土党参的化学成分及其抗血管生成活性研究

目的对土党参(金钱豹Campanumoea javanica的根)的化学成分及其抗血管生成活性进行研究。方法采用多种柱色谱技术进行分离纯化,通过波谱分析鉴定化合物结构,并用斑马鱼模型评价其抗血管生成活性。结果从土党参90%乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部位中分离得到14个化合物,分别鉴定为金钱豹苷(1)、lobetyol(2)、4E,8E,12E-三烯-10-炔-1,6,7-十四烷三醇(3)、9-(2-四氢吡喃)-8E-烯-4,6-二炔-3-壬醇(4)、9-(2-四氢吡喃)-2E,8E-二烯-4,6-二炔-1-壬醇(5)、lobetyolinin(6)、(Z)-3-己烯-O-α-L-吡喃阿拉伯糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、3,4-二羟基苯甲酸(8)、党参苷II(9)、zanthocapensol(10)、蛇葡萄素(11)、贝壳杉双芹素(12)、β-脱皮甾酮(13)、α-托可醌(14)。结论化合物1为新的聚乙炔苷,命名为金钱豹苷;化合物2~14为首次从金钱豹属植物中分离得到。化合物3和4表现出一定的抗血管生成活性。     

海洋深层水与褐藻糖胶联合用药对IR-HepG2细胞氧化应激水平的影响

摘要：目的 探讨海洋深层水（deep-sea water,DSW）与褐藻糖胶（fucoidan,FPS）联合用药对胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）HepG2细胞内氧化应激水平的影响。 方法 制备FPS和硬度为1 000的DSW,并对其理化性质进行分析。采用MTT法检测DSW与FPS联合用药对HepG2 细胞增殖的影响,确定与DSW联合用药的FPS浓度。高浓度葡萄糖(30 mmol?L-1)诱导建立IR-HepG2 细胞模型,同时给予DSW与不同浓度FPS的联合用药,药物孵育24 h后,测定肝糖输出量和糖原含量,并以二者为指标确定DSW与FPS的最佳联用剂量;然后对胞内活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量及超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase,GSH-Px）进行测定,并采用Western blot 对C-Jun氨基端激酶（c-jun NH2-terminal kinase,JNK）蛋白的表达及磷酸化程度进行检测,观察DSW与FPS对IR-HepG2氧化应激的影响。 结果 DSW与50 mg?L-1以内的FPS联合用药不会对细胞增殖产生影响,可以剂量依赖性地降低肝糖输出量,提高糖原水平,其中以DSW与50 mg?L-1 FPS的联用效果最好,而且其联用效果显著优于单用同剂量的DSW或FPS;DSW与50 mg?L-1 FPS联用可以显著降低MDA和ROS 的水平,提高GSH-Px和SOD的活性,并显著降低JNK的磷酸化程度。 结论 DSW与FPS联合用药可降低IR-HepG2细胞内的氧化应激水平,其最佳联用剂量为50 mg?L-1,其保护作用可能与激活抗氧化酶、抑制脂质过氧化反应及抑制JNK通路有关。     

四氯化碳致斑马鱼肝损伤的初步研究

<正>肝脏作为人体中重要的解毒器官,是许多化学性物质的重要靶点[1]。在新药研发过程中,肝脏毒性是很多新药无法最后获批的主要限制因素之一。四氯化碳(CCl4)是经典的肝损伤诱导剂。斑马鱼(Danio rerio)已成为继小鼠之后的又     

卡马西平对斑马鱼胚胎心脏功能的影响

目的 探讨以斑马鱼为动物模型进行药物毒性作用研究的可行性.方法 用不同浓度卡马西平处理发育48 h斑马鱼胚胎,于药物处理后8h、16h、24 h观察各组胚胎心脏形态变化,并计数心率.药物处理24 h后终止药物作用,并于4h、8h、24 h连续观察各组胚胎心率的恢复情况.结果 卡马西平处理引起斑马鱼胚胎心率降低,随处理时间延长和药物浓度升高下降越明显,卡马西平引起胚胎心率下降的24h EC50约为626.07 mmol/L,终止药物作用后8h,胚胎心率恢复至正常水平.结论 卡马西平引起斑马鱼胚胎心率降低,并呈现量效依赖性,卡马西平对心率的抑制具有可逆性.     

海洋深层水对阿尔茨海默病斑马鱼认知障碍的干预作用

目的 以斑马鱼为模型，研究海洋深层水（deep-sea water，DSW）对氯化铝（AlCl3）诱导所致阿尔茨海默病（Alzheimer"s disease，AD）的干预作用，初步探讨DSW防治AD 的可能机制。方法 采用AlCl3诱导斑马鱼成鱼建立AD模型，建模的同时给予不同硬度的DSW，通过Viewpoint斑马鱼行为分析系统和T迷宫装置观察DSW对AD斑马鱼自主活动能力和学习认知能力的影响；最后通过 Western Blot检测Tau蛋白的表达及磷酸化程度。 结果 与空白对照组相比，AlCl3 暴露的模型组斑马鱼的游行距离和最大速度显著降低，进入EC区的潜伏时间显著增加，而在EC区的停留时间显著降低，说明其自主活动能力、学习和空间认知能力明显受到影响，AlCl3诱导成功建立AD模型；而DSW可以提高AD斑马鱼的游行距离和速度，降低其进入EC区的潜伏时间，延长其在EC区的停留时间，并呈剂量依赖性，说明DSW可以改善AlCl3诱导所致AD斑马鱼的自主活动能力和学习认知能力。Western Blot 表明，DSW可以显著抑制Tau蛋白在丝氨酸（serine，Ser）396 及苏氨酸（Threonine，Thr）231 两个位点的过度磷酸化。结论 DSW 可以有效改善AD，其作用机制可能与抑制Tau蛋白的过度磷酸化有关。     

采用斑马鱼模型评价对乙酰氨基酚的肝脏毒性

目的研究对乙酰氨基酚（APAP）对斑马鱼幼鱼的肝脏毒性,并验证斑马鱼模型用于药物肝毒性快速评价的实用性。方法以发育72 hpf的肝脏荧光转基因斑马鱼幼鱼（L-FABP：EGFP）为实验对象,不同浓度的APAP分别处理斑马鱼幼鱼,于处理后24、48、72 h,体视显微镜下观察幼鱼的死亡率、肝脏形态学变化和卵黄囊吸收情况,荧光显微镜下观察APAP对幼鱼肝脏荧光的影响。结果 APAP对斑马鱼幼鱼存活率的影响呈剂量和时间相关性。APAP处理后的幼鱼肝脏形态出现异常、肝脏颜色变暗,卵黄囊肿。与空白对照组相比,APAP处理后的幼鱼肝组织L-FABP荧光表达明显下降,肝脏明显萎缩退化。结论 APAP对斑马鱼幼鱼具有肝脏毒性。肝脏荧光转基因斑马鱼模型快速评价药物的肝脏毒性具有较好的应用前景。