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1.
目的 旨在从细胞水平上探讨岩藻聚糖硫酸酯F2对SGLT2的抑制作用及抗糖尿病肾病(DN)活性,并阐述其抗DN机制。方法 通过Q-Sepharose Fast Flow强阴离子交换层析法对墨角藻来源岩藻聚糖硫酸酯(FvF)进行分离纯化,并采用高效液相、离子色谱等方法测定其分子量、单糖组成、硫酸根含量等基本理化性质,利用流式细胞术,通过评价样品对SGLT2稳转细胞转运葡萄糖能力的影响,来分析样品对SGLT2的抑制活性,确定活性最优化合物。通过计算机模拟技术,探讨了岩藻寡糖与SGLT2的相互作用。采用大鼠肾系膜细胞(HBZY-1细胞),利用高糖诱导,建立HBZY-1细胞增殖模型,通过MTT法评价F2的抗DN活性,并利用Western Blot方法探究最优化合物对HBZY-1细胞模型中SphK1、NF-κB、p38、ERK1/2蛋白的影响。结果 纯化后获得了5个组分,SGLT2抑制剂筛选确定F2为最优组分,其具有分子量低、硫酸根含量高且单糖组成较为单一的特点,并且岩藻糖中硫酸根含量和聚合度影响其与SGLT2的相互作用,而2-硫酸岩藻八糖与SGLT2的亲和力最强。成功建立了HBZY-1细胞增殖模型,发现F2在较低浓度下即可发挥抗肾系膜增生作用,并且其活性随着浓度增加而增强,且F2是通过抑制SphK1、NF-κB、p38蛋白的表达,抑制ERK1/2蛋白的磷酸化来发挥抗DN活性。  相似文献   
2.
目的 采用不同方法提取盾果藻(Carpopeltis affinis)中多糖,对其理化性质和结构进行分析,并初步评价其抗病毒活性。方法 依次通过冷水、热水(80 ℃)和2% NaOH溶液提取盾果藻多糖,通过硫酸苯酚、离子色谱法、PMP柱前衍生高效液相色谱法等对其总糖、硫酸根含量、单糖组成等进行分析,利用核磁共振波谱技术初步探究其结构。通过CPE和假病毒抑制实验初步探究其抗病毒活性。结果 3种多糖CCAP(冷水提取)、HCAP(热水提取)、ACAP(2% NaOH提取)均主要含硫酸半乳糖,热水浸提的HCAP得率及纯度较高,且主要为τ-卡拉胶。抗病毒活性研究表明HCAP对流感病毒、疱疹病毒和新冠假病毒具有显著的抑制作用,其中对H1N1株Influenza(A/Virginia/ATCC1/2009)的抑制作用最为显著(IC50=0.03 μg.mL-1,SI>66666.6)。结论 热水提取获得的盾果藻多糖为τ-卡拉胶,其对多种病毒均具有显著的抑制作用,本研究结果丰富了海洋糖库,为海洋抗病毒药物的开发提供了理论基础。  相似文献   
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