GC-MS/MS法测定缬沙坦氢氯噻嗪制剂中N-亚硝基二甲胺与N-亚硝基二乙胺

摘要：目的:建立GC-MS/MS法同时测定缬沙坦氢氯噻嗪制剂中基因毒性杂质N-亚硝基二甲胺（NDMA）与N-亚硝基二乙胺（NDEA）含量的方法。方法:使用Thermo TG-WAMS毛细管柱（30 m×0.25 mm, 0.25μm）,采用脉冲不分流进样模式,利用程序升温进行分离,通过EI离子源和SRM模式测定NDMA和NDEA。结果:NDMA和NDEA分别在0.54～108.99 ng·ml-1（r=0.999 9）与0.20～100.00 ng·ml-1（r=0.999 8）浓度范围内线性关系良好,NDMA检出限为0.22 ng·ml-1;NDMA和NDEA加样回收率分别为101.6%,102.0%,RSD分别为2.2%,2.7%（n=9）。结论:该方法专属性好、灵敏度高、准确度高和样品制备简单,可用于缬沙坦氢氯噻嗪制剂中NDMA和NDEA检测。     

HPLC法同时测定徐长卿及老君须提取物中咖啡酸、橙皮苷、白薇苷A和胡萝卜苷含量

摘要：目的:建立HPLC法同时测定徐长卿及老君须提取物中咖啡酸、橙皮苷、白薇苷A和胡萝卜苷,并比较两种提取物中各成分的含量差异。方法:采用Agilent Zorbax C18色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5μm）,以0.15%磷酸水（A）-乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱,流速1 ml·min-1,柱温40℃,检测波长为260 nm和210 nm。结果:咖啡酸、橙皮苷、白薇苷A和胡萝卜苷分别在2.170 0～86.800 0 mg·L-1、5.412 5～216.500 0 mg·L-1、3.595 0～143.800 0 mg·L-1和4.090 0～163.600 0 mg·L-1范围内线性关系良好。通过研究发现,徐长卿提取物中咖啡酸、橙皮苷、白薇苷A和胡萝卜苷的含量分别为2.044 0,5.954 0,3.905 0,4.310 0 mg·g-1,而老君须提取物中仅可检测到白薇苷A和胡萝卜苷,含量分别为4.953,7.672 mg·g-1。结论:该方法简便、稳定,重复性好,可用于徐长卿及老君须提取物的质量评价。     

三七药材中262种农药多残留筛查及风险评估

目的:对三七中农药多残留进行筛查研究,初步了解其农药残留状况,并评估高检出农药的健康风险,为现有标准最大残留限量值的制(修)订提供科学依据。方法:以乙腈为溶媒,对收集的16批三七进行高速匀浆法提取处理;针对拟定的检测指标,分别采用气相色谱串联质谱法(GC-MS/MS)和高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)、多反应监测(MRM)模式进行检测,以不少于2组特征离子对进行定性,并采用校准曲线法对检出农药进行定量检测;结合本课题组前期建立的风险评估方法,对检出率较高的高风险农药进行暴露评估,计算其急性和慢性摄入风险。结果:所建方法共有262个农药指标(总计271个化合物),在线性范围内线性关系良好,灵敏度、回收率均符合痕量多残留分析技术要求。16批三七样品中共检出50种农药,农药检出率较高,多数检出农药处于痕量水平,仅百菌清、毒死蜱、三氟氯氰菊酯、异菌脲、五氯硝基苯、甲基硫菌灵超出团体标准《无公害三七药材及饮片农药与重金属及有害元素的最大残留限量》(T/CATCM 003—2017)的最大残留限量(MRL)。水洗可明显降低部分检出农药的残留量。对超出限量标准,以及无相关限量标准但检出率较高的农药品种进行风险评估,结果显示,9种农药的短期危害指数(HIa)为0.0002~0.1418、长期危害指数(HIc)为0.0004~0.0090,其中五氯硝基苯的HIa和HIc较高,但风险可接受。结论:建立了三七中262种农药多残留筛查方法,并采用暴露评估方法中的点评估模式对其进行健康风险评估,可为三七相关农药残留限量标准的制修订提供参考。     

基于代谢组学和斑马鱼模型探究西洋参抗疲劳的关键活性成分

探索西洋参皂苷类成分中抗疲劳关键活性成分。利用斑马鱼模型评价西洋参样本的抗疲劳活性;运用代谢组学技术分析鉴定不同产地西洋参中主要皂苷类差异成分;通过构建西洋参皂苷类成分-疾病靶点PPI蛋白互作网络初步筛选出西洋参发挥抗疲劳作用的活性物质和相关靶点,利用分子对接的方法筛选出关键活性成分;最后使用斑马鱼模型评价关键活性成分的抗疲劳活性,动物实验获得山东省医学科学院伦理委员会的批准(SYXK20220005)。斑马鱼活性评价结果显示,两个产地的西洋参样本的活性存在显著差异,进一步经过代谢组学检测、模式判别共鉴定出其中10个差异皂苷类成分可能与抗疲劳活性有关。借助成分-疾病靶点的PPI筛选的抗疲劳的核心靶点,结合类药性参数及分子对接技术发现其中pseudoginsenoside F11与5个靶点均具有较好的结合活性。经斑马鱼模型验证发现拟人皂苷F11具有显著的抗疲劳活性。本研究运用代谢组学和斑马鱼模型筛选出了西洋参发挥抗疲劳的关键活性物质,为西洋参皂苷类抗疲劳的进一步研究提供参考。