海参糖胺聚糖联合放疗对人肺腺癌A549细胞增殖抑制及促凋亡机制研究

目的 探讨海参糖胺聚糖（hGAG）与放疗联合应用对人肺腺癌A549细胞的增殖抑制作用及促凋亡作用机制。方法 体外培养人肺腺癌A549细胞至对数生长期,分为对照组、hGAG组、放射组、联合组（hGAG联合放射处理）。CCK-8法测定不同处理组细胞的增殖抑制率;Hoechest 33258法对实验细胞进行染色并观察细胞变化;AnnexinV-FITC/PI双染法联合流式细胞术检测凋亡状况;蛋白印迹法（Western blot）测定各个组细胞survivin、Bax、Bcl-2及caspase-3四种凋亡蛋白的相对表达量。结果（1）CCK-8法显示,24h、48h和72h各时间段hGAG组、放射组、联合组细胞的增殖抑制率均高于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）;24h、48h和72h各时间段联合组细胞的增殖抑制率亦均高于放射组,差异均有统计学意义（P<0.05）。（2）Hoechest 33258染色示：hGAG组、放射组及联合组在镜下均可见凋亡细胞呈现核碎裂、核固缩现象,细胞呈现为染色浓密的状态,联合组较放射组更为明显;（3）流式细胞仪检测显示:三个实验组的细胞总凋亡率较对照组高（P<0.05）,以及联合组的细胞总凋亡率比放射组高（P<0.05）;（4）Western blot示：三个实验组与对照组比较,以及联合组与放射组相比,蛋白Bax、caspase-3的表达水平升高,蛋白Bcl-2、survivin的表达水平降低（均P<0.05）。结论 hGAG可有效抑制A549肺癌细胞的增殖并促进其凋亡,并且可以增强A549细胞系对射线的敏感性,推测其作用机制可能与caspase-3蛋白和Bax蛋白表达上调,以及survivin蛋白、Bcl-2蛋白的表达下调有关。