化及其细胞定位。方法 利用比色法对AKP活性进行定量分析；用酶的原位复性电泳技术分析再生肝中AKP的种类和活性变化；用电镜细胞化学方法研究酶定位。结果 在肝部分切除后的肝再生期间，AKP出现两个活性高峰(16h和19h)，在每个活性高峰后，AKP均有显著下降；获得3种肝型AKP同工酶(140、160和180kD)，其中180kD的AKP只在肝再生过程中出现；随着肝再生的进展，AKP活性出现在细胞的不同部位。结论 AKP在肝再生过程中起重要作用，可能参与细胞代谢、物质转运、DNA合成和细胞分化。     

幽门螺杆菌cagA蛋白的制备级复性和纯化

目的通过优化复性液的组成、pH值、稀释度等,建立幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A(cytotoxin associated gene A,cagA)表达产物的制备级复性及纯化方法。方法以包涵体形式存在的cagA表达产物先用5mL/LTritonX-100进行初步纯化,使其纯度达到约90%;再用含8mol/L脲的变性剂溶解包涵体,用复性液[0.1mol/LTris-HCl、2mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)、0.1mmol/L氧化型谷胱甘肽(GSSG)、8mmol/L还原型谷胱甘肽(GSH)及50mmol/L精氨酸(Arg),pH8.0]稀释复性后,用DEAE-HP阴离子交换色谱进行纯化。结果用稀释法复性及液相色谱法纯化,一次可得到100~140mg的cagA。ELISA检测其抗原活性为1∶16000;SDS-PAGE检测纯度为98%。结论用制备级复性、纯化制备的cagA,可作为抗原用于制备检测抗幽门螺杆菌抗体的检测芯片,效果良好,并已获得国家新药批文。     

蛋白质复性的条件及影响因素

蛋白质复性是一个过程 ,存在中间阶段 ,此阶段的各种相互作用力决定了蛋白质能否复性。蛋白质复性要求有一定的条件 ,如pH、温度、离子强度、蛋白质浓度等。另外多种添加剂能促进蛋白质复性 ,其中包括表面活性剂、低浓度变性剂、分子伴侣蛋白和各种氧化还原对 ,但对于不同蛋白质 ,因其结构及理化特性不同 ,采取不同复性方法 ,可以使其达到最佳复性效果     

人工分子伴侣辅助鸡白细胞介素18重组蛋白的复性

目的:研究表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和β-环糊精(β-CD)组成的人工分子伴侣系统辅助鸡IL-18重组蛋白的复性,以提高鸡IL-18重组蛋白复性率,获得更多具有良好活性的蛋白.方法:将重组原核表达质粒pGEX-mChIL-18转化宿主细胞大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG于37℃诱导培养获得表达.表达产物主要以包涵体的形式存在.包涵体经超声波破碎、洗涤后以6 mol/L的盐酸胍溶解,使蛋白彻底变性,然后利用人工分子伴侣系统辅助蛋白复性.复性产物经透析纯化后,利用淋巴细胞增殖试验来检测其活性.结果:经SDS-PAGE分析表明,表达产物是与ChIL-18重组蛋白相符的Mr约44000的蛋白条带.利用人工分子伴侣系统辅助复性,鸡IL-18重组蛋白获得了42.54%复性率.鸡淋巴细胞增殖试验表明,表达产物对鸡淋巴细胞具有明显诱导增殖作用.结论:人工分子伴侣系统能够较好地辅助鸡IL-18重组蛋白复性,获得较高的复性率.其产物具有良好的生物学活性,为下一步鸡IL-18重组蛋白的应用研究奠定了试验基础.     

生物陶瓷材料iRoot SP在不可复性牙髓炎根管填充后疼痛的临床研究

目的:评估iRoot SP在不可复性牙髓炎中根管填充后出现疼痛情况。方法:选取本院不可复性牙髓炎患者80例,按随机数字表分为两组,在常规根管治疗后,试验组及对照组分别采取iRoot SP及AH Plus进行填充,利用VAS评分对比两组患者不同时间点出现不同疼痛分级的患者比例、疼痛程度及因疼痛口服布洛芬比例。结果:术后12h试验组呈现无痛的患者比例较对照组明显更高(21vs10,P=0.012),术后24h试验组出现重度疼痛比例较对照组明显更低(0vs6,P=0.034)。与对照组相比,iRoot在不同时间段均能有效降低患者术后疼痛程度(P<0.001)。然而两组患者因疼痛口服止痛药比例无明显差异。结论:iRoot SP可以明显降低不可复性牙髓炎患者根管治疗后早期出现疼痛机率及疼痛严重程度。     

In vitro renaturation of recombinant human pro-urokinase expressed in Escherichia coli

目的　重组人尿激酶原在大肠杆菌中过量表达时形成不溶物包涵体 ,需经体外变复性后才能获得生物活性。本文旨在提高包涵体中变性尿激酶原的复性效率。方法　通过对pH、温度、变性剂种类及浓度、蛋白浓度、以及巯基氧化还原对比率等的定性定量分析 ,研究重组人尿激酶原体外变复性的基本条件 ,并比较了添加一些非特异有效成分、脉冲稀释、梯度透析等方法对提高重组人尿激酶原体外变复性效率的作用。结果　确定了重组人尿激酶原体外变复性的基本方法 ,其复性效率可达 30 %左右。结论　不同的包涵体蛋白的体外变复性效率因蛋白的分子大小、二巯键数目、疏水程度等而异 ,对特定蛋白复性条件的优化可提高其复性效率