基础血清抗苗勒管激素水平与IVF-ET临床结局的相关性研究

目的探讨血清抗苗勒管激素(AMH)水平与体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)患者临床结局的相关性。方法以2015年12月至2016年6月在南京大学医学院附属鼓楼医院生殖医学中心行长方案IVF/ICSIET的640例患者为研究对象,回顾性分析年龄、基础AMH、基础FSH、窦卵泡计数(AFC)、体重指数(BMI)及胚胎移植个数与活产的相关性。结果 (1)在这640例患者中,临床妊娠468例,临床妊娠率73.1%,活产者399例,活产率62.3%。单因素相关性分析显示:活产与AMH、AFC、女方年龄、胚胎移植个数相关(P0.05),与BMI、基础FSH、获卵数不相关(P0.05)。多因素Logistic回归分析显示:活产与年龄呈负相关,与胚胎移植个数呈正相关(P均0.05),与AMH和AFC不相关(P0.05)。(2)进一步根据胚胎移植个数分单胚胎移植组(92例)和双胚胎移植组(548例),双胚胎移植组中活产仅与女方年龄呈负相关(P0.05),与血清AMH水平无相关性(P0.05);单胚胎移植组中活产与AFC呈正相关,与女方年龄呈负相关(P均0.05),与血清AMH水平无相关性(P0.05);多因素Logistic回归分析显示活产仅与年龄呈负相关(P0.05),与AFC无关(P0.05)。(3)再根据年龄将患者分为≤32岁(458例)、33～37岁(136例)、≥38岁(46例)三组,单因素相关性分析显示各年龄组患者活产与血清AMH水平均无相关性(P0.05)。结论长方案IVF/ICSI-ET患者活产与年龄呈负相关、与胚胎移植个数呈正相关;血清AMH水平不能独立预测长方案IVF/ICSI-ET患者的活产结局。     

黄体期添加经皮雌激素对卵巢高反应人群体外受精-胚胎移植妊娠结局的影响

目的探讨卵巢高反应人群在黄体期添加经皮雌激素后对IVF-ET妊娠结局的影响。方法前瞻性研究2016年8月至2017年1月在南京大学医学院附属鼓楼医院生殖医学中心行IVF-ET鲜胚移植的卵巢高反应患者257例的临床资料,按随机数字表将其分成两组:单纯P组(116例),从取卵日开始给予地屈孕酮+雪诺同行黄体支持;E2+P组(141例),移植前地屈孕酮+雪诺同使用方法同单纯P组,移植后第7天开始经皮给予雌激素1周。比较两组患者的促排卵情况和妊娠结局。结果两组患者的一般资料比较均无显著性差异(P0.05);两组的HCG日E2、P水平、内膜厚度,获卵数,移植胚胎数及优质胚胎数等比较均无显著性差异(P0.05);两组患者的临床妊娠率(75.9%vs.74.5%)、持续临床妊娠率(71.6%vs.68.1%)、自然流产率(4.6%vs.8.6%)及异位妊娠率(1.1%vs.0%)等亦无显著性差异(P0.05)。E2+P组的中重度OHSS发生率略高于单纯P组,但无显著性差异(P=0.297)。结论卵巢高反应人群在黄体期添加经皮雌激素不能显著提高临床妊娠率,而中重度OHSS发生率有上升趋势,因此对于卵巢高反应人群不推荐在新鲜胚胎移植后补充经皮雌激素。     

微刺激方案中克罗米芬促排卵5天后内源性FSH的变化及结局分析

目的探讨克罗米芬(CC)联合人绝经期促性腺激素(HMG)微刺激方案中应用CC促排卵5d后内源性FSH变化情况及其与促排卵结局的相关性。方法回顾性分析2015年1~5月在南京大学医学院附属鼓楼医院生殖医学中心行CC+HMG微刺激促排卵的156例患者的临床资料,以CC促排卵5d[即月经周期第7天(D7)]内源性FSH的变化分为FSH上升组与FSH下降组;同时将基础D2FSH≥10U/L的患者根据FSH水平变化分为FSH上升组(A组)与FSH下降组(B组),将D2FSH10U/L的患者根据FSH水平变化分为FSH上升组(C组)与FSH下降组(D组),比较各组患者的促排卵结局。结果 156例患者中CC促排卵5d后FSH上升者占53.2%,下降者占46.8%。FSH下降组的D2FSH、D2LH水平、D7E2水平显著高于FSH上升组,FSH下降组的D7FSH、HCG日FSH水平显著低于FSH上升组(P0.05);FSH下降组的促排卵天数及Gn用量亦显著少于FSH上升组(P0.05)。B组的基础窦卵泡数(AFC)、D7E2显著高于A组,D7FSH、HCG日FSH、HCG日LH、促排天数显著低于A组(P0.05);B组的获卵数及冷冻胚胎数显著高于A组(P0.05)。C、D两组除D2FSH、D7FSH有显著性差异外(P0.05),其余指标均无显著性差异(P0.05)。结论 CC+HMG微刺激方案中应用CC促排卵5d后内源性FSH上升与降低都是常见的卵巢反应,对于D2FSH≥10U/L的患者,D7内源性FSH水平变化可用于评价卵巢的储备功能。     

兔干眼细胞模型的建立与生物学特征评价

目的:通过体外分离及培养泪腺上皮细胞,建立干眼细胞模型,分析相关炎症因子,为进一步探究干眼治疗的有效药物奠定基础。方法:体外分离培养兔泪腺上皮细胞,并采用细胞增殖实验和免疫荧光实验对原代细胞活性和纯度进行鉴定。根据脂多糖(LPS)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的IC50值,采用两者的0.5倍IC50刺激兔泪腺上皮细胞,构建干眼细胞模型即LPS组和TNF-α组,并通过细胞增殖实验、ELISA和流式方法对比两种构建干眼细胞模型的相关生物学特征。结果:兔泪腺上皮原代细胞培养12h后细胞基本贴壁,48h可见细胞形态舒展,呈长三角形。兔泪腺上皮原代细胞活性为92%以上,标志角化蛋白(Pan-cytoeratin)阳性率>90%,符合实验要求。LPS和TNF-α12h的IC50分别为20μg/mL、4.996ng/mL,采用LPS(10μg/mL)和TNF-α(2.5ng/mL)干预细胞12h后:两组细胞凋亡率明显高于空白对照组(P<0.01),组间比较,TNF-α组细胞凋亡率高于LPS组(P<0.01);两组细胞上清液中IL-1β和IL-6的含量均明显高于空白对照组(P<0.01),组间比较,TNF-α组IL-1β和IL-6的含量明显高于LPS组(P<0.01)。提示TNF-α模拟干眼的炎症反应效果优于LPS。结论:本研究成功建立了一种细胞纯度较高、相对简便、快速,模型稳定的兔干眼细胞模型,为兔泪腺上皮细胞功能及干眼的基础研究提供了更稳定的体外实验模型。     

流感病毒诱导的小鼠肺上皮细胞损伤及外泌体miRNA差异表达谱研究

目的:通过研究甲型流感病毒刺激后小鼠肺上皮细胞源性外泌体的微小RNA(miRNA)差异表达谱,探讨流感病毒诱导肺上皮细胞损伤的机制。方法:采用甲型流感病毒(MOI=0.2)诱导小鼠肺上皮MLE-12细胞,同时设空白对照组,通过CCK-8法检测不同诱导时间下的细胞活力,明确甲型流感病毒诱导细胞损伤的最佳条件。通过流式细胞术检测细胞凋亡水平,RT-qPCR和Western blot检测炎症反应相关因子的表达水平。采用超速离心法提取甲型流感病毒诱导的MLE-12细胞上清液中的外泌体,并通过透射电镜、纳米颗粒跟踪分析、Western blot及高通量单细胞测序检测外泌体形态、粒径、浓度、膜标志蛋白表达及其miRNA差异表达谱。结果:CCK-8实验结果显示,MOI=0.2的甲型流感病毒干预8 h的MLE-12细胞活力抑制率最为符合本研究需要。以该条件干预细胞,凋亡率(24.11%±0.17%)显著升高;甲型流感病毒核蛋白(NP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的mRNA和蛋白表达水平均显著升高。透射电镜观察到提取的外泌体为圆形的囊泡状;纳米颗粒跟踪分析检测到甲型流感病毒感...     

麻杏石甘汤通过外泌体miR-1249-5p靶向SLC4A1抑制流感病毒细胞级联损伤效应研究

目的 探究麻杏石甘汤通过外泌体miR-1249-5p靶向溶质载体家族4成员A1(solute carrier family 4 member 1,SLC4A1)抑制流感病毒诱导的肺上皮细胞损伤-巨噬细胞极化的级联损伤效应的作用机制。方法 以肺上皮细胞为研究对象,采用CCK-8检测麻杏石甘汤含药血清的安全剂量和对流感病毒刺激肺上皮细胞治疗剂量,NanoSight鉴定肺上皮细胞源外泌体的粒径和浓度,qRT-PCR检测外泌体中miR-1249-5p基因表达。以与肺上皮细胞源外泌体共培养的巨噬细胞为研究对象,采用qRT-PCR检测巨噬细胞中miR-1249-5p、SLC4A1和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路相关基因表达;Western blotting检测巨噬细胞中SLC4A1和NF-κB通路相关蛋白表达;流式细胞术和qRT-PCR检测巨噬细胞M1/M2极化表型。结果 CCK-8结果显示,10%和20%的麻杏石甘汤含药血清对肺上皮细胞无细胞毒性,显著抑制流感病毒诱导的肺上皮细胞损伤(P<0.05、0.01);NanoSight检测各组肺上皮细胞源外泌体...     

牛痘疫苗接种家兔炎症皮肤提取物治疗糖尿病周围神经病变的 Meta分析

目的 对牛痘疫苗接种家兔炎症皮肤提取物(神经妥乐平)治疗2型糖尿病(type 2 diabetes)同时合并周围神经病变(DPN)病人的作用效果和药物使用的安全性进行系统评价,为神经妥乐平在2型糖尿病病人同时合并DPN治疗中的合理使用提供循证证据.方法 检索循证图书馆、PubMed文献数据库、EMBASE、万方电子数据库、中国生物医学文献数据库(CBM)、中国期刊全文数据库(CNKI)等,按照筛选标准对神经妥乐平治疗DPN相关的临床随机对照研究(RCT)相关文章进行收集整理,检索时限从各数据库建库起至2019年12月.先对纳入研究做临床证据质量评价,再进一步运行RevMan(版本5.3)对各指标数据(总有效率、正中神经运动神经传导速度、胫神经运动神经传导速度以及不良反应发生率)进行分析.结果 共纳入9篇文献,总计934例病人.研究最终结果表明,在DPN的药物治疗效果方面,试验组药物治疗总有效率较对照组具有更多优势[OR=3.91,95％CI(2.64～5.78),P<0.001].在改善神经功能障碍方面,试验组的正中神经[MD=4.07 m/s,95％CI(2.12～6.03),P<0.001]以及胫神经的运动神经传导速度[MD=2.93 m/s,95％CI(2.08～3.79),P<0.001]也较对照组显著提高.在药品的安全性方面,试验组神经妥乐平的药品不良反应(ADR)发生率与对照组差异无统计学意义.结论 神经妥乐平作为一种有效性较好的临床药物,可显著改善神经功能,具有广泛的临床应用价值,同时对于其发生不良反应的风险在临床使用中仍需予以重视.     

基于FAERS数据库儿童应用奥马珠单抗安全信号挖掘与分析

目的:分析探究奥马珠单抗在儿童患者中潜在的不良事件(adverse drug event,ADE),为临床合理用药提供数据支持。方法:通过对美国食品药品监督管理局不良事件呈报系统(FDA Adverse Event Reporting System,FAERS)相关数据进行挖掘,分别应用报告比值比法(reporting odds ratio,ROR)和比例报告比值比法(proportional reporting ratio,PRR)对儿童使用奥马珠单抗的不良事件信号进行分析研究。结果:研究表明儿童奥马珠单抗不良事件多见于呼吸系统、免疫系统、胃肠系统及各类检查值异常,发现心率异常、耳充血等ADE在该药品说明书中未见阐述。性别和临床适应证与严重过敏反应的发生可能具有一定的相关性,临床需引起高度关注。结论:儿童在应用该药前应重视过敏反应风险评估、关注疾病进展及心血管不良事件的关系。特别是对于患有哮喘或具有既往过敏史的女童应加强药学监护,对存在血栓栓塞疾病危险因素的患者更须提高警惕。     

1例布鲁氏菌感染性心内膜炎合并脊柱炎患者的药学监护

目的 探讨布鲁氏菌感染性心内膜炎合并脊柱炎患者的治疗方案以及临床药师在治疗中发挥的作用。方法 临床药师参与1例布鲁氏菌感染性心内膜炎合并脊柱炎患者的治疗过程,结合基因检测和INR监测结果,协助医师制定药物治疗方案。针对药物相互作用导致的抗凝影响,及时调整华法林剂量以达到理想目标值,同时提供患者有效的药学监护及用药教育。结果 医师采纳了临床药师的合理化建议,治疗过程中患者未出现不良反应,病情好转后出院。结论 临床药师对患者实施全程化的药学监护,在临床治疗中发挥了积极作用。     

CD4+T细胞在流感病毒感染诱发细胞因子风暴及急性肺损伤中的研究进展

CD4⁺T细胞作为细胞免疫的主要武器，在控制和清除感染方面起着至关重要的作用，是机体抵抗感染性疾病的重要屏障。流感病毒感染引起的呼吸道感染性疾病具有极高的传染性、发病率及病死率，其感染机制较为复杂，尚未得到全面阐述。机体在流感病毒感染后诱发的旺盛免疫反应被称为“细胞因子风暴”，与过激的促炎细胞因子和广泛的组织损伤有关，最终可能导致急性肺损伤。因此，本文总结目前研究进展，重点阐述了CD4⁺T细胞在流感病毒感染诱发细胞因子风暴的作用机制及急性肺损伤中的影响，为后续研究提供相关思路及理论指导，以期为流感病毒引起的疾病带来新的有效诊疗方法。