一株壳聚糖酶产生菌的鉴定和产酶条件优化D张子瑞1,2,孙谧1*,郝建华1,刘均忠1

对一株产壳聚糖酶菌株Y116进行了形态学观察、生理生化特征鉴定和16S rDNA序列同源性分析,初步确定该菌株属于芽孢杆菌属(Bacillus)。采用单因素法和响应面法,对菌株Y116产酶的培养基成分和培养条件进行了优化。首先筛选碳源、氮源、初始pH、金属离子、NaCl浓度、酵母浸粉浓度、接种量、发酵温度和时间8个因素。研究结果显示：当酶活达到最高值时,最终确定各因素的值分别为：乳糖 35 g/L,豆饼粉30 g/L, Mg₂₊ 0.5 g/L,NaCl 5 g/L,初始pH 5.0,接种量5%,培养温度30 ℃和发酵时间96 h。再通过Plackett-Burman(PB)设计对影响壳聚糖酶产量的8个主要因素进行评价,确定了豆饼粉浓度、初始pH和Mg₂₊浓度是影响产酶量的3个主要因素;利用中心组合设计(CCD)及响应面分析,最终得到3个主要因素的最优值：豆饼粉浓度39.44 g/L,pH 5.12,Mg₂₊ 浓度5.12 g/L,酶活力比优化前提高了5倍。