组织工程细胞支架的免疫原性研究

目的：以组织工程血管脱细胞支架和仿生髓核组织工程细胞支架、周围神经去细胞神经基膜管为例,介绍组织工程脱细胞支架的免疫原性研究情况. 方法：应用计算机检索Medline 1997-01/2007-03关于免疫原性的文章.检索词“Immunotoxicology”并限定文章的语种类为English.同时利用计算机检索中国期刊全文数据库1997-01/2007-03的相关文章,限定文章语言种类为中文,检索词“组织工程,免疫原性”. 结果：主要组织相容性复合体Ⅰ免疫组织化学方法能够检测血管脱细胞支架的免疫原性;组织学观察及反转录-聚合酶链反应检测γ-干扰素、白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素10 mRNA表达,可以反映仿生髓核组织工程支架的免疫原性;主要组织相容性复合体Ⅱ抗原可以反映出经过化学萃取后的去细胞预变性神经基膜血管结构保留较完整,免疫原性低. 结论：脱细胞可以极大地降低组织工程支架的免疫原性,从而使得组织工程产品有更广阔的使用前景.     

健康汉族人群MBL Exon I 54位密码子点突变及其血浆含量分析

目的 建立检测甘露(聚)糖结合凝集素(MBL)基因Exon I54位密码子点突变的方法,初步调查健康汉族人MBL基因54位密码子点突变的情况,检测其血浆MBL含量,探讨二者的相关性.方法 根据MBL基因序列设计引物,建立MBL基因点突变检测方法(即PCR-RFLP);用MBL Oligomer ELISA试剂盒测定出血浆MBL的浓度.结果 建立了特异、敏感的检测MBL基因54位密码子点突变的方法,测得健康汉族人该基因突变频率为0.23;血浆MBL含量的平均值为(1.99±1.51)mg/L;二者呈负相关(r=-0.62,P＜0.001).结论 所建立的测定MBL的PCR-RFLP方法,特异性高,重复性好,且较为灵敏(最低检出量为160pgDNA)检出健康汉族人MBL的基因点突变频率与其血浆含量,且二者呈负相关.     

核酸检测技术的应用与血液制品的安全保障

确保血液及血液制品的安全 ,最大限度地降低经血传播疾病的危险 ,一直是世界各国关注的重大问题。尽管采用具有较高特异性和灵敏度的ELISA试剂进行血液和原料血浆的筛查 ,检测抗 HCV、抗 HIV 1/ 2和HBsAg ,已经显著降低了血液和原料血浆的病毒污染 ,但由于“血清转换窗口期”和ELISA试剂灵敏度的原因 ,并不能根本排除病毒存在的危险。核酸检测技术 (nucleicacidamplifiacationtechnology/test,NAT)用于原料血浆筛查能够缩短病毒抗体检测的“窗口期” ,并已经在欧美等国家血液制品行业和我国少数血液制品生产企业得到应用 ,有必要在…     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对万古霉素敏感性的变迁

目的　通过对近年来耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)临床分离株对万古霉素抑菌圈直径的分析 ,研究MRSA对万古霉素敏感性的变化。方法　药敏试验采用纸片扩散法 (K B法 ) ,抑菌圈直径的比较采用t检验。结果　 1994～ 2 0 0 0年每年收集的临床分离的MRSA菌株数分别为 2 18、187、2 92、2 37、35 1、886和 6 5 2 ,各年菌株对万古霉素抑菌圈的平均直径 (mm)分别为 19 9、19 1、18 6、17 4、18 4、18 2和 17 8。 2 0 0 0年的 6 5 2株MRSA对万古霉素抑菌圈的平均直径 (17 8mm)明显小于1994年 2 18株MRSA的平均直径 (19 9mm) ,差异有显著性 (P <0 0 0 1)。 2 0 0 0年分离的MRSA对氯霉素、环丙沙星、红霉素、庆大霉素、四环素和复方新诺明等常用抗生素的耐药率均很高 ,其耐药百分率分别为 44 0 %、73 7%、89 1%、6 5 7%、6 1 0 %和 6 7 0 %。结论　 1994年到 2 0 0 0年MRSA对万古霉素的敏感性在逐年降低 ,加强金黄色葡萄球菌对万古霉素敏感性的监测非常必要。     

T或B细胞缺陷小鼠对弱毒布鲁氏菌的感染性观察

本试验选用不同类型细胞缺陷小鼠,分成6个试验组,前3组为CBA/N与BALB/c小鼠交配所生仔一代,为B细胞免疫功能缺陷小鼠及其相应的对照小鼠,后3组为615B_6/PB_1与C_(57)BL/6交配所生之仔鼠,系T淋巴细胞免疫功能缺陷与T和NK细胞联合免疫功能缺陷小鼠及其对照小鼠。以上各组小鼠分别以1亿菌体布鲁氏菌活菌苗注射腹腔,于注射后一定间隔检测抗体效价并取有关脏器做细菌培养;B细胞功能缺陷小鼠抗体效价为1:80～1:160,对照小鼠为1:160～1:640,T细胞和T、NK细胞功能缺陷小鼠抗体效价为1:4～1:80,对照小鼠为1:128～1:640,45天时心血培养虽为阴性而脾脏仍有细菌生长。脾重的增减与抗体效价有一定关系与活菌数不成平行关系。该小鼠为菌苗免疫机理的探讨提供了模型。     

纳米银凝胶与纳米银水凝胶在模拟体液中的释放特征

背景：国内外研究显示,纳米银颗粒可在体内迁移、蓄积,并最终导致细胞毒性和基因毒性,且毒性可由于纳米银的蓄积而逐渐扩大。目的：观察纳米银凝胶和纳米银水凝胶两类产品在模拟体液中的释放特征。方法：取来自6个厂家的6种纳米银产品（3种纳米银凝胶和3种纳米银水凝胶）,将其浸泡在模拟体液中,提取不同时间点的纳米银凝胶和纳米银水凝胶释放液,利用超高压微波消解系统消解并定容,再用原子吸收光谱仪检测各消解液中的银含量,根据银含量检测结果分析总结两类产品在模拟体液中的释放特征。结果与结论：3种纳米银凝胶在模拟体液中的释放速率分别为3.59,4.30,1.17g/min,达到动态平衡的时间分别为40,35,70min;3种纳米银水凝胶在模拟体液中的释放速率分别为5.14,5.31,4.86g/s,达到动态平衡的时间均为100s。提示由于载体基质的不同,纳米银水凝胶的释放速率要明显高于纳米银凝胶;不同纳米银厂家由于工艺的不同,纳米银凝胶的释放速率亦有所不同,而纳米银水凝胶的释放速率区别不大。     

C57-ras致癌性转基因模型杂交1代的脏器及血液学参数测定

目的测定自主建立的致癌性转基因动物模型C57-ras小鼠杂交F1代的血液生理生化值和主要脏器重量,计算脏器系数并作统计学分析。方法选取同窝C57-ras转基因阳性鼠和BALB/cJ小鼠交配后的杂交1代CB6F1-Tg小鼠,雌雄各半,采血,测量血液生理指标和血清生化指标,并称主要脏器重量。结果血液生理指标中,CB6F1-Tg转基因阳性(+/-)雌鼠和阴性(-/-)雌鼠间比较,MCHC存在极显著性差异(P<0.01);CB6F1-Tg转基因阳性(+/-)雄鼠和阴性(-/-)雄鼠间比较,PLT、PCT、EOS%、NEUT、NEUT%、LYM%存在显著性差异(P<0.05),NEUT%、LYM%存在极显著性差异(P<0.01)。血清生化指标中,CB6F1-Tg阳性(+/-)雌鼠和阴性(-/-)雌鼠比较,ALT、TP、ALB存在显著性差异(P<0.05),TG存在极显著性差异(P<0.01)。主要脏器重量和脏器系数均无显著性差异(P>0.05)。结论测定了新建C57-ras致癌性转基因小鼠模型F1代阳性小鼠和阴性小鼠的主要生物学特性,为该模型在致癌性安全性评价等领域的实际应用中提供参考。     

猴泡沫病毒间接免疫荧光检测方法的建立及初步应用

目的建立检测血清中猴泡沫病毒(SFV)抗体的间接免疫荧光方法,为检测实验用猴群中SFV的感染情况提供参考依据。方法用SFV-1病毒感染BHK-21细胞,待50%细胞出现病变时,用胰蛋白酶消化细胞后以2×107/mL浓度40μL的细胞滴到10孔镀膜的玻片上,丙酮固定。利用制备的抗原片通过间接免疫荧光法对34份猴血清标本进行检测。结果建立了检测SFV抗体的间接免疫荧光染色方法,SFV抗体阳性19例,15例血清检测为阴性。结论本方法具有良好的特异性,可作为SFV检测的可靠方法。     

母牛分支杆菌制剂通过一氧化氮进行免疫调节的作用

目的用母牛分支杆菌制剂作用于不同状态的动物，通过产生一氧化氮（ＮＯ）而达到不同的效果。方法在第一组实验中，用不同剂量的母牛分支杆菌制剂免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，通过检测ＮＯ－２间接反映ＮＯ的变化。在第二组实验中，用结核杆菌Ｈ３７Ｒｖ感染豚鼠，１０天后给受染豚鼠注射母牛分支杆菌制剂。结果受免疫小鼠腹腔巨噬细胞产生ＮＯ－２水平明显高于未免疫小鼠（Ｐ＜０．０１）。不同剂量母牛分支杆菌制剂免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠间腹腔巨噬细胞产生ＮＯ－２水平差别不显著（Ｐ＞０．０５）。受染豚鼠注射母牛分支杆菌制剂后，ＮＯ－２产生水平明显低于单纯结核杆菌Ｈ３７Ｒｖ感染组。结论母牛分支杆菌制剂不但能提高机体免疫水平，而且可以在结核分支杆菌Ｈ３７Ｒｖ感染造成组织细胞破坏的条件下，调整免疫反应，进而减少组织损伤。     

酒石酸美托洛尔片假药的鉴别

目的:鉴别酒石酸美托洛尔片中的掺假成分。方法:采用HPLC-MS/MS和HPLC-DAD方法对样品中的掺假成分进行分析检测。结果:样品中的掺假成分鉴定为氯霉素,抽样的2批标示为酒石酸美托洛尔片样品中,未含酒石酸美托洛尔而含有氯霉素。结论:由于氯霉素的紫外光谱图和化学反应现象与酒石酸美托洛尔相似,故极少数据采用氯霉素冒充酒石酸美托洛尔生产假药。