失忆性贝毒质谱测定与分析

背景失忆性贝毒属于海洋神经毒素,是一类具有神经兴奋的氨基酸类物质,其主要成分为软骨藻酸.贝类通过滤食毒藻,将软骨藻酸富集在体内,人类因食用被软骨藻类污染的贝类而中毒.目的建立液相色谱/四极杆-行时间质谱联用技术对贝类样品中的软骨藻酸实施有效监控,以期提高贝类的食用安全性.设计前瞻性自身对照实验.单位上海检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心理化实验室.材料MUS-lB贻贝组织标样[(36±1)μg软骨藻酸/g,批号MUS-1B0159]和软骨藻酸标准溶液(100mg/L,批号软骨藻类CS-1C 352)购自National Research Council of Canada(Halifax,Canada).实际贻贝样品取自历年在东海爆发的赤潮海域收集得到的阳性贝类,空白样品购自市集.高效液相色谱仪(Waters 2695)配有紫外检测器(Waters 2487)和四极杆-飞行时间质谱仪(QUhima,Micromass).方法样品用甲醇-水(体积比为11)提取,经SAX固相萃取柱净化后,用Zorbax Eclipse XDB-18柱(250×2.1 mm,3.5 μm)色谱分离,流动相为乙腈/水含0.05%甲酸,梯度淋洗,流速0.20 mL/min.四极杆-飞行时间质谱选择电喷雾正离子模式,以[M+H]+作为前体离子进行飞行时间质谱扫描测定.主要观察指标①检测限.②液相色谱/四极杆-飞行时间质谱法的准确度与精密度.结果样品加标的平均回收率为87.8%～94.6%,相对标准偏差为8.4%～11.9%,检测低限为0.1μg/g.结论液相色谱/四极杆-飞行时间质谱法作为对贝类样品中失忆性贝毒的确证分析方法具有较高的灵敏度和选择性,其应用可为贝类食用的安全性监测提供参考指标.     

盐酸埃他卡林对帕金森病细胞模型谷氨酸摄取下降的影响

目的:研究多巴胺能神经毒素对PC12细胞谷氨酸摄取的影响;探讨新型三磷酸腺苷(ATP)敏感性钾通道(ATP-sensitivepotassiumchannel,K-ATPchannel)开放剂盐酸埃他卡林(Iptakalimhydrochloride,Ipt)对神经毒素诱导的谷氨酸转运体功能下降的作用及机制。方法:放射性核素标记法测定PC12细胞L-犤3H犦-Glutamate摄取能力,MTT法测定细胞活力。结果:多巴胺能神经毒素6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)、N-甲基,4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenyl-2,3-dihydropyridiniumion,MPP )和鱼藤酮浓度依赖性地降低PC12细胞谷氨酸摄取:与对照组2.0±0.2相比,6-OHDA(30,50,80和100μmol/L)使摄取量降至1.6±0.1,1.0±0.3,0.8±0.1和0.5±0.1(P<0.01);MPP (200,400,600和800μmol/L)诱导摄取量降为1.6±0.2,1.5±0.2,1.2±0.1和1.0±0.2(P<0.01);鱼藤酮(5,10,20和40nmol/L)诱发摄取量降至1.5±0.2,0.6±0.1,0.4±0.1和0.2±0.1(P<0.01)。Ipt(10μmol/L)预处理能够完全对抗6-OHDA和MPP 、部分改善鱼藤酮造成谷氨酸转运功能异常,这种保护作用可被格列苯脲(Glibenclamide,Glib)(20μmol/L)阻断。结论:谷氨酸转运体功能下降参与多巴胺能神经毒素的损伤作用;Ipt通过激活K-ATP通道促进谷氨酸摄取,对抗毒素引发的兴奋毒性,具有潜     

人参皂苷Rg1、Rb1、Rd、Re和帕金森病的研究进展

帕金森病是一种影响运动机能和认知能力最常见的慢性神经退行性疾病。目前,PD的常规治疗手段仅能 有限缓解其症状,市面上仍然没有能根治PD的药物。探索具有防治PD的新药物,特别是研究人参等中草药中的 天然化合物对于PD的防治作用是当前广泛研究PD新药物的重点。人参皂苷可以通过几种不同作用机制发挥其抗 PD作用,包括抑制细胞凋亡,减少多巴胺神经元损失和多巴胺损耗等。现对人参皂苷Rg1、Rb1、Rd 和Re 对于 神经毒素诱导的PD模型中的作用及其机制进行综述,为其将来的临床应用提供理论支持。     

中华眼镜蛇神经毒素的活性研究

目的研究中华眼镜蛇神经毒素(NT)的镇痛活性和对离体蛙腹直肌N2-AChR的拮抗作用。方法采用三种模型(电刺激-嘶叫法,热板法,醋酸扭体法)观察NT的镇痛活性,并观察NT对ACh所致蛙离体腹直肌收缩的影响。结果 NT能提高电刺激-嘶叫法,热板法的痛阈,抑制醋酸引起的扭体次数。NT镇痛具有剂量-效应关系,给药后2 h起效,5 h达峰。NT能使ACh引起的蛙腹直肌收缩的量效曲线平行右移。结论 NT对三种致痛模型均有确切的镇痛活性,NT对N2-AChR的拮抗作用为竞争性拮抗。     

黄蜂蛰伤的急救和护理

蜂蛰伤是一种生物性损伤是临床急症之一,蜂毒的主要成分是蚁酸,神经毒和组胺[1]。蜂蛰伤是由于蜂尾部毒刺刺进皮肤,把储存在毒腺仲的毒液注入人体而引起的生物性中毒,引起局部或全身反应,严重者可出现过敏性休克、溶血、肝肾损害,神经毒素还能抑制中枢神经,甚至死亡[2]。     

变构蛇神经毒素治疗运动神经元病114例的临床观察

本文报道变构蛇神经毒素对运功神经元病114例治疗的临床观察。以2ml(500ug/500μg/ml)每日一次,肌内注射用于治疗肌萎缩侧索硬化68例、进行性肌萎缩40例,原发性侧索硬化6例,其中83例随访3～28个月,病情好转20例(24.17％),病情稳定26例(31.3％),无效37例(44.6％)。对疗效作了评价。讨论工作用机理,主要是在细胞受体部位的阻断作用,防止有害物质的侵犯,也有诱发干扰素的作用。     

平颏海蛇神经毒组分Ⅷ的分离纯化及毒理的初步研究

平颏海蛇毒腺提取物用CM-Sephadex C25柱层析,经醋酸铵缓冲液梯度洗脱,获得19个蛋白组分。经离体小鸡颈二腹肌标本检验,其中14个具有突触后神经毒作用。组分XⅡ再经Sephadex G 50和CM-Sephadex C 50层析纯化后得到组分XⅢ-2-4,该组分用Sephadex G 50过滤呈单一蛋白吸收峰,经三种不同类型的聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为电泳纯蛋白。其等电点为8.3,表观分子量为8200。小鼠ipLD_(50)为94μg/kg(86～102μg/kg)。其对小鸡颈二腹肌标本的神经肌肉传导的阻断作用经反复冲洗360min,结果表明是难于逆转的。根据氨基酸组成分析、分子量测定以及对神经肌肉传导阻断的难逆转结果,推测平颏海蛇神经毒素XⅢ-2-4可能属于突触后长链神经毒。     

饲服聚丙烯酰胺动物坐骨神经的超微结构观察

本文对饲服 PAM 的7例大白鼠和饲服 AM 的3例小白鼠坐骨神经内有髓鞘轴突的超薄切片的观察结果如下:(1)神经微丝的数量增加,微丝的直径(11.3nm)接近正常但偏粗。(2)线粒体形态出现多样性变化,以同一线粒体内既有肿胀又有固缩最引人注目。(3)轴突内出现具有界膜的糖原体。(4)髓鞘折皱、板层分离和溶解。(5)光滑膜小泡(SER)数量增加。上述主要超微结构的形态变化,从形态学上支持 AM 中毒机理的“能量代谢障碍说”。     

肉毒梭菌神经毒素检测技术的研究进展

肉毒神经毒素(BoNT)是迄今为止所发现的生物毒素中毒性最强的物质,能引起人和动物以松弛性麻痹为主症的肉毒中毒,同时也是最重要的生物毒素战剂和生物恐怖剂之一.研究和建立BoNT检测与鉴定方法具有十分重要的军事和医学意义.本文综述了近年BoNT检测与鉴定方法的研究进展.     

咖啡酸对神经毒素MPP+诱发大鼠小脑颗粒细胞凋亡的保护作用

目的:探讨咖啡酸(CA) 是否对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium ion, MPP ) 诱导的大鼠小脑颗粒细胞凋亡具有保护作用.方法: 用咖啡酸孵育大鼠小脑颗粒细胞, 经MPP 处理后, 用MTT法测定细胞存活率, 荧光法检测caspase-3的活性.结果:咖啡酸对MPP 致小脑颗粒细胞存活率降低和caspase-3活性增强具有很好的抑制作用,并呈现稳定的量效和时效关系.结论:咖啡酸对MPP 诱导小脑颗粒细胞凋亡具有明显的保护作用.