制备型高效液相色谱法在药物杂质研究中的应用

制备型高效液相色谱法是一种使用高压、大流量液体输送系统在高分辨率、大内径、高载量分离柱上进行样品高纯度分离的液相色谱制备方法。应用该方法分离的产品在纯度、回收率、分离效率等方面远远优于传统的制备方法,因此在药物研究、生产领域得到广泛应用。介绍制备型高效液相色谱法的研究概况,特点,影响制备型高效液相色谱分离纯化的因素,以及在药物杂质研究中的实际应用,并对制备型高效液相色谱技术存在的问题与发展方向进行总结。     

HS-GC-MS/MS测定富马酸丙酚替诺福韦中微量的基因毒性杂质N-亚硝基二甲胺

目的 采用顶空进样气相色谱三重四级杆质谱联用(HS-GC-MS/MS)法测定富马酸丙酚替诺福韦中微量的基因毒性杂质N-亚硝基二甲胺(NDMA)。方法 采用三重四极杆GC-MS/MS,Agilent VF-WAX ms(30 m×0.25 mm,1μm)色谱柱,载气：氦气;恒流模式1.0 mL·min^-1;程序升温,进样口温度230℃,顶空温度130℃;质谱采用电子轰击电离源(EI),电离能量为70 eV,离子源温度230℃,多反应监测(MRM)模式进行检测,溶剂为N-甲基吡咯烷酮(NMP)。进行专属性、系统适用性、检测限与定量限、线性与范围、准确度、精密度、溶液稳定性、耐用性考察。结果 NDMA与相邻色谱峰之间分离效果良好;NDMA在7.0～105.0 ng·mL^-1线性关系良好,检测限为3.5 ng·mL^-1,定量限为7.0 ng·mL^-1;NDMA低、中、高质量浓度(56、70、84 ng·mL^-1)回收率为95.6%～109.3%,RSD为4.0%(n=9);重复性试验N...     

药物中杂质对照品的标定项目与纯度测定方法研究进展

药物中的杂质是否能被全面准确地控制,直接关系到药品的质量可控与安全性。《中国药典》多采用主成分自身对照法规定有关物质的限度,而国外药典中多用到杂质对照品进行检测,这也就要求杂质对照品符合一定的质量标准后方可使用。对照品的标定中常涉及的项目包括纯度测定、结构确证、含量测定等,考虑到杂质对照品的微量性,标定时选择合适的分析方法十分重要,如进行纯度测定可使用高效液相色谱法、差示扫描量热法等试样用量少的分析仪器。     

反相高效液相色谱中流动相选择与优化的研究进展

反相高效液相色谱（RP-HPLC）中的流动相对组分具有很强的亲和力,并且与固定相共同竞争组分,流动相的种类及配比直接影响到组分的分离。因此,正确的选择流动相,确定最佳的色谱分离条件,可以实现更理想的分离。结合日常实验经验和相关文献,综述了在RP-HPLC中,如何快速地进行流动相的选择与优化。     

超高效液相色谱法测定热炎宁颗粒中大黄素、咖啡酸、绿原酸、野黄芩苷、木犀草素和虎杖苷

目的：建立超高效液相色谱（UPLC）同时测定热炎宁颗粒中大黄素、咖啡酸、绿原酸、野黄芩苷、木犀草素、虎杖苷6种成分的方法。方法采用UPLC法,Acquity UPLC HSS C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7μm）;流动相为[甲醇–乙腈（35∶65）]–0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量0.5 mL/min,分段变波长测定,柱温35℃;进样量1.0μL。结果6种成分在选定的范围内线性关系良好（r≥0.9993）;平均加样回收率在99.08%～102.31%,RSD值均小于2.53%（n=6）。结论采用UPLC法对热炎宁颗粒中大黄素、咖啡酸、绿原酸、野黄芩苷、木犀草素、虎杖苷6种成分进行测定,方法操作快速,高效,准确,可用于热炎宁颗粒的质量控制。     

阿莫西林原料药中有关物质的UPLC-TOF-MS/MS鉴定

目的快速鉴定阿莫西林原料药中的有关物质。方法采用UPLC-TOF-MS/MS法测定。Waters Acquity UPLCTM BEH色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相为乙酸铵体系;体积流量0.5 m L/min;检测波长254 nm;柱温30℃;进样量10μL。电喷雾电离源;正离子检测;毛细管电压3.0 k V;离子源温度120℃;雾化气温度500℃;雾化气体积流量700 L/h;锥孔气体积流量50 L/h。结果推测了阿莫西林原料药中6个杂质的化学结构及其裂解规律,同时与欧洲药典中的杂质进行了比对归属。结论建立的UPLC-TOF-MS/MS的方法和实验数据可为阿莫西林原料药的质量控制提供了重要依据。     

GC-MS/MS法测定甲磺酸卡莫司他原料药中N-亚硝基二甲胺

目的建立GC-MS/MS法测定甲磺酸卡莫司他原料药中的亚硝胺类基因毒性杂质N-亚硝基二甲胺(NDMA)。方法采用Agilent DB-SELECT 624UI色谱柱(30 m×0.32 mm×1.80μm)色谱柱,离子源为EI源,采用多反应监测模式,以m/z 74→44.2为定量离子,m/z 74→42.2为定性离子,进行数据采集。结果 NDMA在12.571 2～100.569 6 ng/mL线性良好(r=0.997 6),检测限质量浓度为5.028 5 ng/mL,平均回收率为107.4%,RSD值为2.5%。结论该方法操作简单,灵敏度高,专属性和重复性好,可用于甲磺酸卡莫司他原料药中NDMA的检测。     

HPLC-CAD法同时测定益肺清化颗粒的七种成分

目的 建立高效液相色谱-电雾式检测器法(HPLC-CAD)同时测定益肺清化颗粒中甘草苷、黄芪甲苷、紫菀酮、桔梗皂苷D、苦杏仁苷、麦冬皂苷D、熊果酸的含量。方法 色谱柱为Inertsil ODS-3(150 mm×4.6 mm, 3.5μm),以乙腈(A)-0.1%醋酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.9 mL·min^-1,柱温箱的温度为30℃,电雾式检测器雾化器温度为35℃,进样量10μL。结果 甘草苷、黄芪甲苷、紫菀酮、桔梗皂苷D、苦杏仁苷、麦冬皂苷D、熊果酸的线性范围分别为4.0～80μg·mL^-1、6.0～120μg·mL^-1、1.0～20μg·mL^-1、10～200μg·mL^-1、1.0～20μg·mL^-1、1.0～20μg·mL^-1、2.5～50μg·mL^-1(r≥0.9994)。7种成分的平均回收率在98.4%～101.5%之间,RSD均小于2%,分别为0.9%、1.6%、1.7%、1.2%、...     

HPLC-DAD法同时测定精制冠心片中7种指标成分

目的建立HPLC-DAD法同时测定精制冠心片中丹参酮IIA、芍药苷、丹酚酸B、阿魏酸、红花黄色素A、藁本内酯、丹参素7种指标成分的量。方法采用HPLC法,Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm),甲醇-乙腈(25∶75,A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,体积流量1.0 m L/min,梯度洗脱:0~10.0 min,95%B;10.0~16.0 min,95%~85%B;16.0~18.0 min,85%B;18.0~22.0 min,85%~75%B;22.0~26.0 min,75%~65%B,26.0~40.0 min,65%~15%B;分段变波长测定:0~19.0 min为270 nm,19.0~22.0 min为230 nm,22.0~27.0 min为320 nm,27.0~40.0 min为402 nm;柱温30℃;进样量10μL。分别对线性关系、精密度、重复性、稳定性及加样回收率进行考察。结果 7种指标成分丹参酮IIA在0.4~8.0 mg/L(r=0.999 5)、芍药苷在1.2~24.0 mg/L(r=0.999 1)、丹酚酸B在3.2~64.0 mg/L(r=0.999 3)、阿魏酸在0.08~1.60 mg/L(r=0.999 5)、红花黄色素A在1.2~24.0 mg/L(r=0.999 3)、藁本内酯在0.24~4.80 mg/L(r=0.999 7)、丹参素在0.32~6.40 mg/L(r=0.999 7)线性关系良好;精密度良好,RSD均小于2.0%;重复性良好,RSD均小于2.0%;在室温条件下12 h内稳定;平均加样回收率在98.05%~101.27%,RSD均小于2.0%。6批样品中丹参酮IIA在0.704~0.797 mg/g,芍药苷在3.124~3.411 mg/g,丹酚酸B在7.129~7.611 mg/g,阿魏酸在0.180~0.198 mg/g,红花黄色素A在2.718~2.966 mg/g,藁本内酯在0.590~0.683 mg/g,丹参素在0.811~0.899 mg/g。结论该方法简便、准确,重复性好,为精制冠心片的质量控制提供实验依据。     

气相色谱法在手性药物分析中的应用进展

手性化合物作为特殊的物质群体,使用普通的分析方法往往很难实现对其进行定量或定性分析.气相色谱虽然只适用于易挥发且热稳定的化合物,但将气相色谱与质谱、手性固定相等联用或对手性化合物进行衍生以及特异性内标后,使用气相色谱对手性化合物进行分析依然能取得理想效果.对近年来气相色谱在手性分析中的应用和相关研究进展进行综述.