血清IL-28A和HMGB1在强直性脊柱炎中的表达及与疾病活动和疗效的关系

目的:探讨血清白细胞介素28A(IL-28A)和血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在强直性脊柱炎中的表达情况,并分析其与疾病活动及疗效的关系。方法:95例强直性脊柱炎患者,根据ASDAS-CRP将其分为活动组(n=60)和稳定组(n=35),同期选取70名健康体检者作为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-28A和HMGB1水平,并比较各组差异,绘制ROC曲线分析血清IL-28A和HMGB1检测对强直性脊柱炎的诊断效能;比较不同活动度强直性脊柱炎患者血清IL-28A和HMGB1差异,并用Pearson法分析其关系;比较治疗前后各组血清IL-28A和HMGB1水平以评估疗效。结果:治疗前,活动组、稳定组和对照组血清IL-28A和HMGB1水平比较,差异有统计学意义(F=18.192,P=0.001;F=39.437,P<0.001);绘制ROC曲线,与单项检测比较,血清IL-28A和HMGB两者联合检测明显提高了AS特异度和敏感度;治疗前,低度活动者、中度活动者和高度活动者血清IL-28A和HMGB1水平比较,差异有统计学意义(F=14.627,P<0.001;F=8.342,P<0.001);经Pearson法分析得知,血清IL-28A和HMGB1与ASDAS-CRP值均呈正相关(r=0.675,P=0.024;r=0.704,P=0.011);与治疗前比较,治疗后活动组血清IL-28A和HMGB1均明显降低,且差异有统计学意义(t=16.483,P<0.001;t=10.682,P=0.001)。结论:血清IL-28A和HMGB1在AS中高表达,与疾病活动度呈正相关,在AS诊断及疗效评估上有一定价值。     

PARP1通过调控N-糖基转移酶FUT8影响胃癌AGS细胞的增殖与5-FU耐药

目的：探讨聚二磷酸腺苷核糖聚合酶 1（PARP1）对胃癌AGS细胞的增殖和5-FU耐药性的影响及其可能的机制。方法：收集2018年5月至2019年12月于恩施土家族苗族自治州中心医院就诊的72例胃癌患者的肿瘤组织和癌旁组织,采用qPCR和免疫组化法检测胃癌和癌旁组织中PARP1的表达状况。CCK-8法、流式细胞术和集落形成实验分别检测PARP1抑制剂AG14361对胃癌AGS细胞增殖、凋亡和集落形成的影响,MTT法检测AG14361对胃癌细胞5-FU敏感性的影响。mRNA测序分析AG14361处理AGS细胞后差异基因整体分布情况,KEGG富集分析相关信号通路。向AGS细胞转染siFUT8以敲减FUT8基因的表达,qPCR和WB法检测AGS细胞内α-1,6-岩藻糖基转移酶（FUT8）的表达状况和敲减FUT8效果,CCK-8法、流式细胞术和集落形成实验分别检测AG14361处理对敲减FUT8表达的AGS细胞增殖、凋亡和集落形成的影响。结果：与癌旁组织相比,胃癌组织中PARP1呈高表达（P<0.001）。AG14361 处理可显著抑制 AGS 细胞的增殖和细胞集落形成,促进AGS细胞凋亡（均P<0.01）。AG14361处理可降低5-FU杀伤胃癌细胞的IC50,且在 AGS 细胞中尤为明显 ,IC50 下降超过 60%。mRNA测序结果显示,N-糖基化修饰中FUT8是AG14361抑制AGS细胞增殖的关键糖基转移酶（P<0.05）。与siNC组相比,IC50浓度的AG14361可显著逆转干扰FUT8对AGS细胞增殖的增加,促进细胞凋亡和BAX蛋白表达、抑制Bcl2蛋白表达,抑制FUT8干扰所致AGS细胞集落的增加（均P<0.01）。结论：PARP1可通过调控N-糖基转移酶FUT8促进胃癌细胞恶性转化,其抑制剂AG14361可增强胃癌细胞对5-FU的敏感性,PARP1可能成为胃癌治疗的一个潜在靶标。     

芝麻素对冠心病大鼠心肌细胞凋亡的影响及PKCα/NF-κB信号途径的作用研究

目的分析芝麻素对冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)大鼠心肌细胞凋亡及PKCα/NF-κB信号途径的影响。方法选取30只SPF级雄性SD大鼠分为对照组、模型组和观察组,每组各10只。模型组和观察组大鼠予以高脂饲料连续饲养16周,对照组给予基础饲料喂养。观察组造模完成后芝麻素灌胃治疗1/d,对照组和模型组使用等体积生理盐水进行干预。干预结束后禁食12 h检测三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。以乙酰胆碱(ACH)和酸化亚硝酸钠刺激大鼠主动脉并记录血管张力变化。使用TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况。采用Westernblot法检测心肌组织中Caspase-3。结果观察组大鼠血中TC水平明显低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组大鼠经ACH刺激后血管最大舒张程度明显低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组心肌细胞凋亡率明显低于模型组,Caspase-3和Caspase-12蛋白表达水平明显低于模型组,且差异具有统计学意义(P<0.05);观察组心肌细胞p-PKCα、p-IκBα和NF-κB p65蛋白表达水平明显低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论芝麻素通过调控PKCα/NF-κB信号途径有效抑制冠心病大鼠的心肌细胞凋亡。     

急性肾功能衰竭犬不同小肠段黏膜超滤量测定及川芎嗪的作用

目的:观察比较单纯透析液及加入不同剂量川芎嗪透析液对急性肾功能衰竭犬不同小肠段黏膜液体吸收能力及超滤量的影响,分析川芎嗪在其中的作用。方法:实验于2004-06/07在湖北民族学院医学院实验中心和恩施自治州中心医院检验科完成。①选用Beagle犬20只,雌性。按随机抽签法分为4组,每组5只:生理盐水组、透析液组、川芎嗪低剂量组和川芎嗪高剂量组。据肠系膜动静脉供血区对犬手术制作隔离空肠袢、空回肠袢和回肠袢,阻流双肾动脉,静脉输入高渗样品液,造成急性肾功能衰竭模型,自输入高渗样品液开始,生理盐水组、对照组、川芎嗪低剂量组和川芎嗪高剂量组前4h内每隔30min分别从各肠袢近端口注入生理盐水、透析液[透析液(mmol/L):甘露醇180,钠60,钾3.7,氯46,碳酸氢盐26.7,钙1.6,葡萄糖35.1,pH7.34]、含川芎嗪(注射液,常州制药厂生产,40mg/支,批号991210)20mg/L透析液、含川芎嗪80mg/L透析液250mL并采各肠袢系膜主干动静脉血各3mL、收集各肠袢液,6h内完成,总时间为360min,各得样品13次。采用生化分析仪器和电解质分析仪器检测血清K ,Na ,Cl-,尿素,肌酐,尿酸浓度。②根据131I标示白蛋白稀释法计算肠袢内透析液容量,计算淋巴吸收量=该时间点该溶质动脉血浆浓度-该时间点该溶质静脉血浆浓度;总吸收量=该时间点该溶质静脉血浆浓度 淋巴吸收量;30min肠袢黏膜平均超滤量=(6h时肠袢内液体容量-总灌入透析液量)/12。③各组间计量资料差异比较用方差分析,两两比较用Fisher’sPLSD检验。结果:犬20只均进入结果分析。①空肠袢液分泌量:实验各时间段各透析组空肠腔内液体分泌量明显高于生理盐水组(P<0.01)。川芎嗪低剂量组排液量在实验30～240min后明显高于其他3组(P<0.01)。②不同小肠段肠袢黏膜液体吸收量:空肠袢总吸收量最弱,而淋巴吸收量最强,分别是其他肠袢的5～8倍(P<0.01)。川芎嗪高剂量组各肠袢淋巴吸收量明显低于川芎嗪低剂量组(P<0.05),而高于生理盐水组(P<0.05～0.01)。③小肠段肠袢30min肠袢黏膜平均超滤量:透析液能显著提高各肠袢对K ,Na ,Cl-,尿素,肌酐,尿酸的平均超滤量(P<0.05～0.01),其中各透析液组空肠袢平均超滤量明显在各肠袢中最高,从空肠到回肠呈递减趋势;同一肠袢比较,川芎嗪低剂量组明显高于其他3组(P<0.01)。川芎嗪低剂量组明显高于其他3组(P<0.01)。结论:低剂量川芎嗪加入到透析液中可增加小肠袢超滤及透析效能,空肠袢透析效能最好。     

紫草素通过TLR4/NF-κB信号通路抑制由脂多糖诱导的巨噬细胞炎症研究

目的 研究紫草素抑制由脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞炎症的机制.方法 以淀粉培养基注射BALB/c小鼠腹腔,诱导并分离巨噬细胞,以APC标记F4/80染色,并用流式细胞仪检测分离巨噬细胞情况;用1 mg·L-1的LPS刺激上述分离的巨噬细胞,分组如下:DMSO溶剂对照组,LPS对照组,LPS+低剂量紫草素组(0.1 μmol·L-1);LPS+中剂量紫草素组(1 μmol·L-1);LPS+高剂量紫草素组(10 μmol·L-1);通过ELISA和实时定量PCR(qRT-PCR)方法分别测定各处理组培养上清液以及细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)的表达情况;Western blot分别测定Toll样受体4(TLR4)和核因子-κB(NF-κB)的p65亚基磷酸化表达情况.结果 流式细胞检测可知,APC标记的F4/80染色巨噬细胞的纯度可达97.8%;ELISA和实时定量PCR结果显示,紫草素处理后可以抑制由LPS刺激细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的表达(P<0.05),并增加IL-10的表达(P<0.05),且呈现出一定的浓度依赖性;Western blot结果显示,紫草素能下调由LPS刺激的TLR4的表达水平和NF-κB的p65亚基磷酸化表达.结论 紫草素的抗炎机制可能是通过TLR4介导的信号通路活化NF-κB,抑制IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌,并促进IL-10的分泌.     

妊娠期血红蛋白浓度与妊娠结局相关性分析

目的:分析研究妊娠期母体高浓度血红蛋白与妊娠结局的相关性。方法:在2013年12月至2015年12月两年间来恩施土家族苗族自治州中心医院和湖北省妇幼保健院进行分娩的孕妇中,选取妊娠期在28周以上的单胎妊娠孕妇1374例。按照孕妇体内血红蛋白浓度的差异分为四组:血红蛋白浓度在75%以上者作为1组,50%~75%之间为2组,3组25%~50%,4组浓度在25%以下。统计分析血红蛋白浓度差异与妊娠结果的相关性。结果:通过对1374例研究对象记录的分析,四组孕妇孕早期血红蛋白浓度与妊娠结局无相关性(P0.05)。孕中晚期四组研究对象妊娠结局差异明显(P0.05),1、2组妊娠结局出现了更多不良情况。孕中期四组血红蛋白浓度分别为138g/L以上、130~138 g/L、123~129 g/L、123 g/L以下。孕晚期四组血红蛋白浓度分别为135 g/L以上、127~134 g/L、119~126 g/L以上、119 g/L以下。孕中期血液粘度4.50与≥4.50两组间无显著差异(P0.05)。与正常妊娠相比,孕晚期高血液粘度所造成的不良妊娠结局显而易见(P0.05)。结论:妊娠期母体内高浓度血红蛋白是造成不良妊娠结局的风险因素,应引起相关工作者与研究者的重视,及早记录、及早举措,保证母婴远离病患。     

硒结合蛋白1在乳腺癌不同分子亚型组织中的表达及其临床意义

探讨硒结合蛋白1(SBP1)在乳腺癌不同分子亚型组织中的表达及其临床意义。方法收集本院120例浸润型乳腺癌标本,免疫组化法检测组织中硒结合蛋白1。并进行统计学分析。结果 SBP1蛋白定位于胞质,呈棕黄色,不同分子分型乳腺癌中表达的强弱不同,而在三阴性乳腺癌中表达最差,甚至不表达。SBP1的表达与年龄无关,与肿瘤直径、淋巴结转移情况、组织学分级、TNM分期及乳腺癌分子分型显著相关(P<0.05)。SBP1蛋白表达与肿瘤直径、组织学分级呈负相关,与淋巴结转移呈正相关。结论 SBP1蛋白阳性是乳腺癌转移的重要相关性指标,对于三阴性乳腺癌转移的预测具有重要意义。     

急性肾功能衰竭犬不同小肠段黏膜超滤量测定及川芎嗪的作用

目的：观察比较单纯透析液及加入不同剂量川芎嗪透析液对急性肾功能衰竭犬不同小肠段黏膜液体吸收能力及超滤量的影响，分析川芎嗪在其中的作用。 方法：实验于2004—06／07在湖北民族学院医学院实验中心和恩施自治州中心医院检验科完成。①选用Beagle犬20只，雌性。按随机抽签法分为4组，每组5只：生理盐水组、透析液组、川芎嗪低剂量组和川芎嗪高剂量组。据肠系膜动静脉供血区对犬手术制作隔离空肠袢、空回肠袢和回肠袢，阻流双肾动脉，静脉输入高渗样品液，造成急性肾功能衰竭模型，自输入高渗样品液开始，生理盐水组、对照组、川芎嗪低剂量组和川芎嗪高剂量组前4h内每隔30min分别从各肠袢近端口注入生理盐水、透析液[透析液（mmol／L）：甘露醇180，钠60，钾3．7，氯46，碳酸氢盐26．7，钙1．6，葡萄糖35．1，pH7．34]、含川芎嗪（注射液，常州制药厂生产，40mg／支，批号991210）20mg／L透析液、含川芎嗪80mg／L透析液250mL并采各肠袢系膜主干动静脉血各3mL、收集各肠袢液，6h内完成，总时间为360min，各得样品13次。采用生化分析仪器和电解质分析仪器检测血清K^＋，Na^＋，Cl^-，尿素，肌酐，尿酸浓度。②根据^131I标示白蛋白稀释法计算肠袢内透析液容量，计算淋巴吸收量：该时间点该溶质动脉血浆浓度-该时间点该溶质静脉血浆浓度；总吸收量=该时间点该溶质静脉血浆浓度＋淋巴吸收量；30min肠袢黏膜平均超滤量=（6h时肠袢内液体容量-总灌入透析液量）／12。③各组间计量资料差异比较用方差分析，两两比较用Fisher’s PLSD检验。 结果：犬20只均进入结果分析。①空肠袢液分泌量：实验各时间段各透析组空肠腔内液体分泌量明显高于生理盐水组（P〈0．01）。川芎嗪低剂量组排液量在实验30～240min后明显高于其他3组（P〈0．01）。②不同小肠段肠袢黏膜液体吸收量：空肠袢总吸收量最弱，而淋巴吸收量最强，分别是其他肠袢的5～8倍（P〈0．01）。川芎嗪高剂量组各肠袢淋巴吸收量明显低于川芎嗪低剂量组（P〈0．05），而高于生理盐水组（P〈0．05-0．01）。③小肠段肠袢30min肠袢黏膜平均超滤量：透析液能显著提高各肠袢对K^＋，Na^＋，Cl^-，尿素，肌酐，尿酸的平均超滤量（P〈0．05-0．01），其中各透析液组空肠袢平均超滤量明显在各肠袢中最高，从空肠到回肠呈递减趋势；同一肠袢比较，川芎嗪低剂量组明显高于其他3组（P〈0．01）。川芎嗪低剂量组明显高于其他3组（P〈0．01）。 结论：低剂量川芎嗪加入到透析液中可增加小肠袢超滤及透析效能，空肠袢透析效能最好。