广西壮药鸡骨草分级多糖的制备与纯化

目的:探讨广西壮药鸡骨草分级多糖的制备及纯化。方法:用传统的水提法提取鸡骨草多糖,并用三氯乙酸法去除蛋白纯化;鸡骨草多糖的醇沉分级采用分步醇沉法,用90%、70%、40%的乙醇将鸡骨草粗多糖进行分级沉淀,分别得到总多糖(PACL)和90%醇沉多糖(PACL1)、70%醇沉多糖(PACL2)、40%醇沉多糖(PACL3)三个级分。结果:测得鸡骨草总糖(PACL)及各级醇沉多糖(PACL1、PACL2、PACL3)的量分别为65.8 g、27.5 g、21.5 g、10.0 g。结论:随着乙醇浓度的增加,所沉淀的鸡骨草多糖的质量随之增加,即表明多糖沉淀的量与所用的乙醇浓度呈一定的正相关性。     

基于黄酮类成分HPLC指纹图谱的鸡骨草叶及饮片品质评价

目的 建立鸡骨草叶黄酮类HPLC指纹图谱,开展鸡骨草叶及饮片品质分析,为鸡骨草质控提供依据。方法 采用 RP-HPLC法,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18 （250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇-0.2%乙酸,梯度洗脱;波长：330 nm;流速1.0 mL·min-1。开展鸡骨草叶黄酮类HPLC指纹图谱、相似度和聚类分析,开展鸡骨草饮片黄酮类指纹图谱和品质分析。结果 建立了15批鸡骨草叶黄酮类HPLC指纹图谱,标记出10个特征共有峰,峰面积总和>95%,不同样品相似度存在一定差异,第Ⅰ类鸡骨草叶,产地较近,相似度>96;第Ⅱ类鸡骨草叶,产地较远,相似度0.32~0.84;第Ⅲ类为毛鸡骨草叶,产地接近第Ⅰ类,相似度0.85~1.00;20批饮片样品HPLC指纹图谱相似度在0.58~0.96之间。结论 产地、基源和部位等均影响着鸡骨草品质;所建黄酮类HPLC 指纹图谱法符合指纹图谱的要求,可用于鸡骨草叶及饮片的品质评价。     

毛鸡骨草种子的HPLC指纹图谱研究

目的:建立毛鸡骨草种子的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法:采用HPLC法。色谱柱为Inertsil ODS-3 C18,流动相为乙腈-0.1%磷酸(梯度洗脱),流速为1.0 ml/min,检测波长为270 nm,柱温为30℃,进样量为10μl。以相思子碱为参照物,对10批次毛鸡骨草种子采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"软件进行相似度分析。结果:10批次毛鸡骨草种子有12个共有峰,相似度均>0.9。经验证,毛鸡骨草种子的指纹图谱与对照指纹图谱具有较好的一致性。结论:所建立的指纹图谱可为毛鸡骨草种子的鉴别和质量评价提供参考。     

干旱胁迫对两种鸡骨草活性成分影响比较研究

目的通过盆栽试验,比较鸡骨草、毛鸡骨草活性成分对土壤干旱胁迫的响应特征,探讨鸡骨草和毛鸡骨草最佳生态条件。方法在鸡骨草、毛鸡骨草开花期利用高效液相色谱和紫外分光光度计分别测量各处理相思子碱、总皂苷和总黄酮的含量。结果随着干旱胁迫的增加,两种鸡骨草相思子碱和黄酮的含量随着干旱胁迫的加剧均呈递减趋势,而总皂苷的含量随着干旱胁迫的加剧均呈先升高后降低趋势。结论适当的干旱胁迫处理有利于鸡骨草和毛鸡骨草中皂苷含量的积累,而且在干旱胁迫条件下毛鸡骨草药材质量要高于鸡骨草。     

HPLC同时测定复方鸡骨草胶囊中绿原酸、芍药苷和栀子苷的含量

目的：建立高效液相色谱法（HPLC）测定复方鸡骨草胶囊中绿原酸、芍药苷、栀子苷的含量.方法：采用Agilent TC-C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）;流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长为0～21 min：327 nm,21 ～ 27min：238 nm,27～40min：230 nm.结果：绿原酸线性范围为0.036 1～0.902 5μg,平均加样回收率为97.74％,RSD为1.40％（n=6）,栀子苷线性范围为0.148 2～5.929 6μg,平均加样回收率为97.68％,RSD为1.14％（n=6）,芍药苷线性范围为0.098 9～3.954 8μg,平均加样回收率为97.70％,RSD为0.99％（n=6）.结论：该方法简便可行,结果可靠,可有效控制复方鸡骨草胶囊的质量.     

Abrus agglutinin suppresses human hepatocellular carcinoma in vitro and in vivo by inducing caspase- mediated cell death

Aim： Abrus agglutinin （AGG） from the seeds of Indian medicinal plant Abrus precatorius belongs to the class II ribosome inactivating protein family. In this study we investigated the anticancer effects of AGG against human hepatocellular carcinoma in vitro and in vivo.
Methods： Cell proliferation, DNA fragmentation, Annexin V binding, immunocytofluorescence, Western blotting, caspase activity assays and luciferase assays were performed to evaluate AGG in human liver cancer cells HepG2. Immunohistochemical staining and TUNEL expression were studied in tumor samples of HepG2-xenografted nude mice.
Results： AGG induced apoptosis in HepG2 cells in a dose- and time-dependent manner. AGG-treated HepG2 cells demonstrated an increase in caspase 3/7, 8 and 9 activities and a sharp decrease in the Bcl-2/Bax ratio, indicating activation of a caspase cascade. Co-treatment of HepG2 cells with AGG and a caspase inhibitor or treatment of AGG in Bax knockout HepG2 cells decreased the caspase 3/7 activity in comparison to HepG2 cells exposed only to AGG. Moreover, AGG decreased the expression of Hsp90 and suppressed Akt phosphorylation and NF-κB expression in HepG2 cells. Finally, AGG treatment significantly reduced tumor growth in nude mice bearing HepG2 xenografts, increased TUNEL expression and decreased CD-31 and Ki-67 expression compared to levels observed in the untreated control mice bearing HepG2 cells.
Conclusion： AGG inhibits the growth and progression of HepG2 cells by inducing caspase-mediated cell death. The agglutinin could be an alternative natural remedy for the treatment of human hepatocellular carcinomas.     

鸡骨草胶囊质量标准研究

目的建立鸡骨草胶囊的质量（白芍、人工牛黄、猪胆汁、栀子、三七等）标准。方法采用薄层色谱法鉴别本制剂中的白芍、人工牛黄、猪胆汁、栀子、三七,采用HPLC法测定本制剂中的栀子苷、芍药苷含量。结果薄层色谱可鉴别出白芍、人工牛黄、猪胆汁、栀子、三七的特征斑点。HPLC法测定的栀子苷、芍药苷分别在0.154-1.54 g（r=0.9982）和0.154-1.54 g（r=0.9999）范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.5%、100.1%,RSD分别为0.78%（n=5）、1.5%（n=5）。结论本文方法简便可靠,专属性强,重现性好,可用于该制剂的质量控制。     

基于FTIR的鸡骨草药材化学成分整体分析与评价

目的 研究鸡骨草的红外光谱特征及其不同部位化学成分的差异.方法 采集鸡骨草和毛鸡骨草药材整株和观察其不同部位的傅里叶变换红外光谱(FTIR)图,运用二阶导数谱和半定量分析研究不同谱图间的差异.结果 ①鸡骨草含挥发油、三萜类、氨基酸、黄酮、皂苷、多糖类等化学成分.②鸡骨草不同部位红外"指纹"区的特征光谱显示:鸡骨草根部的黄酮类少于茎部,而皂苷类和多糖类成分较高于茎部.结论 红外光谱技术可以快速鉴别出鸡骨草的化学成分,从整体上评价药材质量的优劣,为规范化种植鸡骨草药材提供了一种检测方法.     

毛鸡骨草种植基地环境质量评价——土壤和灌溉水质量

目的对鸡骨草种植基地土壤、灌溉水污染现状进行评价，旨在为鸡骨草规范化种植基地建设提供科学依据。方法土壤及灌溉水污染现状运用单项污染指数法和内梅罗综合污染指数法进行评价。结果种植基地土壤和灌溉水污染等级均属于“清洁”一级。结论鸡骨草种植基地的土壤和灌溉水质量完全符合《中药材生产质量管理规范》（GAP）的相关要求。     

毛鸡骨草体外对HBs Ag和HBe Ag的抑制作用

目的观察毛鸡骨草在体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用。方法将毛鸡骨草醇提取液与等容量、滴度为1∶64的HBsAg和HBeAg阳性血清混合,使混合后毛鸡骨草的浓度分别为96,48,24,12和6 g/L,用磷酸缓冲液与1∶64的HBsAg和HBeAg阳性血清混合作空白对照。每组6管,37℃水浴8 h和16 h后,采用ELISA法测定HBsAg和HBeAg的OD值,观察其对HBsAg或HBeAg的抑制作用。结果毛鸡骨草醇提取液对血清中HBsAg和HBeAg均具有抑制作用,可使HBsAg和HBeAg的浓度降低,呈现一个明显的量效和时效反应关系。其中毛鸡骨草在作用16 h,浓度为96,48 g/L时对HBsAg,HBeAg抑制作用最为明显（P〈0.05）。结论毛鸡骨草在体外有较明显的抗HBsAg和HBeAg作用。