肺感染致多器官功能障碍综合征血清瘦素浓度的变化

目的检测肺部严重感染所致多器官功能障碍综合征(MODS)、急性心肌梗死(AMI)和心律失常(AR)等危重症患者血清中瘦素(Leptin)及相关因子水平的变化,探讨Leptin在MODS发病及诊断中的可能意义。方法采用放射免疫分析法测定Leptin、脂肪酸结合蛋白(FABP)、转铁蛋白(Ferr)以及白细胞介素1β(IL1β)水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定C反应蛋白(CRP)水平。结果与正常对照组相比,Leptin水平在MODS、AMI和AR组均明显增高(P均<0.01);CRP和IL1β水平在MODS、AMI和AR组均显著增高(P<0.05或P<0.01),以MODS组患者增高更明显(P均<0.05);FABP和Ferr在3组患者中也均有明显上升趋势,特别是在MODS组中上升更多,但统计学上差异无显著性。结论肺感染所致MODS患者血清中Leptin水平明显上升,伴有CRP和IL1β同时升高,Leptin可能在MODS的发生和转归中发挥一定作用。     

自体CIK细胞输注治疗老年骨髓增生异常综合征的临床研究

本研究旨在评价自体细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)治疗老年骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)的安全性和有效性。采集6例老年MDS患者外周血单个核细胞,在体外经细胞刺激因子培养,诱导成CIK细胞,回输至患者体内,28天为1个疗程。观察CIK细胞回输后患者体内效应细胞的比例变化、不良反应以及对感染的发生、血红蛋白水平和对输血依赖程度的影响。结果表明,经CIK细胞治疗后CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞比例明显升高(p<0.05),所有患者未出现严重不良反应。CIK细胞治疗有效地减少了MDS患者感染的发生,缩短了高热时间。在疾病稳定期,CIK细胞输注可减少红细胞的输注量,稳定血红蛋白水平,但不能改变MDS向高危亚型转化的自然病程。结论 :自体CIK细胞输注治疗老年人MDS安全有效。     

急性心肌梗死患者血清Leptin增高与其他相关因素的分析

目的探讨急性心肌梗死（AMI）和冠状动脉硬化（CS）患者血清瘦素（Leptin）的变化及与C反应蛋白（CRP）、肌钙蛋白T（TnT）、内皮素（ET）的相关性。方法收集临床确诊的AMI和Cs患者血清，采用高灵敏的Leptin及ET放射免疫分析法、TnT的自动生化分析法及高灵敏的CRP酶联免疫吸附法（ELISA）测定相应指标的血清水平。结果AMI组患者血清Leptin、TnT、CRP和ET水平均较正常对照组显著增高（P均〈0．01）；而CS组患者除TnT外，其他3种因子血清水平也明显高于正常对照组（P均〈0．01）；相关分析显示，上述增高因素互不相关，均为独立的影响因素之一，AMI组和CS组间仅TnT显示出差异有显著性（P〈0．01）。结论AMI和CS组患者血清Leptin水平均明显上升，但两组间差异无显著性；两组患者血清Leptin水平与CRP、TnT以及ET水平不存在相关性。     

热断层成像技术用于乳腺癌裸鼠模型实验初探

目的探讨热断层成像技术(TTM)应用于乳腺癌裸鼠模型扫描的可行性。方法采用既往实验中用逆转录病毒介导RNA干扰的方法,已构建的能不同程度抑制人的乳腺癌细胞MCF7中LRP16基因表达的两株细胞pL374/MCF7(抑制率90%)和对照细胞系pGFPi/MCF7(阴性);选取BALB/c雌性裸小鼠共20只,随机分为两组,10只/组。分别接种pL374/MCF7及对照细胞系pLGFPi/MCF7。接种细胞6周后,用TTM观察裸鼠成瘤情况。将20只裸鼠处死,解剖观察,取形成的小结节和相应的肺组织进行HE染色。结果TTM值异常升高的裸鼠有13只。11只裸鼠有≤3mm小结节。HE结果显示,以上11只裸鼠体内形成的小结节为阳性肿瘤组织,4只肺部组织显示有阳性肿瘤细胞。TTM值异常升高与HE染色阳性高度相关。结论TTM技术可能在肿瘤的动物模型研究中发挥一定的作用。     

银杏叶提取物对人工衰老大鼠肺肾功能的保护作用

背景衰老大鼠静脉注射脂多糖后能导致肺损伤,进而发现随着肺损伤的进展,影响肾功能.银杏叶提取物具有一定的清除自由基、改善血液流变学和保护血管内皮细胞等功能. 目的研究人工衰老大鼠肺损伤后是否发生肾功能不全,以验证老年多器官功能不全的肺启动机制,并观察银杏叶提取物对其是否有保护作用. 设计以实验动物为观察对象的随机对照的实验. 单位中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系. 材料实验于2001-05/2003-01在中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系实验室完成.选用36只Wistar雄性大鼠. 方法给大鼠每天1次经腹腔注入D-半乳糖(50 mg/kg),连续6周,复制衰老动物模型,再随机分为3组对照组(静脉注射生理盐水);脂多糖组(静脉注射脂多糖,5 mg/kg);银杏叶提取物+脂多糖组(注射脂多糖前7 d开始,每天银杏叶提取物灌胃1次,31 mg/kg).各组大鼠在给生理盐水或脂多糖后2 h或6 h取血和肺、肾组织. 主要观察指标用比色法测定血中肌酐、尿素氮含量;血、肺、肾组织中丙二醛、No2-/NO3-含量及谷胱甘肽过氧化物酶及Na+-K+-ATP酶活性的测定. 结果衰老大鼠在注射脂多糖后2,6h时已形成急性肺损伤.注射脂多糖 后2 h血中肌酐及尿素氮含量无明显升高,而6 h时均显著升高,分别为 (94.7±10.3)μmol/L,(11.4±1.9)mmol/L.在注射脂多糖后2h,血和肺组织 中丙二醛[(22.5+2.6)nmol/L,(25.8±2.9)μmol/gl和No2-/NO3-含量[(58.5 ±6.8)mmol/L,(34.6±3.8μmol/g]均显著升高,而谷胱甘肽过氧化物酶 [(355.1±45.0)μkat/g]及Na+-K+-ATP酶[(886.3±97.1)nkat/g]下降.上述指标 的变化持续至观察的6 h.而肾组织中上述指标仅在注射脂多糖后6 h才 有显著性变化.银杏叶提取物可显著缓解上述指标的变化. 结论脂多糖所致衰老大鼠的肺损伤可进一步诱导肾功能受损.银杏叶 提取物对脂多糖诱发的衰老大鼠的急性肺损伤和由此诱导的肾功能受 损有明显的保护作用.     

MicroRNA-193b对K562细胞C-KIT蛋白表达及生物学行为的影响

本研究探讨microRNA-193b（miR-193b）对K562白血病细胞系C-KIT蛋白表达及生物学行为的影响。采用HiPerFect转染试剂介导FAM荧光标记的miR-193b mimic或阴性对照分别转染过表达C-KIT的K562细胞系,采用流式细胞术检测FAM阳性细胞百分比以监测转染效率,采用Western blot检测C-KIT和磷酸化C-KIT蛋白表达水平,采用CCK-8试剂检测细胞生长曲线,采用AnnexinⅤ染色后流式细胞仪检测细胞凋亡,采用流式细胞仪检测粒系分化标志CD11b和CD15阳性细胞百分比。结果显示,miR-193b或阴性对照转染的K562细胞中,FAM阳性细胞可达80%左右;与对照组相比,过表达miR-193b可明显抑制K562细胞中C-KIT、磷酸化C-KIT蛋白表达水平,同时,K562细胞的增殖受到抑制,凋亡细胞、CD11b阳性细胞、CD15阳性细胞的百分比均有增加。结论：miR-193b可抑制K562细胞C-KIT表达,并抑制细胞增殖;该增殖抑制作用可能与miR-193b诱导的细胞凋亡、分化有关,本研究为进一步分析miR-193b在白血病发生中的作用提供了实验依据。     

银杏叶提取物对脂多糖诱导D-半乳糖致衰老大鼠急性肺损伤的保护作用

目的　观察脂多糖 (LPS)诱导D 半乳糖 (D gal)致衰老大鼠急性肺损伤 (ALI)及银杏叶提取物 (GBE)对其是否有保护作用。方法　大鼠 2 4只随机分成两部分 ,6只为正常对照组 ;18只经腹腔注D gal复制衰老动物模型。后者再随机分成三组 :衰老对照组 (6只 ) ;LPS组 (6只 ,静脉注射LPS诱导形成ALI) ;GBE +LPS组 (6只 ,注LPS前 7天开始每天灌胃给GBE一次 ,按所含黄酮甙计算 ,8mg/kg体重 ,实验当日在给LPS前 2h再给一次GBE)。注LPS后 2h收集标本待测。结果　D gal致衰老大鼠较正常大鼠血中超氧化物歧化酶 (SOD)及肺组织Na+ K+ ATPase活性均显著降低 (P均 <0 0 5 ) ,而血中乳酸脱氢酶 (LDH)活性升高 (P <0 0 5 )。衰老大鼠注LPS后 2h已形成ALI。肺间质及肺泡中有较多炎性细胞 ;肺泡灌洗液中蛋白含量及肺通透指数增加 ;血中乳酸 (LD) ,丙二醛 (MDA) ,一氧化氮 (NO) ,内皮素 1(ET 1) ,肿瘤坏死因子 α(TNF α)含量和LDH活性以及肺组织中髓过氧化物酶 (MPO)活性 ,均显著升高 ;而血中超氧化物歧化酶活性及肺组织Na+ K+ ATPase活性均下降 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。预先给予GBE可显著地缓解除SOD活性外的上述其它指标的变化 (P <0 0 5 )。结论　D gal致衰老大鼠体内抗氧化能力降低。静注LPS可引起衰老大鼠明显的A     

急性炎症反应中真核细胞转录因子—кB的信号转导作用

真核细胞转录因子 κB(nuclearfactorκB,NFκB)是一种普遍存在于真核细胞中具有序列特异性二聚体结构的转录因子 ,是所有 Rel家族 DNA结合蛋白的总称 ,在调节免疫应答、炎症反应及细胞增殖、分化及凋亡等方面起关键作用 〔1〕。NFκB转录复合体包括一系列由 p5 0、p5 2、Rel A(p6 5 )、Rel B和 c Rel等亚基构成的同型或异型二聚体 ,这些复合体结合到 DNA的调控区域 (称为κB位点 )后 ,激活特异靶基因的表达活性〔2〕。通常情况下 ,NFκB存在于细胞浆中 ,并与其抑制蛋白 (inhibitoryκB,IκB)家族相结合 ,后者遮蔽了 NFκB的细…     

端粒酶逆转录酶激活脐静脉内皮细胞端粒酶活性

目的　探讨外源性端粒酶逆转录酶 (hTERT)能否激活人脐静脉内皮细胞端粒酶活性 ,为建立体外人脐静脉内皮细胞系奠定基础。方法　用逆转录病毒转染法 ,将编码hTERT片段逆转录病毒载体与VSV G共转染 2 93 GP2 细胞 ,产生病毒上清液 ,感染原代分离的人脐静脉内皮细胞 (hUVEC) ,以嘌呤霉素筛选。观察细胞生长曲线、第Ⅷ因子、CD34、β 半乳糖苷酶染色、逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)等指标。 结果　细胞生长曲线显示培养至 30代的转染细胞生长速度基本与原代培养脐静脉内皮细胞一致但快于原代培养传至第 10代内皮细胞 ;RT PCR结果转染细胞有特异扩增 ;衰老指标 β 半乳糖苷酶染色显示转染后细胞胞浆内着染阳性细胞数明显少于第 10代内皮细胞。结论　外源性hTERT转入原代培养人脐静脉内皮细胞 ,可重现其端粒酶活性 ,从而阻止人脐静脉内皮细胞老化