女贞子多糖联合布地奈德在哮喘幼鼠模型中的免疫调节及抗氧化作用研究北大核心CSCD

目的:探讨女贞子多糖(LVFP)与布地奈德联用对哮喘幼鼠免疫调节、气道炎症及氧化应激的影响。方法:从女贞子中提取LVFP,并采用傅里叶变换红外光谱、高压离子色谱及高效凝胶过滤色谱技术对LVFP表征进行鉴定。40只BALB/c幼年小鼠随机分为对照组(Control)、哮喘组(OVA)、OVA+布地奈德组(OVA+budesonide)及OVA+LVFP+布地奈德组(OVA+LVFP+budesonide),每组10只,OVA致敏、激发哮喘症状构建哮喘幼鼠模型,激发周期内OVA+budesonide及OVA+LVFP+budesonide组分别给予布地奈德(3μg/d,吸入)或LVFP[(400 mg/(kg·d),灌胃]+布地奈德(3μg/d,吸入),第28天监测气道反应性,第29天处死幼鼠,ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子表达,血细胞计数仪、Wright-Giemsa染色法进行炎症细胞计数,流式细胞术检测BALF中炎症细胞比例变化。Western blot测定肺组织氧化应激及线粒体融合、分裂相关蛋白表达。结果:与OVA组相比,OVA+LVFP+布地奈德组支气管高反应性显著降低(P<0.05),BALF中总炎症细胞数和嗜酸性粒细胞数显著减少(P<0.05),哮喘状态下树突状细胞比例显著降低(P<0.05),而抗炎自然杀伤细胞及调节性T细胞比例升高(P<0.05),炎症因子IL-4、IL-5、IL-9、IL-10、IL-13及TGF-β水平降低(P<0.05)。LVFP与budesonide联用还可抑制氧化相关蛋白硝基络氨酸、超氧化物歧化酶2(SOD2)及线粒体融合和分裂相关蛋白OPA1、线粒体融合蛋白2、动力蛋白相关蛋白1及线粒体分裂蛋白1表达(P<0.05)。结论:LVFP与布地奈德联用可降低支气管高反应性,调节免疫细胞数量,减轻肺部炎症反应,抑制氧化应激,有望用于哮喘治疗。     

个性化预测新生儿坏死性小肠结肠炎发病风险的列线图模型构建

目的 探究个性化预测新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)发病风险的列线图模型构建,为新生儿NEC的防治提供科学依据。方法 回顾性分析2017年10月—2019年12月海南现代妇女儿童医院与外院联合收集的1 173例新生儿临床资料,根据是否发生NEC分为NEC组(n=46)与非NEC组(n=1 127),采用Logistic回归模型分析影响NEC发生的独立危险因素,基于筛选出的独立危险因素利用R软件构建NEC发生风险的列线图模型,应用ROC曲线下面积检验模型预测效果并进行拟合优度验证。结果 新生儿NEC发生率为3.92%(46/1 173);多因素Logistic回归分析显示,胎龄＜32周(OR=3.186)、出生体重＜1.5 kg(OR=2.520)、合并感染性休克(OR=2.517)、合并败血症(OR=2.566)、合并妊娠期糖尿病(OR=1.973)、人工喂养(OR=2.267)为影响新生儿NEC发生的独立危险因素(P<0.05),产前使用地塞米松为保护性因素(OR=0.475,P＜0.05);该预测模型ROC曲线下面积为0.741;Hosmer-Lemeshow 拟合优度检验χ²=7.859,P=0.447;绘制列线图的校准曲线为斜率接近1的直线。结论 个性化预测新生儿NEC发病风险的列线图模型具有良好的区分度与准确度,可有效评估新生儿NEC的发生概率,能够为新生儿NEC的防治提供一定指导价值。     

高胆红素血症新生儿血清miR-122水平与肝功能各项指标及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏的相关性研究

目的:探讨高胆红素血症(NHB)新生儿血清miR-122表达与肝功能各项指标和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺乏的相关性。方法:将2020年3月至5月于我院新生儿科足月分娩的新生儿217例,根据临床症状和血清总胆红素(TBil)检测结果分为NHB组(n=144)和非NHB组(n=73),比较两组新生儿肝功能各项指标[谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、TBil、白蛋白(Alb)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转肽酶(GGT)]以及红细胞G-6-PD酶活性。采用实时荧光定量PCR法检测患儿血清miR-122相对表达量,并分析其与各指标之间的关系。结果:与非NHB组相比,NHB组新生儿血清ALT、AST、GGT、Alb、TBil、CRP水平(Z=-11.858~-2.126,均P<0.05)以及血清miR-122相对表达量(t=4.721,P<0.05)显著升高。根据血清TBil水平,将NHB患儿分为轻度、中度、重度3个亚组;与轻度亚组和中度亚组相比,重度亚组NHB新生儿血清ALT、AST、GGT、TBil、CRP、PCT水平以及血清miR-122相对表达量均升高(H=6.045~63.896,均P<0.05)。NHB患儿血清miR-122相对表达量与ALT、AST、GGT、TBil、PCT水平呈正相关性(r=0.173~0.550,均P<0.05)。22例新生儿G-6-PD缺乏,其血清miR-122相对表达量显著高于G-6-PD正常新生儿(Z=36.831,P<0.05)。结论:在NHB新生儿中,血清miR-122相对表达量普遍升高,这与AST、ALT、AST、GGT、TBil、PCT水平升高、G-6-PD酶缺乏有关,因此加强血清miR-122水平检测有助于更准确地评估NHB患儿肝损伤情况。     

lncRNA LINC01419 靶向 miR-320a 对小儿类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的：探讨lncRNA LINC01419对小儿类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法：取2017年1月至2019年12月本院21例小儿类风湿关节炎患者的滑膜组织及21例因骨折式创伤截肢者的膝关节正常滑膜组织;分离培养小儿类风湿关节炎滑膜成纤维细胞（RASFs）,将其分为si-NC组、si-LINC01419组、pcDNA组、pcDNALINC01419组、miR-NC组、miR-320a组、si-LINC01419+anti-miR-NC组、si-LINC01419+anti-miR-320a组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LINC01419和miR-320a的表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;Western blot法检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达;荧光素酶报告实验检测LINC01419和miR-320a的靶向关系。结果：与正常滑膜组织相比,小儿类风湿关节炎患者滑...     

呼吸道合胞病毒下呼吸道感染病儿外周血微小 RNA-145表达与 T淋巴细胞亚群的关系

目的 探讨呼吸道合胞病毒(RSV)下呼吸道感染肺炎病儿外周血血浆中微小RNA-145(mir-145)表达与外周血单个核细胞(PBMC)中T淋巴细胞亚群的关系.方法 选取2017年1月至2018年12月海南现代妇女儿童医院收治的RSV下呼吸道感染肺炎病儿126例作为RSV肺炎组,同期在本院进行体检的健康儿童130例作为健康对照组.RSV肺炎组根据病情严重程度分为轻度组(n=54)、重度组(n=72),并依据重度组是否给予机械通气分为非机械通气组(n=38)、机械通气组(n=34).利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外周血血浆中mir-145表达水平,使用流式细胞仪及配套试剂盒检测PBMC中T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平,并用MRFlow流式细胞分析软件自动行CD3+、CD4+、CD8+绝对计数,同时计算CD4+/CD8+值.结果 RSV肺炎组病儿血浆mir-145表达[(1.74±0.48)比(0.99±0.26)]及PBMC中CD8+水平[(30.75±8.39)％比(21.64±5.92)％]均显著高于健康对照组(P<0.05),PBMC中CD3+[(59.04±16.12)％比(68.77±18.35)％]、CD4+水平[(31.27±8.01)％比(46.90±12.84)％]及CD4+/CD8+值[(1.02±0.28)比(2.17±0.63)]均明显低于健康对照组(P<0.05).重度组病儿血浆mir-145表达[(1.87±0.55)比(1.52±0.40)]及PBMC中CD8+水平[(33.96±9.10)％比(25.34±7.02)％]均明显高于轻度组病儿(P<0.05),PBMC中CD3+[(57.05±15.83)％比(63.28±17.21)％]、CD4+水平[(23.78±6.62)％比(38.09±10.14)％]及CD4+/CD8+值[(0.70±0.21)比(1.50±0.39)]均显著低于轻度组病儿(P<0.05).重度RSV肺炎机械通气组病儿血浆mir-145表达[(1.95±0.58)比(1.68±0.45)]及PBMC中CD8+水平[(34.92±9.18)％比(28.17±7.49)％]均显著高于非机械通气组病儿(P<0.05),PBMC中CD3+[(54.72±13.53)％比(61.83±16.04)％]、CD4+水平[(20.45±5.79)％比(34.03±8.85)％]及CD4+/CD8+值[(0.59±0.17)比(1.21±0.36)]均明显低于非机械通气组病儿(P<0.05).RSV肺炎病儿血浆mir-145表达与PBMC中CD3+水平呈负相关(P<0.05),与PBMC中CD4+水平呈负相关(P<0.05),与PBMC中CD8+水平呈正相关(P<0.05),与CD4+/CD8+值呈负相关(P<0.05).结论RSV下呼吸道感染肺炎病儿外周血血浆中mir-145表达水平升高,其高表达可能与T淋巴细胞亚群异常有关.