Metrnl表达降低促进结直肠癌发生和发展

目的 探讨Metrnl与结直肠癌的关系及其在结直肠癌发生发展中的作用。方法 利用人体组织芯片分析结直肠癌和癌旁组织中Metrnl的表达与分布(n=30)。收集临床结直肠癌组织样本15例,利用实时定量多聚酶链式反应(real time PCR)检测Metrnl在结直肠癌组织及正常结肠组织中的转录水平。在细胞实验中,通过慢病毒介导短发夹RNA(shRNA)干扰技术敲减人结肠癌上皮细胞系Caco-2细胞中Metrnl表达,通过CCK8(Cell Counting Kit-8)细胞活力检测试剂盒、凋亡执行蛋白Caspase-3活力检测试剂盒、流式细胞检测Annexin V外翻等探究细胞在5-氟尿嘧啶(5-FU)作用下的存活和凋亡情况。结果 免疫组化检测显示Metrnl蛋白在人结直肠癌组织中增多,但real time PCR结果显示Metrnl mRNA水平降低(P<0.05)。敲减 Metrnl可抑制5-氟尿嘧啶诱导的细胞活力降低和细胞凋亡(P<0.05)。结论 由于肿瘤组织异构,分泌蛋白Metrnl在结直肠癌组织中蓄积,但Metrnl转录在结直肠癌中降低,Metrnl转录降低可能促进了结直肠癌的发生发展,提示该基因有望成为结直肠癌诊断和治疗的新靶点。     

微管蛋白的甘氨酸化修饰及功能研究进展*

微管是真核细胞骨架的基本成分，由alpha/beta 微管蛋白二聚体组成。其二聚体的结构在进化上高度保守， 却可承担多种功能，主要原因是其结构和性质可以受多种机制的调控，特别是微管蛋白翻译后修饰。目前已发现 多种微管蛋白翻译后修饰，其中甘氨酸化是一种重要的修饰方式，它与谷氨酸化修饰的位点均为微管蛋白的C端 谷氨酸残基。但与谷氨酸化不同的是，甘氨酸是中性氨基酸，不会增加微管蛋白C末端的净负电荷。这种修饰主 要由微管蛋白酪氨酸连接酶类似酶系（TTLL）催化，其中在甘氨酸化起始过程中发挥重要作用的酶为TTLL3和 TTLL8，延伸过程中起重要作用的酶是TTLL10。这种翻译后修饰可通过改变微管蛋白C端的空间构像，进而改 变C端的旋转半径和结合结构，提高微管的稳定性，从而维持纤毛的结构稳定和功能正常。在中枢神经中，甘氨 酸化对谷氨酸化有竞争抑制作用，可能是神经退行性改变的保护机制之一；在视网膜中，抑制小鼠微管蛋白甘氨 酸化，导致连接纤毛的数量下降，导致视网膜退行性改变；在结直肠癌的发生发展中，抑制甘氨酸化会增加结直 肠癌的发病风险；在精子中，抑制甘氨酸化会阻碍精子的直线游动，导致雄性不育。在其他微管蛋白翻译后修饰 丰富的组织或生命活动中，如血小板、肌细胞、细胞有丝分裂等，微管蛋白甘氨酸化的功能及其调控机制还有待 深入研究。