脑室注射白细胞介素1受体拮抗剂对抗束缚应激血清抑制因子的产生

脑室注射白细胞介素１受体拮抗剂对抗束缚应激血清抑制因子的产生北京医科大学免疫学教研室左永昌，李怡凡，丁桂凤，马大龙，范少光白细胞介素１（ＩＬ－１）主要是由巨噬细胞产生的一种细胞因子，对Ｔ细胞的活化有促进作用。近年来发现脑内某些神经元也可以产生ＩＬ－１...     

有生物活性的小鼠IL-3在大肠杆菌的高效表达

白细胞介素-3(Interleukin-3,IL-3)又称多集落刺激因子,是一种T淋巴细胞产生的淋巴因子,它可刺激多能造血干细胞和各系祖细胞的增殖分化,促进肥大细胞、嗜硷性及嗜酸性粒细胞的增殖。IL-3有可能做为多肽药物在一些造血系统疾病,免疫缺损病,变态反应等疾病的治疗中具有一定的应用价值,但常规方法提取IL-3非常困难。为深入探讨IL-3的结构与功能,我们进行小鼠IL-3的基因工程获得成功,我们     

一个新的多功能细胞因子一趋化素样因子

细胞因子是在免疫和炎症反应中起重要作用的小分子蛋白质,克隆和研究新的细胞因子具有重要的理论意义和应用价值.我们利用抑制性减数杂交技术(SSH),从PHA刺激的U937细胞中成功克隆了一个新的细胞因子趋化素样因子1(CKLF1).CKLF1全长cDNA包括530个碱基,有一个编码99个氨基酸的完整开放读码框架.CKLF1存在其他三种变异体,命名为CKLF2,3,4,分别编码152,67和120个氨基酸,其中,CKLF2是CKIF的全基因产物.亚细胞定位和Western blot分析发现,CKLF1和CKLF3主要为分泌性表达,而CKLF2和CKLF4主要以膜结合形式表达.CKLF1与已发现的其他细胞因子之间没有明显的同源性,CKLF1在PHA刺激的U937细胞中的表达可被IL-10部分抑制.重组的CKLF1在体内外对嗜中性细胞、单核细胞和淋巴细胞具有明显的趋化活性;在体内能引起肺部明显的炎性改变,与CKLF1转基因小鼠的肺部病变相;CKLF1还能刺激骨髓细胞和小鼠骨骼肌细胞增殖.CKLF2能促进小鼠肌母C2C12细胞增殖和分化,促进BALB/c 3T3细胞增殖,并能拮抗撤血清引起的细胞凋亡,以上结果表明CKLF1可能在炎症和骨骼肌再生过程中发挥重要作用.在CKLF1,2的序列基础上,利用生物信息学方法克隆了小鼠CKLF2,4和大鼠CKLF1,2,它们与人CKLF1,2,4有相似的结构和功能;在人和小鼠CKLF的序列基础上,我们成功克隆了其他4个与CKLF有同源性的新基因,命名为趋化素样因子相关蛋白1-4(CKLF-RP1-4),它们与CKLF2有相似的结构,在16号染色体上成基因簇形式存在,因此,CKLF代表一个有重要功能的新基因超家族.     

白细胞介素-2及其受体的基因工程研究

白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2),也称为T细胞生长因子,是免疫应答过程中由T细胞释放的一种淋巴因子,主要起诱导T细胞的增殖与分化的作用,对其它一些细胞的分化、成熟也起直接或间接的作用。IL-2是免疫应答,特别是细胞免疫应答中的一种重要因子,对IL-2结构及功能的研究在     

NFkB活化诱导剂筛选细胞的建立

目的:了解不同刺激剂作用HL-60细胞后对NF-kB活化的特点,为人类功能基因的筛选提供新的方法.方法:采用基因转染技术获得能稳定表达IkBa-EGFP融合蛋白的HL-60细胞系,定性和定量检测8种刺激剂作用于该细胞系后荧光强度的变化.结果:定性结果发现,在所用的8种刺激剂中,除IL-1ra作用后的细胞荧光强度没有明显的变化外,其它7种刺激剂作用后都有不同程度的细胞荧光强度的降低,尤以PHA作用后的变化更为典型.定量检测结果发现,稳定表达的HL-60细胞自身的荧光强度,随时间延长即有降低,IL-1ra作用后细胞荧光强度的降低同没有刺激时相比没有明显区别;其它7种刺激剂作用后均有明显的荧光强度降低,但它们作用后的特点并不相同.结论:该真核转染的细胞可用于NK-kB活化刺激剂的初步筛选,可以作为功能基因组研究中新基因功能初筛的一个平台技术.     

凝血酶对人重组内皮细胞衍生IL—8融合蛋白转换作用

本文报道利用基因工程技术在大肠杆菌中表达出入内皮细胞衍生IL-8(EDhIL-8)与细菌蛋白lacZ 的融合蛋白lac-hIL-8和lac-T-hIL-8,后者含有一个人工合成凝血酶切点。EDhIL-8上含有一个凝血酶切点,凝血酶可以将lac-hIL-8及以前表达的MS2-hIL-8水解为有生物活性的天然IL-8,而对含有两个凝血酶切点的lac-T-hIL-8无水解作用。这些结果提示凝血酶的功能不仅依赖于所识别的氨基酸,而且依赖于这些氨基酸形成的构象。     

发挥多学科协作优势,迎接人类后基因组时代的机遇和挑战

人类基因组计划是人类有史以来最伟大的认识自身的世纪工程,经过全世界科学家的努力,今年已经完成工作草图,预计在2003年以前可以完成全部人类基因序列的分析.目前,我们已经进入了人类后基因组时代(human post-genome project era),在绝大多数人类基因序列已知的条件下,如何调整生命科学的研究战略和研究方向,是我们面临的新问题.目前,虽然97%的人类基因序列已经解析出来,但仍有约90%的人类基因不了解其功能,后基因组时代摆在我们面前的一个关键问题就是如何开展功能基因的研究和疾病基因的研究,如何将人类基因序列转变为对人类认识自身的知识,如何对这些基因加以利用, 从中寻找出可供开发的宝藏,使之能够造福于人类的健康.这些工作将花费远比基因序列分析更多的时间、更大的投入和更繁重的工作量,也更加具有挑战性,同时,也是我国生命科学创新性研究的新机遇.如果说,在以大规模基因测序为主的人类结构基因组学研究是以分子遗传学专家为主要力量的话,那么在功能基因组和疾病基因组研究则不能依靠单枪匹马的孤军奋战,必须发挥多学科、多领域实验室的相互协作,以大科学模式开展研究,这样才能取得真正意义的重要科学成果(图1).