花生四烯酸对游离脂肪酸诱导肝细胞胰岛素抵抗的缓解作用研究

目的：探讨游离脂肪酸（FFA）诱导肝细胞胰岛素抵抗及花生四烯酸（从）在软脂酸（PA）诱导的肝细胞胰岛素抵抗中的作用。方法：分别用不同浓度的PA和从与HepG2细胞共同培养不同的时间，并设立正常对照组（Coatrol组）。采用葡萄糖氧化酶法测定培养液中的葡萄糖浓度，蒽酮法测定细胞内糖原含量以确定HepG2细胞产生胰岛素抵抗程度．结果：1．0．25mmol／L PA组中的葡萄糖浓度高于Control组和PA＋AA（20umol／L）组（P〈0．05），糖原含量低于Control组和PA＋从（20umol／L）组（P〈0．05）。2，PA从（20umol／L）组与0．25mmol／L PA组比较，PA＋AA（50umol／L）组与Control组比较，葡萄糖浓度和糖原含量变化有显著意义（P〈0．05）。结论：高浓度的PA可以诱导肝细胞产生胰岛素抵抗，并呈现剂量依赖性；一定浓度的从能够缓解PA引起的胰岛素抵抗。     

褪黑素对软脂酸诱导L02细胞胰岛素抵抗的防护作用及机制

目的探讨褪黑素(MT)对软脂酸(PA)诱导L02细胞胰岛素抵抗的防护作用及机制。方法培养L02细胞,分别设立对照组(BSA组)、PA组、PA+MT组、PA+维生素C(Vit C)组。各组药物浓度和孵育时间根据不同的实验需要来确定。用荧光比色法测定各组细胞胞内氧自由基(ROS)水平,Western印迹法检测胰岛素刺激后胞内胰岛素信号蛋白磷酸化水平,包括Y-p-胰岛素受体(IR)、Y-p-胰岛素受体底物(IRS)1/2以及应激敏感激酶p-JNK水平。结果用不同浓度的PA处理L02细胞24 h,细胞内ROS生成量呈现明显的浓度依赖关系,差异有统计学意义(P<0.05);用0.3 mmol/L的PA处理L02细胞不同时间,细胞内ROS生成量存在明显的时间依赖关系,在24 h达到最高,并在36 h后仍维持较高水平(P<0.05);与BSA组相比,PA组ROS含量明显升高(P<0.05)PA+MT组ROS含量无明显变化(P>0.05);PA+MT组ROS生成量明显低于PA组(P<0.05)。PA+Vit C组与PA组相比,ROS的生成量减少,但仍高于PA+MT组(P<0.05)。与BSA组相比,PA组Y-p-IR、Y-p-IRS1/2磷酸化水平减少,而p-JNK磷酸化水平升高;与PA组相比,PA+MT组Y-p-IR、Y-p-IRS1/2磷酸化水平显著升高,p-JNK磷酸化水平明显降低(P<0.05)。结论 PA导致细胞内ROS增加,MT能够清除PA产生的过量ROS。MT通过减少JNK的活化,改善因ROS引起的胰岛素信号传递损伤,对PA诱导的胰岛素抵抗具有防护作用。     

枸杞多糖抗家兔动脉粥样硬化的实验研究

目的:探讨枸杞多糖对新西兰兔动脉粥样硬化形成的作用及机制。方法:将40只雄性新西兰兔随机分为4组,每组10只,对照组喂普通饲料;模型组,普通饲料加质量分数为1.5%胆固醇喂养;枸杞多糖(LBP)组,普通饲料加质量分数为1.5%胆固醇喂养,同时按体重腹腔注射LBP(3.0mg/kg);卡托普利组,普通饲料加质量分数为1.5%胆固醇喂养,同时按体重灌喂卡托普利(15.0 mg/kg)。10周后,测定各组空腹血清三脂酰甘油(TG)、总胆固醇(TCh)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、丙二醛(MDA)、C反应蛋白(CRP)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活性,计算主动脉内膜粥样斑块面积并观察主动脉形态学变化。结果:模型组与对照组比较,TG、TCh、NO、MDA、ET-1、CRP明显升高(P<0.01),HDL-C/TCh、SOD活性明显下降(P<0.01),主动脉内膜粥样斑块面积较大;而LBP组与模型组比较,TG、CRP、NO、ET-1、MDA明显下降(P<0.01),TCh无明显变化,HDL-C/TCh比值、SOD活性明显升高(P<0.01),主动脉内膜粥样斑块面积明显减少(P<0.01),模型组与卡托普利组各项指标无差异。结论:枸杞多糖对动脉粥样硬化有明显的预防和治疗作用,其机制可能与抗氧化、调节免疫、提高HDL-C/TCh有关。     

植物多糖对家兔动脉粥样硬化脂质过氧化及炎症反应的干预

目的:探讨枸杞多糖、黄芪多糖对家兔动脉粥样硬化(As)脂质过氧化及炎症反应的干预机制。方法:将48只雄性新西兰大白兔随机分为4组:正常组(12只),As模型组(12只),枸杞多糖(LBP)治疗组和黄芪多糖(APS)治疗组。10周后,测定各组空腹甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCh)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、C反应蛋白(CRP)、内皮素-1(ET-1)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活性,并计算HDL-C/TCh,同时计算主动脉内膜粥样斑块面积。结果:模型组与正常组比较,TG、TCh、ET-1、NO、CRP、MDA明显升高(P<0.01),HDL-C/TCh、SOD活性明显下降(P<0.01),主动脉内膜粥样斑块面积较大;而LBP和APS治疗组与模型组比较,TG、ET-1、NO、CRP明显下降(P<0.01),HDL-C/TCh和SOD活性明显升高(P<0.01),主动脉内膜粥样斑块面积明显减少(P<0.01)。结论:枸杞多糖和黄芪多糖对动脉粥样硬化有明显的预防和治疗作用,机制可能与降低血脂、抗氧化、调节免疫等功能有关。     

Avandamet对糖尿病小型猪胰岛β细胞及糖代谢的影响

型组升高(P<0.05),与正常组持平;胰腺组织结构基本正常,较模型组明显改善,胰腺组织中胰岛素含量、胰岛β细胞占胰岛面积的百分比均较模型组升高(P<0.05).结论:复方制剂Avandamet有降低糖尿病小型猪血浆葡萄糖水平,减轻胰岛素抵抗和保护胰岛β细胞的作用.     

微小 RNA?129?5p在喉鳞状细胞癌中的表达及对细胞增殖、侵袭的影响

目的 研究微小RNA-129-5p在喉鳞状细胞癌中的表达及对细胞增殖、侵袭的影响.方法 采用实时定量实时荧光定量PCR仪(RT-qPCR)检测喉鳞状细胞癌、癌旁组织及喉鳞状细胞癌Hep-2细胞中miR-129-5p表达水平,转染miR-129-5p模拟物(mimics)喉鳞状细胞癌Hep-2细胞设为mimics组,转染miR-129-5p mimics空白对照组(NC)喉鳞状细胞癌Hep-2细胞设为mimics-NC组,将未转染喉鳞状细胞癌Hep-2细胞设为NC组.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、平板克隆试验检测各组喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖情况;采用Transwell各组喉鳞状细胞癌Hep-2细胞侵袭情况;采用蛋白质印迹法试验检测各组喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖、侵袭相关蛋白表达水平.结果 与癌旁组织(1.03±0.14)比较,喉鳞状细胞癌组织中miR-129-5p(0.48±0.08)表达水平显著降低(P<0.05).同一时间和不同时间NC组、mimic-NC组miR-129-5p表达水平、喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖抑制率、平板克隆形成率、侵袭细胞数、一抗鼠源原癌基因(c-Myc)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05).同一时间与NC组、mimics-NC组比较,mimics组miR-129-5p表达水平、喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖抑制显著增加(P<0.05),与24 h比较,48 h mimics组miR-129-5p表达水平、喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖抑制显著增加(P<0.05).平板克隆形成率为(98.96±10.60)％、(97.57±10.82)％、(46.91±9.03)％、侵袭细胞数为(235.62±36.18)、(227.31±35.90)、(94.38±19.86)个、c-Myc(3.92±0.71)、(3.89±0.60)、(2.18±0.46)、Cyclin D1(1.54±0.27)、(1.52±0.30)、(0.39±0.08)、MMP-2(1.12±0.28)、(1.11±0.25)、(0.36±0.07)、MMP-9(1.03±0.14)、(0.98±0.13)、(0.29±0.05)蛋白水平均显著降低(均P<0.05).结论 miR-129-5p在喉鳞状细胞癌组织中低表达,上调miR-129-5p可抑制喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖及侵袭.     

生物化学与分子生物学在医学教育中的重要性及教学探索

生物化学与分子生物学是一门重要的医学基础课程,越来越成为生命学科的共同语言。由于其内在知识结构系统性强、内容抽象、缺乏直观性,教学过程又受到其它基础学科的制约,严重影响了学生的学习兴趣和教学效果。21世纪是揭示生命现象内在奥秘的世纪,在医学教学中教学时间有限性和知识增长无限性之间的矛盾越来越尖锐,要解决好这一矛盾,保证知识、能力、素质的协调发展,关键是深化教学内容和教学方式的改革,充分利用有限的授课时间最大限度的提高教学效率和效果。     

Ibrolipim对糖尿病小型猪视网膜血管内皮生长因子表达的影响

目的　观察血管内皮生长因子(VEGF)在早期糖尿病视网膜病变中的表达以及Ibrolipim (NO 1886)对 2型糖尿病小型猪血糖的影响;探讨药物Ibrolipim对视网膜VEGF的作用。 方法　采用高脂高蔗糖饲料喂养贵州小香猪,创建 2型糖尿病动物模型,并用Ibrolipim进行干预,用RT PCR、免疫组织化学和Westernblot技术检测VEGF转录和蛋白表达。 结果　正常组视网膜VEGFmRNA表达量少,免疫组织化学反应阳性较弱,VEGF蛋白表达较低;实验组视网膜VEGFmRNA表达上调,免疫组织化学反应呈强阳性 (P<0 01 ),VEGF蛋白表达增高;治疗组视网膜VEGFmRNA及VEGF蛋白表达介于其他两组之间。 结论　早期糖尿病视网膜中VEGF表达增高;Ibrolipim可通过降低血糖,改善视网膜组织缺氧,来抑制VEGFmRNA及蛋白的表达。     

优化组合生物化学实验 提高学生综合能力

在本科生的生物化学教学中,对生物化学实验进行优化组合,采用问卷调查的形式获得信息。从统计结果可见:改革后的生物化学实验教学,能很好地以学生为主体,提高了学生的综合能力、思维能力和分析问题的能力,对培养学生的综合素质,全面提高实验教学质量有着重要意义。     

枸杞多糖对动脉粥样硬化模型兔血脂、脂质过氧化、NO和C-反应蛋白的影响

目的:探讨枸杞多糖对新西兰兔动脉粥样硬化的预防作用及其机制。方法:36只雄性新西兰兔随机分 为3组,每组12只。对照组喂普通饲料,模型组采用普通饲料加质量分数1.5%的胆固醇喂养,枸杞多糖(LBP)组 采用普通饲料加质量分数1.5%的胆固醇喂养,同时腹腔注射LBP(3.0mg/kg),10周后,测定各组空腹血清三酯酰 甘油(TG)、总胆固醇(TCh)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL- C)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、C -反应蛋白(CRP)含 量以及超氧化物歧化酶(SOD)活性,计算主动脉内膜粥样斑块面积并观察主动脉形态学变化。结果:模型组与对照 组比较,TG、TCh、NO、MDA、CRP升高(P<0.01),HDL- C/TCh、SOD活性下降(P<0.01),主动脉内膜粥样斑块面积 较大(P<0.01);LBP组与模型组比较,TG、NO、MDA、CRP下降(P<0.01或0.05),HDL -C/TCh、SOD活性升高 (P<0.01),主动脉内膜粥样斑块面积明显减少(P<0.05)。结论:枸杞多糖对动脉粥样硬化有明显的预防和治疗 作用,可能与其抗氧化、免疫调节、提高HDL- C/TCh有关。