双吲哚马来酰亚胺衍生物L6诱导白血病细胞凋亡机制的研究

目的探讨双吲哚马来酰亚胺衍生物L6诱导白血病细胞的凋亡作用及其分子机制。方法采用MTT比色法检测L6对白血病细胞HEL、K562、KG1a的杀伤作用。流式细胞术检测L6对HEL细胞凋亡、周期和分化的影响。Western blotting法检测细胞凋亡相关蛋白的表达。通过体内实验研究L6治疗小鼠白血病的作用效果。结果 MTT比色法结果显示L6对HEL、K562、KG1a细胞具有比阳性对照米哚妥林(PKC412)更显著的抑制活性,半数抑制浓度(IC50)分别为(0.05±0.03)、(0.32±0.01)、(0.19±0.10)μmol/L。L6可以诱导HEL细胞发生凋亡和G2/M期阻滞,诱导HEL细胞向巨核细胞方向分化,且呈剂量效应。Western blotting检测结果表明L6主要通过激活Caspase-3执行细胞凋亡。小鼠肝组织苏木精-伊红(HE)染色显示肝组织内HEL细胞浸润有所减轻,但L6组减轻的效果更明显,表明其可延缓白血病细胞的转移,且效果优于米哚妥林。结论双吲哚马来酰亚胺衍生物L6有较强的抗白血病活性,为新型白血病药物的研发提供参考。     

螺内酯和呋塞米联合应用对肝炎后肝硬化腹水的疗效评价

目的探讨治疗肝炎后肝硬化腹水患者时,采用螺内酯联合呋塞米治疗方法的应用效果。方法我院于2011年5月至2013年5月收治的600例肝炎后肝硬化腹水患者共600例,随机抽取120例患者为研究对象,全部患者采用螺内酯和呋塞米物联合治疗2~7周,比较治疗前后临床效果。结果治疗前患者平均尿钠量不足5 mmol/d,采用螺内酯联合呋塞米治疗2~4周后平均尿钠量为50~180 mmol/d(P<0.05),比较差异具有统计学意义;治疗4周后,患者腹水消退率为89.17%(107/120),治疗7周后腹水消退率为98.33%(118/120)。结论采用螺内酯联合呋塞米治疗肝炎后肝硬化腹水患者,临床疗效显著,值得推广。     

HPLC-CAD法测定舒更葡糖钠中的有关物质

建立了HPLC-CAD法测定舒更葡糖钠(1)原料药中的7种有关物质(2～8)。色谱柱采用Poroshell 120 SB-C₈柱(4.6 mm×150 mm,2.7μm),流动相A为0.5%甲酸溶液,B为甲醇,线性梯度洗脱,流速为0.5 mL/min,柱温为35℃。电雾式检测器(CAD)雾化器温度为35℃,过滤常数为3.6 s,数据采集速率为5 Hz。结果表明,3在5～300 μg/mL内线性关系良好,1及其他有关物质均在2～40 μg/mL内线性关系良好。1原料药及各杂质(2～8)的定量限为0.985～1.145 μg/mL,检测限为0.493～0.573 μg/mL;2～8的平均回收率(n=9)为95.6%～99.4%,RSD为1.21%～3.32%。该方法准确、重现性好、精密度高,可检测1原料药中的有关物质,为1的质量控制提供了可靠的检测方法。     

基于唾液酸酶和岩藻糖转移酶的抗体—细胞偶联物构建

目的 通过基于唾液酸酶和岩藻糖转移酶的糖链工程将曲妥珠单抗高密度偶联到人外周血白血病T细胞Jurkat细胞,并评价偶联细胞对HER2+靶细胞的识别活性。方法 首先通过凝集素染色和流式细胞术探究去唾液酸化对细胞上α-1,3FucT催化的岩藻糖编辑效率的影响。然后制备含有叠氮标签的曲妥珠单抗,与GDP-炔基岩藻糖通过生物正交反应构建GDP-岩藻糖-抗体偶联物。再利用α-1,3FucT将GDP-岩藻糖-抗体偶联物转移至唾液酸酶处理过的细胞表面,构建抗体-细胞偶联物,并通过流式细胞术和共聚焦成像验证。最后通过荧光成像观察抗体-细胞偶联物对靶细胞SK-BR-3细胞的识别。结果 细胞表面糖链的末端α-2,6唾液酸切除后能够显著提升α-1,3FucT催化的岩藻糖编辑的效率,成功制备GDP-岩藻糖-抗体偶联物并转移至细胞表面得到曲妥珠单抗-Jurkat偶联物,去唾液酸化显著增加了Jurkat细胞偶联曲妥珠单抗的容量,构建的曲妥珠单抗-Jurkat偶联物具备HER2+细胞靶向性。结论 细胞糖链工程可实现细胞偶联分子容量的调节,应用于抗体对免疫细胞的功能化,也为构建海洋糖类活性化合物偶联细胞提供了新的思路...     

海绵来源真菌Aspergillus flavus 次级代谢产物研究

摘 要：目的 对海绵来源真菌Aspergillus flavus次级代谢产物进行化学结构研究。方法 利用薄层色谱、硅胶柱层析、高效液相色谱和中压制备液相色谱等分离方法对真菌Aspergillus flavus 次级代谢产物进行分离、纯化;运用核磁共振、质谱等现代波谱学方法,通过与已报道数据进行对比,对化合物的化学结构进行鉴定。结果 从海绵来源真菌Aspergillus flavus 次级代谢产物中分离鉴定9个化合物,包括2个已知二酮哌嗪生物碱 Ditryptophenaline (1)、3-[(1H-Indol-3-yi)methyl]-6-benzylpiperazine- -2,5-dione (2),7个已知化合物 9,12-octadecadienoic acid methyl ester (3)、4-Hydroxy-3-methoxypropiophenone (4)、 Arboreumine (5)、 Asperfuran (6)、 p-Hydroxybenzoic acid (7)、 polybotrin (8)和Kojic acid dimethyl ether (9)。结论 从真菌Aspeigillus flavus 中分离得到9个化合物。     

甲壳素/壳聚糖在疝修补领域的研究综述

疝气是目前临床上1 种常见的外科疾病,随着疝气患者的日益增多,疝修补材料的不断革新成为临床疝气领域的研发热点,力求通过改善疝修补材料来促进疝修补术后的腹壁组织修复情况。目前海洋来源的甲壳素/壳聚糖是生物医用材料领域研究的热点材料,具有广阔的发展前景。综述疝修补材料和以甲壳素和壳聚糖为代表的海洋生物材料的生物学特性及其在疝修补领域的研究进展,评价其作为疝修补材料的可行性,为海洋生物材料在疝修补领域的广泛应用提供新思路。     

海洋来源 (+)-sclerotiorin衍生物的半合成、抗结核活性与初步构效关系研究

目的 结核病仍然是世界范围内一个重要的公共卫生问题,因此迫切需要寻找新型抗结核分子。以海洋天然产物(+)-sclerotiorin为原料半合成一系列衍生物,其中包含18个新化合物,通过考察它们的抗结核等活性,探究其初步构效关系。方法 利用Mycobacterium marinum 和 Mycobacterium tuberculosis 菌株对衍生物的生物活性进行测定。结论 衍生物4, 5, 8?10和12的抗海分枝杆菌活性与阳性药相当,MIC90值在16.1?18.9 μM之间。此外,衍生物9, 11, 12和15也显示出中等的抗结核活性。初步构效关系表明喹啉、异喹啉、联苯和联苯醚等基团有利于提升(+)-sclerotiorin衍生物的抗结核活性。衍生物12在结核杆菌蛋白酪氨酸磷酸酶B抑制试验中显示出最强的活性,分子对接的结果表明,它与蛋白的Phe98残基之间存在苯环与苯环间的π-π相互作用。该研究证实了(+)-sclerotiorin衍生物作为抗结核候选药物的潜力。     

中学生社会支持系统问卷编制及信效度分析

目的:编制适用于我国中学生的社会支持系统问卷,为科学评定青少年社会支持水平和有效应对压力提供依据。方法:根据标准化问卷开发程序,在社会支持内涵和结构以及有关测量研究基础上,将社会支持系统确定为物质性支持、信息性支持、情绪性支持、尊重性支持、同伴性支持和支持利用度6个维度,以分层随机抽取的1578名中学生为被试,编制中学生社会支持系统问卷。结果:该问卷重测信度系数、Cronbachα系数、分半信度系数分别为0.925,0.895,0.889。验证性因素分析适配度指标χ~2/df=1.527,RMSEA=0.038,NFI=0.987,NFI=0.987,CFI=0.978,IFI=0.962。结论:编制的中学生社会支持系统问卷可作为测量中学生社会支持水平的有效工具。     

壳寡糖及其衍生物对实验性糖尿病大鼠抗氧化能力及肾功能的影响

背景：壳寡糖和N-乙酰氨基单糖是高分子不溶性壳聚糖经水解的产物,具有水溶性。由于分子结构相似,壳寡糖和N-乙酰氨基单糖壳聚糖同样具有抗氧化等功效,同时由于其小分子可溶性和易被人体吸收的特性,在糖尿病及其并发症预防与治疗方面有更广阔的应用前景。目的：观察不同剂量的壳寡糖,N-乙酰氨基单糖对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠抗氧化能力的影响及对肾脏的保护作用。设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008-07/09在中国海洋大学生物化学实验室完成。材料：壳寡糖,N-乙酰氨基单糖由中国海洋大学生物化学实验室制备。81只Wistar大鼠随机分为9组：正常对照组,阴性对照组,二甲双胍组,壳寡糖和N-乙酰氨基单糖低、中、高剂量组,每组9只。方法：正常对照组腹腔内注射柠檬酸缓冲液,其余各组按65mg/kg体质量一次性腹腔内注射链脲佐菌素溶液制备糖尿病大鼠模型。壳寡糖和N-乙酰氨基单糖低、中、高剂量组分别按每日250,500,1500mg/kg灌胃壳寡糖和N-乙酰氨基单糖水溶液,正常对照组,阴性对照组按体质量灌胃等体积凉白开水（10mL/kg）,二甲双胍组按每日200mg/kg灌胃二甲双胍水溶液,连续60d。主要观察指标：①测定血清中谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶、丙二醛浓度、总抗氧化能力和肾功能指标。②肾脏病理组织学检查。结果：壳寡糖,N-乙酰氨基单糖可以增加糖尿病大鼠血清中总抗氧化能力及超氧化物歧化酶浓度,显著降低血清中丙二醛、尿素氮、N-乙酰氨基葡萄糖苷酶及尿液中总蛋白/肌酐、N-乙酰氨基葡萄糖苷酶/肌酐的水平。其中以壳寡糖中剂量组（500mg/kg）和N-乙酰氨基单糖低剂量组（250mg/kg）作用效果较好。结论：适量壳寡糖及N-乙酰氨基单糖能够有效的降低链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠的抗氧化能力,从而对肾脏起到了保护作用。     

海参岩藻聚糖硫酸酯对巨噬细胞的调节作用及信号通路研究

目的研究海参岩藻聚糖硫酸酯(SC-FUC)对巨噬细胞的调节作用及相关信号通路,探究其调节机体免疫的作用机制。方法噻唑蓝(MTT)比色法检测巨噬细胞的增殖情况;中性红法检测吞噬活性;Griess试剂法测定培养上清液中NO含量;RT-PCR检测巨噬细胞下游细胞因子IL-6、IL-10、Toll样受体和相关信号分子My D88、TRIF、NF-κB的mRNA表达量。结果 SC-FUC对巨噬细胞增殖、吞噬能力和NO分泌均有促进作用,在作用前期(6h和12h)效果更为明显。SC-FUC能上调细胞因子IL-6和IL-10的mRNA表达量,上调TLR4、TLR5、TLR9的表达量,促进信号分子My D88、TRIF和NF-κB的mRNA表达量。结论 SC-FUC能够激活巨噬细胞,促进其分泌NO、IL-6、IL-10等细胞因子,从而发挥免疫调节作用。SC-FUC激活巨噬细胞的信号通路与细胞表面TLR4、TLR5、TLR9及NF-κB通路相关。