PD-L1反义寡核苷酸纳米颗粒对胃癌细胞侵袭和免疫因子分泌作用

摘要：目的:探讨细胞程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)反义寡核苷酸纳米颗粒对胃癌细胞侵袭和免疫因子分泌的作用。方法:人胃癌细胞AGS分成对照(Control)组、聚氰基丙烯酸丁酷纳米粒(PBCA-NP)组、PD-L1正义寡核苷酸(SOND)组、PD-L1反义寡核苷酸(ASOND)组、PD-L1反义寡核苷酸纳米颗粒(ASOND-NP)组、ASOND-NP+胰岛素样生长因子1(IGF-1)组,采用Western Blot法检测PD-L1、磷酸化的磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、PI3K、磷酸化的苏氨酸激酶(p-AKT)、AKT、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白的表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭,ELISA法检测血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-6(IL-6)水平。结果:与Control组和SOND组比较,ASOND组胃癌细胞中PD-L1、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达减少,细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高,Bax蛋白表达增多,Bcl-2、PCNA蛋白表达减少,细胞侵袭数目、迁移数目和MMP-2、MMP-9蛋白表达均减少,细胞分泌的VEGF、TGF-β、IL-6均减少(P<0.05);与PBCA-NP组和ASOND组比较,ASOND-NP组胃癌细胞中PD-L1、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达减少,细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高,Bax蛋白表达增多,Bcl-2、PCNA蛋白表达减少,细胞侵袭数目、迁移数目和MMP-2、MMP-9蛋白表达均减少,细胞分泌的VEGF、TGF-β、IL-6均减少(P<0.05);与ASOND-NP组比较,ASOND-NP+IGF-1组胃癌细胞中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达增多,细胞增殖活性升高,细胞凋亡率降低,Bax蛋白表达减少,Bcl-2、PCNA蛋白表达增多,细胞侵袭数目、迁移数目和MMP-2、MMP-9蛋白表达均增多,细胞分泌的VEGF、TGF-β、IL-6均增多(P<0.05)。结论:PD-L1反义寡核苷酸纳米颗粒通过抑制PI3K/AKT信号抑制胃癌细胞侵袭、迁移并减少免疫因子VEGF、TGF-β、IL-6分泌。     

ATP7B siRNA纳米载体提高胃癌细胞顺铂敏感性的作用

目的 研究ATP7B siRNA纳米载体对胃癌细胞顺铂敏感性的影响和机制。方法 将胃癌细胞GES-1分成对照组、单纯纳米组、si-NC组、si-ATP7B组、si-ATP7B纳米组、DDP组、si-ATP7B纳米+DDP组、si-ATP7B纳米+Vector+DDP组、si-ATP7B纳米+DDR1+DDP组、Vector组、DDR1组，Western blotting检测Bax、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、E-cadherin、Vimentin、ATP7B、DDR1蛋白表达，CCK-8实验检测增殖，流式细胞术检测凋亡，Transwell小室检测迁移和侵袭。结果 与对照组、si-NC组比较，si-ATP7B组胃癌细胞中ATP7B、DDR1蛋白表达量降低，细胞存活率降低，凋亡率升高，Bax、E-cadherin蛋白表达增多，Bcl-2蛋白表达减少，细胞迁移、侵袭数目减少，MMP-2、MMP-9、Vimentin蛋白表达减少(P<0.05);与对照组、单纯纳米组、si-ATP7B组比较，si-ATP7B纳米组胃癌细胞中ATP7B、DDR1蛋白表达量降低，细胞存活率降低，凋亡率...