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1.
MUG—Indole快速检定大肠杆菌方法研究   总被引:15,自引:2,他引:13  
本文报道用MUG-Indole检定大肠杆菌方法,在24h内能将94% ̄97%的大肠杆菌检出。对MUG阳性、Indole阴性或MUG阴性、Indole阳性的菌株,辅以EMB琼脂或麦康凯琼脂平板分离,挑选可疑菌落,做IMViC试验,使假阳性和假阴性降到最低水平。本法比传统的生化试验检定大肠杆菌法快速、简便、准确、无主观性。  相似文献
2.
氨基酸的抑菌作用研究   总被引:13,自引:0,他引:13  
目的研究 19种氨基酸对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌作用。方法用氨基酸饱和液滤纸片分别对上述菌的每个混菌液培养基平板做定性抑菌实验 ;将有抑菌作用的氨基酸不同浓度对此三种菌的LB培养基混菌液做定量抑菌实验。结果半胱氨酸对金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用 ,最佳抑菌时间为 6h ,最适抑菌浓度为 0 .6 2 5 % ,此条件下抑菌率为 92 .6 2 %。结论半胱氨酸可以抑制金黄色葡萄球菌。  相似文献
3.
通过PCR的方法从人t-PA基因上扩增到r-PA基因的编码序列,并克隆到pMD18-T载体中,DNA测序与文献报道完全一致,该基因被克隆到多用途表达载体pET28a中,重组表达载体r-PA/pET28a转化E.coliBL21(DE3),培养表达,SDS-PAGE分析可见M,约39000的蛋白条带,约占细胞内总蛋白的30%以上,体外溶圈法测定活性表明该重组蛋白具有较好的纤溶活性。  相似文献
4.
大肠杆菌天门冬酰胺酶Ⅱ的基因克隆与表达   总被引:12,自引:6,他引:6  
本文报道用一对与大肠杆菌编码L-天门冬酰胺酶Ⅱ(L-ASPsⅡ)的基因ansB两侧序列互补的寡核苷酸L1、L2作引物,以L-ASPsⅡ的野生型生产菌CPU210009染色体为模板,经PCR扩增得到长约1.6Kb的DNA片段。该片段通过以LP1、LP2为内引物的PCR反应,证明包含了ansB基因的编码序列。将此片段经xba I、Hind Ⅲ消化,插入质粒PUC18、PUC19上构建重组质粒PUA18、PUA19,分别转化Asl.1187,Asl.1193,HB101,9637,JM107,71/18,GPU210009等宿主菌,筛选得到L-ASPs Ⅱ酶活力明显提高的8株阳性转化子。在1L生物反应器中,LB培养基37℃下培养24h,其酶活在6.2-31.8IU/ml之间。其中CTA8表达L-ASPsⅡ水平最高,达到31.8IU/ml。各基因工程菌株较之野生型生产菌体CPU210009,其生产L-ASPsⅡ水平提高了5-26倍。而且IPTG诱导对工程菌表达L-ASPsⅡ的水平几无影响。SDS-PAGE测得工程菌表达的L-ASPsⅡ分子量约为140Kd。薄层扫描结果显示:CTA7、CTB8、CTA9所产生的L-ASPsⅡ占宿主菌可溶性蛋白总量的28.3%、35.7%、33.6%。  相似文献
5.
高密度培养工程菌生产谷胱甘肽   总被引:11,自引:1,他引:10  
分析了一株具有高GSH合成活性的重组大肠杆菌在摇瓶培养中对葡萄糖的利用能力,继而在2L发酵罐中研究了不同流加方式对该工程菌高密度培养生产GSH的影响。结果发现,采用指数流加模式,发酵25h,细胞密度(干重)、GSH总量和生产强度可分别达到80g/L、880mg/L和3.2g/(L·h)。  相似文献
6.
大肠杆菌表达系统的研究进展   总被引:10,自引:0,他引:10  
近年来利用基因调控、融合表达、共表达以及代谢工程、定向进化等策略对大肠杆菌系统的载体和宿主进行了合理的改进,使目的基因的表达水平以及产物蛋白的活性大大提高,尤其是对长期以来有关真核基因在原核细胞中表达所存在的糖基化、二硫键形成等翻译后加工问题的研究取得了突破,使得大肠杆菌表达系统在研究和生产中的应用范围得到进一步拓宽。文章从表达载体和宿主细胞两个方面对大肠杆菌表达系统的研究进展进行了综述。  相似文献
7.
荔枝草及复方荔枝草提取液体外抑菌实验   总被引:10,自引:0,他引:10  
本文检测不同浓度的荔枝草和复方荔枝草提取液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及绿脓杆菌的体外抑菌作用.表明荔枝草和复方荔枝草提取液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及绿脓杆菌有明显的抑菌作用,其最低抑菌浓度范围为0.008~0.063 g/ml,且醇沉前后其抑菌强度不受影响.该实验结果对临床上使用中草药治疗不同细菌感染有指导意义.  相似文献
8.
大肠杆菌L—天门冬酰胺酶的提取和纯化   总被引:10,自引:2,他引:8  
用蔗糖溶液提取菌体细胞周质中的天门冬酰胺酶,所获得的粗酶液经硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维柱层析和羟甲基纤维素柱层析纯化,获得了比活为220IU/mg,SDS-PAGE显示一条带的L-天门冬酰胺酶。  相似文献
9.
3种中药方剂逆转大肠杆菌耐药性的实验观察   总被引:9,自引:0,他引:9  
目的研究三黄汤、黄连解毒汤和五味消毒饮3种方剂使产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌部分或全部恢复对抗生素敏感性的作用。方法用纸片扩散法和双纸片协同法筛选产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌,用试管二倍稀释法确定3种中药的最低抑菌质量浓度,以低于最低抑菌不同浓度,在不同时间下培养耐药大肠杆菌,比较各中药的逆转效果。结果三黄汤在0.2g·mL-1,24h;黄连解毒汤在0.4g·mL-1,12h;五味消毒饮在0.3g·mL-1,36h或0.4g·mL-1,48h的逆转效果最佳,与阳性对照克拉维酸比较有显著性差异(P<0.05)。结论3种中药有逆转细菌耐药性的作用,逆转作用与中药质量浓度及培养时间有关。  相似文献
10.
重组水蛭素Ⅲ的工程菌的培养及高密度发酵   总被引:9,自引:4,他引:5  
为提高重组水蛭素Ⅲ工程菌的产水蛭素量,采用正交实验法确定了较佳培养基组分,优化了摇瓶发酵工艺和发酵条件,工程菌摇瓶水蛭素产量稳定在2000ATU/ml左右,30L发酵罐批式发酵水蛭素产量达到4000ATU/ml,补料一批式发酵水蛭素产量达到8000ATU/ml。  相似文献
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