黄芪中黄芪甲苷含量测定的新方法探讨

目的:探讨黄芪中黄芪甲苷含量测定的新方法的可行性。方法:通过对文献涉及的黄芪中黄芪甲苷测定方法的梳理,采用一种黄芪甲苷测试的新方法,即"回流碱化衍生法"。开展了含量测定预试,并对新方法与2015年版《中国药典》方法(简称药典法)所测的不同批次黄芪中黄芪甲苷的含量数据进行了比较。结果:回流碱化衍生法测定黄芪甲苷的方法学符合相关规定,且测定的黄芪中黄芪甲苷的含量高于药典法。标准曲线为Y=1. 315X+6. 311 2(r=0. 999 7,n=6,线性范围0. 044 6～8. 92μg),日内精密度、日间精密度的RSD分别为0. 5%,0. 6%,重复性试验RSD 1. 2%,48 h稳定性试验的RSD2. 1%,回收率试验的RSD 2. 0%。回流碱化衍生法、药典法测定的16批黄芪饮片中黄芪甲苷的质量分数分别为0. 371%,0. 203%,0. 315%,0. 218%,0. 386%,0. 221%,0. 353%,0. 192%,0. 303%,0. 197%,0. 373%,0. 188%,0. 361%,0. 114%,0. 349%,0. 112%; 0. 243%,0. 152%,0. 214%,0. 168%,0. 274%,0. 157%,0. 221%,0. 133%,0. 203%,0. 141%,0. 257%,0. 132%,0. 238%,0. 084%,0. 242%,0. 096%。结论:回流碱化衍生法可用于黄芪饮片中黄芪甲苷的含量测定,较药典法操作起来更加简便、黄芪甲苷衍生物的转化效率更好、可重复性更好。该方法可以为形成快速、科学、准确的黄芪甲苷含量测定方法提供参考。     

PEDF对氧诱导视网膜病变小鼠视网膜MCP-1表达的影响

目的：观察色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor，PEDF)在氧诱导视网膜病变(oxygen-induced retinopathy，OIR)中对小鼠视网膜新生血管(retinal neovascularization，RNV)和单核细胞趋化因子-1(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)表达的影响，探讨PEDF对缺血缺氧性视网膜病变的保护作用和机制。

方法：取7日龄C57BL/6J新生小鼠160只，将120只7日龄小鼠与哺乳母鼠共同置于氧浓度为(75±2)%的氧环境内饲养5d，然后返回正常氧环境中饲养5d，建立OIR模型； 40只小鼠始终置于正常氧环境饲养。分别于12日龄和14日龄给予PEDF药物治疗组小鼠右眼玻璃体腔注射PEDF(2μg/μL)各1μL，给予PBS治疗对照组和正常对照组小鼠右眼玻璃体腔注射等量的磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline，PBS)。所有小鼠于17日龄麻醉处死后取视网膜，采用视网膜铺片和Lectin染色法观察各组小鼠病理性新生血管的生成情况； Western-blot检测PEDF和MCP-1蛋白在各组小鼠视网膜的表达； 实时荧光定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测各组小鼠视网膜PEDF和MCP-1 mRNA的表达。

结果：视网膜铺片和Lectin染色结果显示OIR模型组RNV面积较正常组显著增大，差异有统计意义(P<0.01)，PEDF药物治疗组RNV面积较PBS治疗对照组明显减小，差异有统计意义(P<0.01)。Western-blot和RT-PCR结果显示，OIR模型组MCP-1蛋白和mRNA的表达水平均明显高于正常组，差异有统计意义(均P<0.05)； OIR模型组PEDF蛋白和mRNA的表达水平均明显低于正常组，差异有统计意义(均P<0.01)； PEDF药物治疗组MCP-1蛋白和mRNA的表达量较PBS治疗对照组均显著减少，差异有统计意义(均P<0.05)； PEDF药物治疗组MCP-1蛋白和mRNA的表达量较正常对照组升高，但差异均无统计学意义(均P>0.05)。

结论：PEDF能够抑制OIR小鼠视网膜新生血管形成，同时下调MCP-1在OIR小鼠视网膜的表达，后者可能是其抑制新生血管形成从而发挥视网膜保护作用的机制之一。     

基于柱前衍生UPLC-MS/MS的宁陕地区猪苓单糖组成差异研究

目的:研究宁陕地区猪苓多糖中单糖组成的差异。方法:采用柱前衍生-超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱法检测不同生长条件下猪苓多糖中单糖组成及含量。结果:不同生长年限、不同种植地点及地势、种植过程中是否翻窝、不同发育时期的猪苓多糖的单糖组成均存在差异。3年生猪苓相对2年生猪苓,半乳糖、核糖和木糖等9种单糖的含量降低,而葡萄糖醛酸含量增加;黑苓与灰苓中葡萄糖含量差异明显,黑苓葡萄糖含量均值最高可达灰苓的1.9倍;种植过程中不翻窝、选择坡地种植可能有利于猪苓中单糖成分的积累。结论:对宁陕地区不同猪苓样品单糖组成差异进行初步研究,为宁陕地区猪苓的规范化种植提供依据。     

转录激活因子-4、第二个线粒体衍生的半胱氨酸蛋白酶激活剂在卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的探讨卵巢癌组织中转录激活因子-4(ATF-4)、第二个线粒体衍生的半胱氨酸蛋白酶激活剂(SMAC)蛋白的表达情况及临床意义。方法收集90例卵巢癌患者的卵巢癌组织标本和90例卵巢良性肿瘤患者的良性肿瘤组织标本。采用免疫组化染色法检测两种组织中ATF-4、SMAC蛋白的表达情况,并对卵巢癌组织中ATF-4、SMAC蛋白表达与卵巢癌患者病理特征的关系进行分析。结果免疫组化染色结果显示,卵巢癌组织中ATF-4的阳性表达率明显高于卵巢良性肿瘤组织(P﹤0.01)。卵巢癌组织中SMAC蛋白的阳性表达率明显低于卵巢良性肿瘤组织(P﹤0.01)。FIGO分期为Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、组织学分级为G3级的上皮性卵巢癌患者上皮性卵巢癌组织中ATF-4蛋白的阳性表达率均高于FIGO分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、组织学分级为G1~G2级的患者(P﹤0.05);FIGO分期为Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、组织学分级为G3级的上皮性卵巢癌患者上皮性卵巢癌组织中SMAC蛋白的阳性表达率均明显低于FIGO分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、组织学分级为G1~G2级的患者(P﹤0.01);不同病灶直径的上皮性卵巢癌组织中ATF-4、SMAC蛋白的阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。结论上皮性卵巢癌组织中ATF-4蛋白的表达上调,SMAC蛋白的表达下调,且ATF-4、SMAC蛋白表达可能与上皮性卵巢癌患者的病情进展有一定关系。     

血浆色素上皮衍生因子与初发2型糖尿病患者骨密度的相关性

目的 研究初发2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）患者血浆色素上皮衍生因子（pigment epithelium-derived factor，PEDF）水平与骨密度的关系。方法 纳入50例初发T2DM患者，通过问诊及查体获取其一般临床资料，采集其空腹血，检测其临床检验指标、骨代谢指标以及血浆PEDF水平，利用双能X线测量骨密度。根据骨密度是否降低分为骨量减少组和骨量正常组，比较两组人群一般临床资料、临床检验指标、骨代谢指标、骨密度、血浆PEDF水平，利用Pearson相关分析研究血浆PEDF水平与腰1～4、股骨颈以及全髋骨密度的相关性，利用单因素以及多因素线性回归研究腰1～4、股骨颈以及全髋骨密度的独立影响因素。结果 初发T2DM患者骨量减少组较骨量正常组血浆PEDF水平更低，血浆PEDF水平与腰1～4、股骨颈、全髋骨密度正相关，血浆PEDF是初发T2DM患者骨密度的独立影响因素。结论 PEDF可能作为初发T2DM患者骨密度变化的重要分子发挥作用，其有望成为治疗糖尿病性骨质疏松的新因子。     

辅助生殖技术中胚胎冻存新观念及解冻移植策略的探讨

体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization&embryo transfer,IVF-ET)技术作为帮助不孕不育夫妇获得后代的重要治疗手段,已经广泛应用于临床中。近十年,随着临床个体化控制性卵巢刺激(individual controlled ovarian stimulation,iCOS)方案等临床技术的改进、胚胎实验室培养体系的精准提高,使得在新鲜周期中可利用胚胎率提高,因此胚胎冷冻保存技术作为IVF衍生技术,已成为胚胎实验室不可或缺的基本技术。