羊栖菜褐藻糖胶CSFP-1抗肿瘤活性及机制研究

目的 分离纯化制备羊栖菜褐藻糖胶（CSFP-1）,并对其抗肿瘤活性及可能作用机制进行初步研究。方法 通过冷水浸提法制备羊栖菜褐藻糖胶（CSFP）,经超滤系统分离获得CSFP-1,并采用苯酚-硫酸比色法、PMP衍生化、高效液相色谱法、红外光谱分析等多种方法对其理化性质进行分析;采用MTT法评价CSFP-1（0、10、100、300 μg/mL）对宫颈癌细胞（HeLa）、肺癌细胞（A549）和肝癌细胞（Hep3B）生存能力的影响;应用流式细胞术评价CSFP-1对HeLa细胞细胞周期的影响;应用Western blotting技术评价CSFP-1对HeLa细胞凋亡和自噬相关蛋白表达的影响。结果 CSFP-1的糖含量为84.18%,糖醛酸含量为14.28%,硫酸根含量为10.02%,平均相对分子质量为5.6×10⁴,主要由半乳糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖醛酸和木糖组成。CSFP-1具有选择性细胞毒性,对HeLa细胞生长发挥显著抑制作用（P<0.05、0.001）,对A549和Hep3B细胞存活率没有明显影响。与对照组比较,HeLa细胞经CSFP-1处理24 h后,G1期细胞比例明显增加（P<0.001）;经CSFP-1处理48 h后,S期细胞比例显著增加（P<0.05、0.01、0.001）,G2期细胞比例显著减少（P<0.01、0.001）,均呈现剂量相关性。与对照组比较,CSFP-1 100、300 μg/mL剂量组处理24 h,300 μg/mL剂量组处理48 h Bcl-2蛋白表达显著减少（P<0.05）;100、300 μg/mL剂量组处理24、48 h Beclin-1蛋白表达显著增加（P<0.05、0.01）,且存在时间和剂量相关性。结论 CSFP-1具有选择性抑制HeLa细胞增殖作用,作用机制可能与阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡相关。     

高山红景天多糖的硫酸化修饰及DPPH自由基清除活性研究

目的优选高山红景天多糖(RSP)的最佳硫酸化修饰条件,提高RSP的抗氧化活性。方法利用氯磺酸-吡啶法对RSP进行了硫酸化修饰,并通过单因素实验确定了硫酸化反应的最佳工艺条件;应用红外光谱(IR)和扫描电子显微镜(SEM)对RSP和硫酸化高山红景天多糖(S-RSP)的理化性质进行了分析;通过测定RSP和S-RSP对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除能力,考察了S-RSP的取代度(DS)与多糖抗氧化活性之间的关系。结果当氯磺酸与吡啶的体积比为1∶4、反应时间为2 h、反应温度为60℃时,制得的S-RSP的含硫量最大值为18.83%,取代度最大值为2.38。RSP经硫酸化修饰后,增强了其抗氧化活性,S-RSP的DS与DPPH自由基清除能力存在一定的正比例关系。结论氯磺酸与吡啶的体积比影响S-RSP的DS大小;RSP经硫酸化修饰后通过改变多糖的极性而增加了其抗氧化能力。     

畲药搁公扭根基原植物及其同属易混种的ITS2条形码鉴别

目的基于ITS2条形码序列对畲药搁公扭根及其同属易混种进行分子鉴定,以保证药材使用的正确性和临床疗效。方法分别于浙江、广西、江西和安徽等地采集搁公扭根基原植物掌叶覆盆子及其9种同属易混种高粱泡、山莓、蓬蘽、茅莓、插田泡、寒莓、东南悬钩子、三花悬钩子和武夷悬钩子样品共140份。对采集样品进行基因组DNA提取、ITS2基因片段PCR扩增并双向测序、拼接获得相应序列,基于HMMer方法注释获取ITS2序列,同时下载Gen Bank相应物种ITS2序列37条,使用Gene Tool软件分析ITS2序列长度、GC量、变异位点等情况,利用Clustal X和MEGA7.0软件计算种内、种间遗传距离,构建邻接(NJ)系统发育树。结果搁公扭根及其9种同属易混种ITS2序列长度为211~213 bp,GC量为52.1%~58.0%;搁公扭根基原植物与其他物种共有14个变异位点,一处插入/缺失;搁公扭根种内平均K2P遗传距离为0.007 2,显著小于其他9个易混种,其中与山莓和武夷悬钩子进化距离最近,与蓬蘽最远;NJ进化树中搁公扭根各单倍型序列单独聚为一支,可与其他物种成功区分。结论 ITS2序列能够成功鉴别搁公扭根基原植物及其9种同属易混种,为畲药DNA条形码分子鉴别提供了有力佐证,助力畲药流通信息监管。     

缢蛏对~(60)Co-γ辐照致小白鼠辐射损伤修复作用

缢蛏(Sinonovacula constricta)属于双壳纲异齿亚纲帘蛤目竹蛏科,又名蛏子,其肉味鲜美,性质甘温,能补阴,去邪热,治烦闷、冷痢、热痢、妇人产后虚损、虚热等症~([1]).缢蛏特点是蛋白质含量丰富、低脂肪,富含灰分和总糖.缢蛏贝肉中含有丰富的钾、钠、磷、硫等常量元素,钙、镁、铁、锌、硒、锰、铜等也较为丰富~([2-3]).     

抗癌肽抗癌作用机制的研究进展

近年来癌症已经超过心血管疾病成为诱导人类死亡的第二大疾病,且其发病率和死亡率一直呈现逐年上升的趋势。目前癌症的治疗已取得很大的进展,但治疗仍存在很多的不足,如治疗效果差、毒副作用强、容易产生耐药性等。因此,急需开发药效好、毒副作用低的新型抗肿瘤药物。抗癌肽是一种具有抗癌活性的多肽,因其具有结构简单、作用方式多样、毒副作用小等特点而在癌症治疗上具有极大的应用潜力。本文将对抗癌肽的分类、结构和理化特性及抗癌作用机制进行详细论述,以期为未来开发新型抗癌药物提供新的思路。     

羊栖菜多糖促进生育相关基因表达提高果蝇生育力的研究

目的 研究羊栖菜多糖（SFPS）对亲本果蝇生育能力的影响及其作用机制。方法 采用85℃热水煮提、乙醇沉淀、氯化钙去除褐藻胶等多种工序提取SFPS;以黑腹果蝇为模式生物,分别以对照（0%）、低（0.033%）、中（0.167%）、高（0.500%）4个浓度持续喂食15 d,通过检测子代数量、体质量、每天羽化量评估不同浓度SFPS对果蝇生育能力的影响;荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测亲本果蝇生育和发育相关基因Vasa、Achi、Figla和子代果蝇mTOR的表达。结果 与对照组比较,喂食SFPS能显著性地提高雌蝇和雄蝇的生育力,并且对其子代果蝇体质量、羽化率和雌雄比例也有后续的促进作用,低和中浓度SFPS分别对母本和父本果蝇的生育力促进效果最优;持续喂食SFPS后,亲本果蝇生殖发育相关基因在mRNA水平上显著提高;亲本喂食低、高浓度SFPS后,子代果蝇mTOR表达水平普遍升高,子代雌蝇变化更为显著。结论 SFPS通过调控果蝇生育相关基因的表达,提高亲本果蝇的生育能力,对子代果蝇的生长发育也有显著促进作用。     

五味子提取工艺优化及乙醇提取物的皮肤细胞抗氧化作用研究

目的 探究五味子提取物对人皮肤细胞氧化损伤的保护作用,开发其在皮肤抗氧化方面的应用。方法 分别采用热水蒸煮和水蒸气蒸馏的方法进行脱色和除味;另外,采用叔丁基过氧化氢（tBHP）诱导的HaCaT细胞氧化应激模型评价五味子提取物对人皮肤细胞氧化损伤的保护作用,采用CCK-8试剂盒检测细胞存活率,AnnexinV-FITC/PI双标记流式细胞仪检测细胞凋亡率,2,7-二氯荧光黄双乙酸盐法检测细胞内活性氧的水平。结果 采用优化后的提取工艺得到了气味变淡且颜色明显变浅的五味子提取物;用北五味子提取物预处理HaCaT细胞6 h后,可有效降低tBHP引起的细胞凋亡,提高细胞存活率,降低细胞内ROS水平。结论 优化后的乙醇提取工艺显著改善了五味子提取物的颜色和气味,并保持了提取物的抗氧化活性,因而有望成为一种应对皮肤氧化损伤的外用保护剂。     

羊栖菜多糖通过激活JNK/Nrf2/ARE信号通路延缓小鼠衰老进程作用研究

目的研究羊栖菜多糖(SFPS)发挥抗氧化、抗衰老的作用机制。方法采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和Western blotting法检测不同月龄雄性小鼠和ig给予SFPS的老年雄性小鼠肝脏中c-Jun氨基末端激酶1/2(JNK1/2)的表达;RT-PCR特异性区分JNK的各蛋白异构体,并检测各异构体在ig SFPS或生理盐水的自然衰老小鼠肝脏中的表达水平;免疫共沉淀和ARE-荧光素酶报告基因检测JNK激活转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)/ARE信号通路的分子机制。结果 JNK1/2的表达水平与小鼠的衰老进程呈负相关,JNK1-β2、JNK2-α1、JNK2-β2 mRNA表达水平在小鼠衰老过程中显著下降,而ig给予SFPS能够显著提高老年小鼠JNK1-β2(5.4×10~4)的表达水平,JNK(5.4×10~4)蛋白与抗氧化因子Nrf2存在相互作用,且JNK1-β2(5.4×10~4)能够显著激活Nrf2/ARE信号通路。结论 JNK1-β2、JNK2-α1和JNK2-β2与衰老进程负相关,含有C-terminaltail的JNK1-β2能够显著激活Nrf2/ARE抗氧化信号通路。SFPS能显著提高老年小鼠JNK1-β2(5.4×10~4)和Nrf2/ARE信号通路的表达水平,进而提高机体的抗氧化能力,最终延缓小鼠的衰老进程。     

高效毛细管电泳在中药鉴别中的应用

综述了高效毛细管电泳(HPCE)在植物类和动物类药材鉴定中的应用现状，指出了HPCE作为高效分离技术显示出在中药鉴定中的优势，同时也提出了存在的问题。     

不同地理居群北草蜥染色体组型的比较分析

目的：研究了浙江北麂、洞头、缙云、泰顺和贵州贵阳五个地理居群北草蜥（Takydromus septentrionalis）的染色体组型。方法：采用常规骨髓细胞空气干燥法制备染色体。结果：北草蜥五个地理居群的二倍体均为2n=38（38I）,NF=38,含有18对大染色体和1对小染色体,且全部为端部着丝粒染色体。北草蜥具异型性性染色体,雌性为ZW,雄性为ZZ。结论：五个不同地理居群北草蜥之间的染色体在相对长度方面存在着较大的差异,说明不同地理居群的北草蜥染色体具有丰富的多样性。