何首乌扩增长度多态性反应及银染体系的建立

目的 通过对各主要影响因素的研究,建立适于何首乌扩增长度多态性（AFLP）反应体系及银染体系. 方法 采用改进的CTAB提取方法从何首乌的嫩叶中提取获得总DNA;从酶切DNA的量、时间等考察酶切体系,并设计正交实验进行预扩体系和选扩体系的优化. 结果 酶切体系DNA的适用量为400 ng,37 ℃酶切5 h;用较优的预扩增体系和选择性扩增得到的选择性扩增产物在6%变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳,得到清晰的指纹图谱. 结论 所建立的反应体系可有效地应用于何首乌的分类鉴定和道地性鉴定.     

何首乌三个栽培种核型比较

目的:分析何首乌Polygonum multiflorum三地栽培种的染色体核型。方法:采用植物染色体常规压片法,结合显微摄影。结果:(1)广西靖西栽培种的核型公式为K(2n)=3X=33=9m 24 sm,核型类型为2A;(2)广东德庆种的核型公式为K(2n)=2X=22=12m 10 sm,核型类型为2B;(3)江西新建种的核型公式为K(2n)=2X=22=6m 14 sm 2st,核型类型为2A。结论:三地栽培的何首乌核型存在差异。     

不同倍性何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类的含量比较

目的:考察二倍体与三倍体何首乌中二苯乙烯苷、蒽醌类成分的含量差异。方法:采用Inertsil ODS-3C18柱,分别用乙腈-水(25∶75)、甲醇-0.1%磷酸(85∶15)作为流动相,在320 nm和254 nm处检测2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、蒽醌类成分的含量。结果:广东德庆二倍体何首乌中二苯乙烯苷的含量最高,广西靖西三倍体何首乌中结合型蒽醌的比例达到了85%。结论:不同倍性何首乌中化学成分存在差异。     

药用植物代谢组学的研究进展

从技术步骤、分析方法 以及实际应用三个方面对当前药用植物代谢组学研究领域的一些理论问题和实践中面临的挑战进行综述.     

胃蛋白酶片质量分析及探索性研究

目的：评价国内不同企业生产的胃蛋白酶片的质量,并从溶出线、纯度、比活力等方面进行探索性研究,为企业提高产品质量提供改进方法。方法：采用4种溶出介质考察各企业产品的溶出行为;采用HPLC法,以1.7mol?L-1硫酸铵磷酸盐缓冲液（pH7.0）为流动相,梯度洗脱的方法测定胃蛋白酶片的纯度,并与SDS-PAGE蛋白电泳进行比对;采用蛋白质测定法与效价测定法对比活力进行研究。结果：（1）53批样品中,溶出度最大值为112%,最小值为28%;（2）HPLC结果与SDS-PAGE电泳结果显示胃蛋白酶为多组份物质;（3）原料比活力为12.2~13.2单位?mg -1蛋白,片剂比活力为8.0~15.3 单位?mg -1蛋白。结论：胃蛋白酶片现行质量标准安全性和有效性指标控制不足,建议企业加强药品生产全过程风险管理,降低产品批次间的批间差异,进一步提高制剂工艺的稳定性。本文为全面评价胃蛋白酶片的质量和完善其质量标准提供借鉴和参考。     

疫苗中硫柳汞含量测定及其降解产物分析

目的:建立HPLC法测定疫苗中硫柳汞的含量,与2020年版《中华人民共和国药典》收载的测定法进行比较。方法:采用C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),以甲醇-0.05%三氟醋酸溶液(60∶40)为流动相;检测波长为222 nm,柱温为30℃。结果:本法测定样品中硫柳汞的含量,与2020年版《中华人民共和国药典》测定无机汞离子含量结果存在一定差异。结论:硫柳汞在疫苗生产过程中易降解,本法专属性好,可以更准确地测定疫苗中硫柳汞的含量。     

HPLC梯度洗脱法测定丙泊酚中/长链脂肪乳注射液的含量及有关物质

目的：建立测定丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中的丙泊酚及其有关物质的HPLC方法。方法：色谱柱为Waters XBridge RP18柱（4.6mm×150mm,5μm）;流动相为磷酸二氢钠溶液-乙腈,梯度洗脱;柱温为40℃;检测波长为275nm和254nm。丙泊酚的测定采用外标法,有关物质检查采用外标法与自身对照法。结果：丙泊酚与其两杂质能较好分离,相邻各峰间分离度均大于1.5;丙泊酚、杂质Ⅰ和杂质Ⅱ的线性范围分别为97.2~1457.9μg?mL-1（r=0.999 9）、0.11～1.57μg?mL-1（r=0.999 9）和0.11～1.59μg?mL-1（r=0.999 9）;平均回收率（n=9）分别为99.2%（RSD＝1.4%）、105.8%（RSD＝1.5%）和96.7%（RSD＝4.8%）。结论：所建方法简便快速、专属性强、重复性好,可用于丙泊酚中/长链脂肪乳注射液的含量测定和杂质检查。     

HPLC法测定注射用单磷酸阿糖腺苷中的有关物质

目的:建立测定注射用单磷酸阿糖腺苷中有关物质的高效液相色谱法。方法:采用Kromasil 100-5 C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以水(含10 mmol·L-1四丁基氢氧化铵与10 mmol·L-1磷酸二氢钾)-甲醇(80∶20)为流动相;流速为1.0 ml·min-1,检测波长:258 nm,柱温:30℃;进样量:20μl;应用外标法对注射用单磷酸阿糖腺苷中已知杂质阿糖腺苷和腺嘌呤进行检查,其他未知杂质用主成分自身对照法进行检查。结果:阿糖腺苷和腺嘌呤分别在0.0765~1.530 7μg·ml-1(r=0.999 9),0.078 0~1.560 0μg·ml-1(r=0.999 9)范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.8%(RSD=0.2%,n=9)、97.0%(RSD=1.2%,n=9)。结论:该方法可用于注射用单磷酸阿糖腺苷有关物质的测定。     

何首乌ISSR—PCR反应体系的建立与优化

目的 建立和优化ISSR-PCR反应体系.方法 通过单因素实验研究ISSR反应体系中主要成分(模板、Taq DNA聚合酶、Mg2 、引物、dNTPs)以及退火温度对扩增结果的影响.结果 建立了适合何首乌ISSR分析的反应体系和扩增程序,即在25μl反应体系中,内含1×Taq酶配套缓冲液、100ng模板、1.5 U Taq DNA聚合酶、1.5 mmol/L Mg2 、0.6μmol/L引物、0.2 mmol/L dNTPs.扩增程序为94℃预变性5 min;然后是94℃变性45s,(据不同引物的退火温度)复性1 min,72℃延伸1.5 min,共35个循环;72℃延伸7 min,4℃保存.结论 这一优化体系的建立为今后利用ISSR标记技术进行何首乌鉴定及种质资源遗传多样性分析提供了一个标准化程序.     

琼脂糖凝胶电泳法测定人血白蛋白及人免疫球蛋白类制品的纯度

目的：建立琼脂糖凝胶电泳法测定人血白蛋白及人免疫球蛋白类制品的纯度。方法：采用Helena 公司的SPIFE Touch型自动电泳仪及配套的试剂盒,对琼脂糖凝胶电泳法的方法学进行验证。以供试品浓度5%,对33批人血白蛋白样品以及16批人免疫球蛋白类制品进行纯度测定,并与《中国药典》2015版规定方法（醋酸纤维素薄膜法）的测定结果进行比较。结果：该方法检测正常人血清中白蛋白与免疫球蛋白的RSD分别为1.15%和1.45%,最佳供试品蛋白浓度为5%,仪器通道间差异的RSD小于0.4%,重复性的RSD均小于0.5%。对比两种方法的检测结果,人血白蛋白的两法结果趋势一致且高度相关（Pearson''s r = 0.88）,但琼脂糖凝胶电泳法比醋酸纤维素薄膜法测定结果低1~4%;人免疫球蛋白类制品的检测结果两种方法基本一致（Pearson''s r = 0.66,两法差值小于1%）。结论：该方法操作简便、稳定性较好,可作为人血白蛋白和人免疫球蛋白类制品的纯度测定替代方法。