天然虾青素的提取、纯化研究进展

近年来虾青素的提取、纯化工艺在不断优化。微波、超声、超临界流体萃取术、生物酶法等技术可显著增加提取量。柱层析法、高效液相色谱法是最常见的纯化手段。该文综述了虾青素的提取、纯化研究进展,以期为提取、纯化方法的联合利用提供参考,促进虾青素的高效获取。     

构树叶总黄酮调控Bcl-2与Bax蛋白表达及caspase-3活性诱导HepG-2细胞凋亡的研究

目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)诱导HepG-2细胞凋亡的机制。方法:采用体外细胞培养方法,取对数生长期人肝癌HepG-2细胞,随机分为药物组和对照组,药物组用3,6,9,12 g·L-1不同质量浓度TFBP作用人肝癌HepG-2细胞24,48,72 h后,应用MTT法检测TFBP对人肝癌细胞HepG-2生长抑制作用;Hoechst 33342荧光染色法荧光显微镜观察各浓度TFBP作用细胞48 h后的细胞的形态变化;通过免疫细胞化学SP法检测凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;比色法检测半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性。结果:TFBP在体外对人肝癌细胞HepG-2有较强的浓度依赖性和时间依赖性抑制作用,9,12 g·L-1的TFBP作用HepG-2细胞72 h后,细胞增殖抑制率可分别达52.46%,64.72%,与对照组具有显著性差异(P<0.01),可诱导细胞凋亡,质量浓度9,12 g·L-1的TFBP作用HepG-2细胞48 h后就可出现典型的凋亡小体,TFBP可升高caspase-3活性,并具有浓度效应,同时还可下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2/Bax。结论:TFBP在体外对肝癌细胞HepG-2有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用。其诱导凋亡的机制可能与其下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白的表达,下调Bcl-2/Bax以及增强caspase-3的活性有关。     

构树叶总黄酮诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡机制探讨

目的：研究构树叶总黄酮（total flavonoids of Broussonetia papyrifera，TFBP）诱导肝癌HepG-2细胞凋亡的机制。方法：采用MTT法检测浓度分别为3、6、9和12g／LTFBP作用于Hep02细胞24、48和72h后对细胞生长的影响；Hoechst33342荧光染色法观察3、6、9和12g／LTFBP作用于HepG-2细胞48h后细胞形态学的变化；免疫细胞化学检测3、6、9和12g／LTFBP作用于HepG-2细胞48h后凋亡相关基因Bcb2及Bax蛋白表达；比色法检测3、6、9和12g／LTFBP作用于HepG-2细胞48h后Caspase-3活性。结果：随着药物浓度的增大，TFBP抑制HepG-2细胞增殖的作用逐渐增强，呈剂量依赖性，在3、6、9和12g／L的TFBP作用于HepG2细胞24h后，HepG-2细胞增殖抑制率分别为7．63％、11．86％、19．02％和21．81％，F=5．16，P=0．034；48h后分别为20．20％、29．44％、39．21％和43．96％，F=11．28，P=0．003；72h后分别为27．24％、34．70％、52．46％和64．72％，F=86．78，P〈0．001。Hoechst33342荧光染色法可见，随着药物浓度的增大，细胞的生长变慢，胞质变疏松，细胞核皱缩，深染，出现典型的细胞凋亡形态。免疫细胞化学检测可见，经不同浓度TFBP处理HepG2细胞48h后，HepG-2细胞Bcl-2蛋白表达随着浓度的增加而逐渐变浅，Bax蛋白表达随着浓度的增加而逐渐变深，Bcl和Bax蛋白的阳性表达率与对照组比较差异均有统计学意义，F值分别为6．563和30．883，P值分别为0．012和0．001。比色法检测Caspase-3活性显示，对照组与3、6、9和12g／L的TFBP对Hepp2细胞作用48h后，Caspase-3酶活性分别为（1．38±2．13）、（3．58±2．21）、（4．95±3．61）、（5．25±1．41）和（5．75±2．24）U／mg，随着TFBP浓度的增加，Caspase-3酶活性显著增高，当TFBP浓度为6、9和12g／L时，各实验组与对照组比较差异有统计学意义，F=5．42，P=0．003。结论：TFBP在体外对肝癌HepG-2细胞有明显的增殖抑     

甘草中α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选

目的从甘草中筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂。方法从甘草中分别提取纯化甘草酸、甘草次酸、甘草黄酮、生物碱和多糖,并进行活性比较。然后以体外α-葡萄糖苷酶抑制试验为指导,从甘草黄酮中提取分离活性成分,并对其抑制动力学特性进行研究。结果甘草黄酮和甘草次酸具有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,从甘草黄酮中分离鉴定了一活性成分—甘草酚,其表现为快速的非剂量依赖性的非竞争性抑制类型,且IC50=0.26μg·mL-1,而甘草次酸却表现为快速的剂量依赖性的不可逆抑制类型,IC50=102.4μg·mL-1。结论甘草酚可作为一种有效的α-葡萄糖苷酶抑制剂。     

甘肃醉鱼草化学成分研究

目的:研究甘肃醉鱼草地上部分的化学成分.方法:利用硅胶柱层析、聚酰胺层析,通过波谱分析鉴定其化学结构.结果:分离并鉴定了4个化合物:香草醛(vanillin,Ⅰ)、香草酸(vanillic acid,Ⅱ)、洋丁香酚苷(acteoside,Ⅲ)、异洋丁香酚苷(acteoside isomer,Ⅳ).     

氢溴酸高乌甲素聚氰基丙烯酸异丁酯纳米囊的制备工艺研究

氢溴酸高乌甲素是毛茛科植物高乌头（aconitum simontanun）根中提取得到的有效成分拉帕鸟头碱（1appcontine）的氢溴酸盐，临床应用表明，本品具有较强的镇痛、局麻作用，镇痛强度为氨基比林的7倍，与哌替啶相比镇痛效果相当，     

金电极上自组装DNA传感器的研究

目的:在金电极表面自组装DNA,制备DNA传感器.方法:以双层组装技术,先进行-SH化合物自组装,得到自组装单分子层,再在SAM上吸附固定DNA,制备DNA修饰电极,用电化学分析法对其组装过程及活性进行表征.结果:基于构建的新型电极,表明双层膜组装方法是组装DNA分子的有效手段,可进一步研究DNA的电化学特性及与其他分子的相互作用.结论:该电极显示良好灵敏度和稳定性.     

虎杖白藜芦醇对人肝癌HepG-2细胞株增殖和生长周期的影响

目的探讨虎杖中白藜芦醇对人肝癌Hep G-2细胞株增殖和生长周期的影响。方法采用微波辅助法提取虎杖中白藜芦醇,将12.5,25.0,50.0,100.0μmol·L-1白藜芦醇作用人肝癌Hep G-2细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测虎杖中白藜芦醇对肝癌细胞Hep G-2细胞抑制增殖作用,在倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞术(FCM)检测细胞周期的分布。结果虎杖中白藜芦醇能显著抑制Hep G-2细胞的生长,并呈现时间-浓度依赖性。流式细胞仪结果显示,白藜芦醇作用于细胞Hep G-2且细胞被阻滞于S期,呈现出剂量依赖性。不同药物浓度白藜芦醇(12.5,25.0,50.0,100.0μmol·L-1)作用人肝癌Hep G-2细胞株48 h后,随着药物浓度的增大,G0/G1期的比例逐渐减小,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。而实验组细胞S期的比例随着浓度增大而增加,分别达到(44.82±1.21)%,(54.00±1.71)%,(65.21±3.66)%,(77.50±4.21)%,与对照组(34.75±3.92)%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论虎杖中白藜芦醇能明显抑制肝癌Hep G-2细胞的增殖,并诱导其细胞凋亡,可引起肝癌Hep G-2细胞的S期阻滞。     

咳喘宁胶囊中挥发油β-环糊精包合物的稳定性考察

目的:考察咳喘宁胶囊中挥发油β-环糊精包合物的稳定性。方法:以挥发油含量为测定指标,分别对包合物进行强光照射、高温、高湿、挥发性试验及恒温加速试验。结果:在强光、热、湿等因素影响下,包合物中的挥发油含量没有明显变化,而混合物中的挥发油含量均明显下降;挥发性试验结果表明,包合物的热失重百分率比混合物小。结论:挥发油β-环糊精包合物具有较强的抗光解性、热稳定和湿稳定性,其稳定性明显优于混合物。     

狗肝菜多糖颗粒剂成型工艺的优选

目的：优选狗肝菜多糖颗粒剂的最佳成型工艺条件。方法：以颗粒成型率、流动性与溶化性为考察指标,分别用单因素试验和正交试验优选颗粒剂处方中所用辅料（填充剂与黏合剂）的种类及其用量,并对制得的颗粒剂进行质量检查。结果：最佳成型工艺条件为狗肝菜多糖-甘露醇-3%HPMC水溶液=1：2.5：0.035,所制得的颗粒剂粒度、流动性与溶化性等项目检查都符合《中国药典》要求。结论：优选出的狗肝菜多糖颗粒剂成型工艺可行,可为进一步工业化生产提供参考和依据。