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目的 建立贝类中GI、GII诺如病毒快速检测与分群方法。 方法 对比分析6株主要流行的GI、GII诺如病毒及参考诺如病毒的基因序列,筛选保守区域引物,优化建立SYBR Green I荧光定量检测与熔解曲线快速分群方法,并对实际样品检测验证。结果 引物P289/290可同时检测GI、GII诺如病毒,SYBR Green I荧光定量检测方法在病毒浓度103~109 copies 之间呈现良好的线性关系(R2=0.993,P<0.01),熔解曲线Tm值可区分GI和GII不同基因群的诺如病毒(F=7 507.60,P<0.05 )。120份贝类样品阳性检出率5.83%,其中阳性结果测序鉴定与快速分群方法结论一致。 结论 该方法成本低、检测快速、分群准确,具有良好重复性,适用于贝类中GI、GII诺如病毒的快速检测与分群。 相似文献
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目的 采用响应面法对南极磷虾源磷脂的人参皂苷磷脂复合物制备工艺进行优化,并初步探讨其理化性质。方法 以人参皂苷复合物的复合率为评估标准,采用单因素及响应面Box-Behnken设计考察各因素对复合物复合率的影响,优化制备工艺。利用扫描电镜观察磷脂复合物的固体粒子表面形态。结果 最终影响磷脂复合物复合率的因素有3个:反应时间,人参皂苷浓度,投料比(人参皂苷:磷脂),最佳制备工艺为:以四氢呋喃作为反应溶剂,温度为40℃,反应时间为1.5h,投料比为1:1.6,人参皂苷浓度为35mg?mL-1,在此条件下复合率可达98.08%,经三次验证实验平均复合率可达97.45%,实验值与预测值之间的相对误差为0.64% 结论 响应面法对复合物制备工艺条件进行优化后,提高了复合物制备的复合率。 相似文献
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海洋低温溶菌酶的急性毒性试验 总被引:5,自引:1,他引:4
①目的 对海洋杆菌产低温溶菌酶进行安全性评价。②方法 应用小鼠急性毒性试验,观察海洋低温溶菌酶对小鼠一次灌胃后和尾静脉注射后所产生的急性毒性反应。③结果 小鼠一次灌胃的最大耐受量为10400.00mg/kg体质量;小鼠一次尾静脉注射的LD50为4530.54mg/kg体质量,LD50的95%可信限为4193.19~4867.89mg/kg体质量,LD50的99%可信限为4088.24~4972.84mg/kg体质量。④结论 海洋低温溶菌酶为实际无毒物。 相似文献
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目的从p38促细胞分裂剂激活性蛋白激酶(p38 MAPK)通路和半胱天冬酶-3(caspase-3)的角度,研究扇贝多肽(poly-peptide from Chlamys farreri,PCF)抑制紫外线A波(UVA)引起的HaCaT细胞凋亡的分子机制。方法实验分为6组:对照组、UVA模型组、UVA+5.68mmol·L-1维生素C阳性对照组、UVA+5.69mmol·L-1PCF组、UVA+2.84mmol·L-1 PCF组、UVA+1.42mmol·L-1 PCF组。以正交实验设计确立UVA诱导HaCaT细胞凋亡模型;琼脂糖凝胶电泳分析PCF、p38MAPK抑制剂(SB203580)及caspase-3特异性抑制剂(Ac-DEVD-CHO)对细胞凋亡的影响;蛋白质印迹法检测p38MAPK及磷酸化p38MAPK表达;流式细胞术检测caspase-3的活性。结果PCF能明显抑制UVA引起的HaCaT细胞凋亡;SB203580和Ac-DEVD-CHO对UVA诱导的HaCaT细胞凋亡有抑制作用;1.42~5.69mmol·L-1内的PCF可剂量依赖性抑制UVA引起的p38MAPK磷酸化及caspase-3的活化。结论PCF可抑制UVA诱导的HaCaT细胞凋亡,其作用机制与抑制p38MAPK通路和caspase-3活性有关。 相似文献
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目的 提高木聚糖酶YS1069的稳定性、重复利用率以及便于从反应体系中分离。方法 本文将交联酶聚集体CLEAs技术与载体固定化技术相结合,用LKZ-128氨基型树脂对木聚糖酶CLEAs进行固定化,并对其性质进行初步研究。结果及结论 采用单因素法和响应面法对影响固定化酶活性的因素进行分析和优化,获得最佳固定化条件为: pH 9.0的酶液,以2 mL的异丙醇为沉淀剂,沉淀1 h,以1.59 g/L的京尼平为交联剂,交联2 h,20 ℃的环境中固定化9.25 h,加酶量为8 mg时回收率最高,达到65.63%,加酶量为60 mg时酶活性最高,达到190 U/g。重复使用10次后,其相对酶活仍为42.3%,说明具有良好的批次操作稳定性。该酶经过固定化后热稳定性和pH稳定性均得到了提高。 相似文献
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目的对2015年和2016年从黄渤海区养殖产地采集的鲜活贝类中分离的165株副溶血性弧菌的毒力基因及耐药性进行分析。方法通过PCR扩增及基因测序对毒力基因进行检测与分析,采用Kirby-Bauer法对菌株进行耐药性分析。结果 165株菌株均含有tlh基因,所有菌株均未检测到tdh和trh基因。菌株对氨苄西林、头孢唑林、头孢呋辛钠、阿米卡星耐药性显著,耐药率分别为94.55%、41.21%、37.58%、29.09%,较高比例的菌株对呋喃妥因、卡那霉素、头孢唑林、头孢呋辛钠、阿米卡星呈中度敏感性;所有菌株对头孢吡肟、亚胺培南和美罗培南100%敏感,其中16株菌多重耐药系数(MAR)0.2,呈现出不同程度的多重耐药性。来自不同品种和不同地区样品菌株的耐药率存在一定差异。结论黄渤海区鲜活贝类中的副溶血性弧菌主要为非致病株,但呈现一定程度的耐药性,提示应加强海产品中副溶血性弧菌的致病性与耐药性的监控,防范食源性疾病的暴发。 相似文献