海绵来源真菌Aspergillus flavus 次级代谢产物研究

摘 要：目的 对海绵来源真菌Aspergillus flavus次级代谢产物进行化学结构研究。方法 利用薄层色谱、硅胶柱层析、高效液相色谱和中压制备液相色谱等分离方法对真菌Aspergillus flavus 次级代谢产物进行分离、纯化;运用核磁共振、质谱等现代波谱学方法,通过与已报道数据进行对比,对化合物的化学结构进行鉴定。结果 从海绵来源真菌Aspergillus flavus 次级代谢产物中分离鉴定9个化合物,包括2个已知二酮哌嗪生物碱 Ditryptophenaline (1)、3-[(1H-Indol-3-yi)methyl]-6-benzylpiperazine- -2,5-dione (2),7个已知化合物 9,12-octadecadienoic acid methyl ester (3)、4-Hydroxy-3-methoxypropiophenone (4)、 Arboreumine (5)、 Asperfuran (6)、 p-Hydroxybenzoic acid (7)、 polybotrin (8)和Kojic acid dimethyl ether (9)。结论 从真菌Aspeigillus flavus 中分离得到9个化合物。     

抗凝血活性海洋硫酸多糖HP1-1的结构研究

目的 对抗凝血活性海洋硫酸多糖HP1-1的结构进行研究。方法 通过高效液相色谱(HPLC)、高效凝胶渗透色谱(HPGPC)、傅里叶变换红外光谱(IR)以及气质联用色谱(GC-MS)和核磁共振波谱(NMR)方法,对抗凝血活性海洋硫酸多糖HP1-1的结构进行解析。结果 海洋硫酸多糖HP1-1的分子量为297 kDa,总糖和硫酸基含量分别为78.1%和12.3%;HP1-1主要由葡萄糖组成,含有少量半乳糖、阿拉伯糖和甘露糖;HP1-1糖链中含有→4)-Glcp-(1→、→3)-Glcp-(1→、→3,4)-Glcp-(1→、→4)-Arap-(1→、→3,4)-Galp-(1→和→3)-Galp-(1→,硫酸基位于→4)-Glcp-(1→的C-3位和→3)-Galp-(1→的C-4位。 结论 海洋多糖HP1-1是主要由葡萄糖组成的硫酸多糖,含有多种糖基连接方式,为独特结构序列的新颖海洋硫酸甘露阿拉伯半乳葡聚糖。     

ETP类化合物靶向Hsp90-C端抗肿瘤作用以及对其客户蛋白选择性的影响

目的探究海洋来源新型多硫代二酮哌嗪(ETP)类化合物PEN-A在体内外的抗肿瘤活性并进一步明确PEN-A靶向HSP90的作用特点;比较并阐明3种ETP类化合物PEN-A,PNSA和HDN-1对于HSP90客户蛋白选择性抑制作用的机制。方法 MTT法、细胞划痕实验检测PEN-A对于肿瘤细胞系增殖、迁移的抑制作用;Co-IP检测PEN-A对于HSP90与其客户蛋白结合的影响;荧光偏振、胰酶水解指纹图谱、表面等离子共振(SPR)实验检测PEN-A与HSP90蛋白的结合位点;体内评价PEN-A对于结肠癌移植瘤的抗肿瘤活性。HSP90 ATPase实验、ADH聚合实验检测三种ETP类化合物对于HSP90活性的影响;F5M实验、胰酶水解指纹图谱检测3种化合物与HSP90的结合位点。结果 PEN-A对于多种肿瘤细胞均有增殖抑制作用,且显著抑制HCT-116细胞的增殖、迁移能力;PEN-A靶向结合于HSP90C端从而抑制其与客户蛋白的结合,PEN-A在体内具有靶向抑制HSP90的抗肿瘤活性。3种ETP类化合物PEN-A,PNSA和HDN-1均可抑制HSP90的ATPase活性及C端蛋白的聚合,但由于三者结合位点的不同导致对于HSP90客户蛋白的降解具有选择性。结论研究了PEN-A靶向Hsp90-C端抑制肿瘤的作用特点,为今后将其开发为一种新的靶向Hsp90-C端的抗肿瘤药物奠定基础。明确了三种ETP类化合物由于靶向HSP90-C端的结合位点的不同导致其对于HSP90客户蛋白抑制具有选择性,为今后寻找特异性HSP90抑制剂提供理论依据。     

两面针的化学成分和飞龙掌血酮内酯的晶体结构

目的 研究两面针Zanthoxylum nitidum的化学成分。方法 应用硅胶柱色谱和Sephadex LH-20凝胶柱色谱分离化合物，通过化合物的理化性质和光谱数据(包括单晶X射线衍射)鉴定结构。结果 从两面针中分离得到7个化合物，分别为2个香豆素：飞龙掌血酮内酯(Ⅰ)和飞龙掌血内酯(Ⅱ)；5个生物碱：6-甲氧基-5，6-二羟基两面针碱(Ⅲ)、白鲜碱(Ⅳ)、岩椒碱(Ⅴ)、茵芋碱(Ⅵ)和5-甲氧基白鲜碱(Ⅶ)。对化合物Ⅰ进行了单晶X射线衍射实验。结论 化合物Ⅰ～Ⅲ、Ⅴ、Ⅶ为首次从该植物中分离得到；首次得到化合物Ⅰ的单晶X射线衍射晶体结构数据。     

1种绿藻硫酸多糖的化学组成及其结构研究

目的 对1种绿藻硫酸多糖的化学组成及其结构特征进行研究。方法 通过热水提取法,从1种石莼属海藻中提取硫酸多糖,采用强阴离子交换色谱和凝胶渗透色谱对多糖进行分离纯化;采用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)、高效液相色谱以及化学方法对多糖的纯度、分子量、单糖组成和化学成分进行分析测定;通过红外光谱和气质联用方法对多糖的结构进行表征。结果 多糖HP2S在HPGPC色谱图上呈单一对称峰,分子量为90.5 kDa,硫酸根和糖醛酸含量分别为32.1%和7.4%,HP2S主要由鼠李糖组成,含有少量葡萄糖、葡萄糖醛酸、半乳糖和木糖,HP2S糖链中鼠李糖主要存在形式为(1→2)-Rhap 、(1→3)-Rhap 和(1→2, 3)-Rhap,硫酸根位于(1→3)-Rhap 的C-2位或(1→2)-Rhap 的C-3位上。结论 水溶性多糖HP2S是1种结构新颖的主要由鼠李糖组成的硫酸化多糖。     

海洋芽孢杆菌B-9987中macrolactin生物合成基因簇分析及反式酰基转移酶高表达

目的 对海洋芽孢杆菌B-9987中macrolactin生物合成基因簇及其关键基因进行分析、鉴定及功能研究。方法 通过生物信息学手段对基因簇的基因组成和功能结构域进行了分析;构建了用于酰基转移酶基因高表达的大肠杆菌—芽孢杆菌穿梭载体,采用电击转化方法导入B-9987之中进行高表达。 结果 macrolactins是由位于同一个操纵子的8个基因bmmA-I所编码的反式酰基转移酶聚酮合酶体系组装而成,反式酰基转移酶(trans-acyltransferase,trans-AT)BmmA的高表达使macrolactin A的产量提高了约0.6倍。结论 macrolactin生物合成基因簇在具有生物防治活性的芽孢杆菌中普遍存在,且高度保守;反式酰基转移酶的高表达能够增加macrolactin A的产量。     

离子色谱法测定藻酸双酯钠中游离和结合硫酸根含量

目的建立1种快速、简便、灵敏的离子色谱法测定藻酸双酯钠中游离和结合硫酸根的方法。方法采用氧瓶燃烧法对样品进行有机破坏,将有机硫转化为无机硫酸根,采用离子色谱法测定样品总硫酸根含量;又将样品直接溶解后测定游离硫酸根含量,间接计算样品中结合硫酸根含量。结果硫酸根在0.6~20μg/mL浓度范围内线性关系良好(r2=0.9991),样品重复性RSD     

红树植物拟海桑(Sonneratia paracaseolaris)化学成分研究

目的研究红树植物拟海桑Sonneratia paracaseolaris的化学成分。方法利用硅胶柱层析、凝胶Sephadex LH-20柱层析、HPLC等手段对化学成分进行了分离纯化;通过理化性质,结合波谱数据分析并与文献对照,鉴定化合物的结构,分别以MTT和SRB法评价化合物的抗肿瘤活性。结果从红树植物拟海桑Sonneratia paracaseolaris的甲醇提取物中,分离鉴定了9个单体化合物:9-氧橙花叔酮(1),3,7,11-三甲基-1,7(E),10-十二碳三烯-3-羟基-9-酮(2),(22E,24R)-5α,8α-过氧化麦角甾-23-甲基-6,22-二烯-3β-醇(3),(22...     

半红树植物黄槿中的三萜和甾醇成分(英文)

目的:研究半红树植物黄槿(Hibiscus tiliaceus L.)的化学成分。方法:分离纯化采用硅胶色谱、Sephadex LH-20凝胶色谱、高效液相色谱等方法。结构鉴定通过理化常数和波谱数据与文献对照确定。结果:从黄槿中共分离鉴定了10个化合物,分别为:木栓酮(1)、粉蕊黄杨二醇(2)、β-粘霉烯醇(3)、羽扇豆醇(4)、日耳曼醇(5)、豆甾-4-烯-3-酮(6)、豆甾-4,22-二烯-3-酮(7)、麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮(8)、β-谷甾醇(9)和豆甾醇(10)。结论:化合物3～5和8为首次从该植物中分离得到。     

深海来源淡紫拟青霉ZBY-1的代谢产物及其抗肿瘤活性

目的 阐明来自深海海水的淡紫拟青霉ZBY-1的代谢产物及其抗肿瘤活性.方法 采用活性跟踪分离模式,利用各种色谱技术分离纯化代谢产物;根据理化和波谱数据结合部分化合物的甲醇解反应鉴定化合物结构;采用MTT法测试抗肿瘤活性.结果 从淡紫拟青霉ZBY-1发酵产物中分离鉴定了9(11)-去氢过氧化麦角甾醇(1)、过氧化麦角甾醇(2)、(22E,24R)-5α,6α-环氧-3β-羟基麦角甾-22-烯-7-酮(3)和脑苷脂A(4)、B(5)、C(6)、D(7)等7个化合物.化合物1～3对人癌细胞K562、MCF-7、HL-60、BGC-823有较强抑制作用,IC50在9.5 ～ 59.6 mg/L之间,而4～7对上述4种癌细胞均无抑制活性.结论 本文是有关深海来源淡紫拟青霉代谢产物的首篇研究报道.化合物1～7为首次从淡紫拟青霉产物中分离得到,其中1和3首次从拟青霉属、3还首次从真菌中分离报道.化合物1对K562和BGC-823细胞以及3对上述4种癌细胞的抑制活性亦属首次测试报道.