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1.
目的探讨神经酰胺对大鼠脑胶质瘤细胞C6自噬性死亡的影响及其作用机制。方法不同浓度神经酰胺作用于C6细胞后,用MTT法检测细胞的存活率,流式法检测细胞凋亡的改变;Western blotting及电镜的方法观察细胞自噬水平的改变,以及JNK及其下游靶分子c-Jun的磷酸化水平变化;最后进一步借助JNK特异性抑制剂SP600125抑制JNK的活性,观察其对神经酰胺诱导的细胞自噬情况的影响。结果与对照组相比,神经酰胺作用24 h后,C6细胞存活率明显降低,且具有剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,神经酰胺作用24 h后,C6细胞死亡明显升高且具有剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05),但其中凋亡性死亡比例较低;神经酰胺作用后细胞内自噬小体数目,LC3B/LC3A的比值,Beclin-1的表达水平,以及JNK和c-Jun磷酸化水平都显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);提前给予JNK特异性抑制剂SP600125抑制JNK的活性后,显著阻断神经酰胺诱导的细胞自噬。结论神经酰胺可诱导胶质瘤细胞C6发生自噬性死亡,其诱导胶质瘤细胞发生自噬的机制可能与激活JNK信号通路有关。  相似文献   
2.
目的:研究7种不同诱导方式制备的大鼠肝匀浆的代谢酶活性,并探讨用低温液体法保存肝匀浆的可行性。方法:SD雄性大鼠,每组6只,分别用苯巴比妥(PB)、β-萘黄酮(βNF)和多氯联苯(PCB)3种诱导剂,在不同给药途径、不同剂量、不同时间、单一诱导或联合诱导等7种不同诱导方式下,制备肝匀浆,并在0、-20和-40℃贮存。选择2-氨基芴(2AF)、吖啶橙(AO)和环磷酰胺(CP)3种间接致突变剂在Ames试验中应用TA100、TA98或TA97,对上述诱导方式和贮存方式、贮存时间下获得的肝匀浆进行肝代谢酶活性的考察。结果:各组肝匀浆对间接致突变剂2AF、AO和CP均呈代谢活酶性阳性;加诱导剂的肝匀浆代谢酶活性比不加诱导剂的更强;联合诱导组的肝匀浆代谢酶活性比单独诱导组的更高;不同给药途径,不同诱导时间、不同诱导剂量、联合诱导与多氯联苯(PCB)诱导等,其肝匀浆代谢酶活性基本一致。加入冰冻保护剂的肝匀浆低温贮存液在4℃可贮存4周;在-20和-40℃下贮存24周代谢酶活性未明显降低。结论:PCB诱导组肝匀浆代谢酶活性与联合诱导组基本一致,均大于单独诱导组,且后者大于未诱导组;给药途径、诱导时间和剂量对肝匀浆代谢酶活性影响不大;肝匀浆低温贮存液保存于-20和-40℃环境下24周内能够保证代谢酶的活性。  相似文献   
3.
两种增加骨密度功能保健食品的功效研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:对2种以碳酸钙、氨基酸葡萄糖、硫酸软骨素为主要组分但不同配比的增加骨密度类保健食品的功效进行验证,从配方角度进行分析评价。方法采用相当于人体推荐剂量的5、10、30倍浓度分别将氨糖软骨素片(0.33、0.67、2.00 g/kg)及骨密度强化胶囊(0.25、0.5、1.5 g/kg)掺入饲料给予大鼠90 d,同时分别设置与30倍剂量组钙含量相同的碳酸钙对照组。测定大鼠体质量、股骨质量、股骨密度及股骨钙含量等指标,对比配方及结果进行分析和讨论。结果股骨质量,增加骨密度胶囊10、30倍剂量组与碳酸钙组比较差异无统计学意义(P>0.05)。氨糖软骨素片30倍剂量组与碳酸钙组比较差异无统计学意义(P>0.05);股骨中点骨密度,增加骨密度胶囊30倍剂量组与碳酸钙组比较差异无统计学意义(P>0.05)。氨糖软骨素片30倍剂量组与碳酸钙组比较差异无统计学意义(P>0.05);股骨远心端骨密度,增加骨密度胶囊10、30倍剂量组与相应碳酸钙组比较差异无统计学意义( P>0.05)。氨糖软骨素片10、30倍剂量组与相应碳酸钙组比较差异无统计学意义(P>0.05);股骨钙含量,增加骨密度胶囊30倍剂量组与相应碳酸钙组比较差异无统计学意义(P>0.05)。氨糖软骨素片10倍、30倍剂量组与30倍碳酸钙组比较差异无统计学意义( P>0.05);饲料钙含量,低钙饲料实测钙含量为1.2 mg/g。结论2种配方的保健食品均具有增加骨密度功效,氨糖软骨素片较增加骨密度胶囊配方更合理。  相似文献   
4.
目的 研究大鼠不同性别、血清样本放置条件及时间对生化检验结果的影响.方法 80只大鼠编号后一次性取静脉血,放置30min后离心,每只鼠血清分成8份.首次(1h)检测后,所有血清至于-80℃冰箱保存,一份于1、2、4、7、11、23、40d时间点重复解冻、检测后复存于-80℃冰箱;其余七份分别于以上时间点单次解冻、检测后丢弃;检测项目均为谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、尿素(UREA)、肌酐(CREA)、胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、血糖(GLU)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB).结果 雄性、雌性大鼠血清样本-80℃冰箱保存至40d 9个生化指标均与1h差异无统计学意义;雌性大鼠血清样本保存-80℃在1d、2d、4d、7d4个时间点重复解冻,部分生化指标逐步显示差异有统计学意义,且随解冻次数及保存时间的增加,差异具有统计学意义的生化指标项数增加,第4次(7d)解冻后ALT、TP指标结果与1h测定结果比较差异具有统计学意义(均P<0.05);第5次(11d)解冻ALT、TG、TP指标结果与1h测定结果比较差异具有统计学意义(均P<0.05);第6次(23d)解冻ALT、CREA、TG、TP指标结果与1h测定结果比较差异具有统计学意义(均P<0.05);第7次(40d)解冻ALT、AST、UREA、CREA、TG、GLU、TP、ALB指标结果与1h测定结果比较差异具有统计学意义(均P<0.05).其余指标与1h测定结果比较无显著差异(P>0.05).雄性大鼠血清样本保存-80℃重复解冻1~5次9个生化指标均与1h测定结果比较差异无统计学意义,第6次(23d)解冻TP指标测定结果比较差异具有统计学意义(P<0.05);第7次(40d)解冻TG、TP指标测定结果比较差异具有统计学意义(均P<0.05),其余指标与1h测定结果比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 不同性别大鼠血清-80℃条件下保存40d以内单次解冻后测定以及在大鼠血清解冻3次以内对生化指标测定值无影响;但重复解冻4次以上部分生化指标有显著差异,且不同性别大鼠血清指标差异情况不同,血清样本放置条件及时间及解冻次数会对大鼠生化检测指标造成影响.  相似文献   
5.
目的:观察竹红菌乙素(HB)脂质体对鸡肉垂皮肤的光动力效应.方法:莱亨鸡14只,分为对照组、单纯照光组、单纯给药组和光动力学治疗(photodynamic therapy,PDT)组.PDT组分为0.25和0.5mg·kg-1组,每个肉垂划出两个直径1cm的圆形区域,分别照射10和20 min,功率密度为100 mW·cm-2,印照光剂量为60和120 J·cm-2.莱亨鸡静脉注入光敏剂后,立即用532 nm激光照射,之后每天进行大体观察,并于d 3和d 14取材,HE染色,光镜下观察.结果:HB脂质体剂量为0.25和0.5 mg·kg-1时,均可引起鸡肉垂表皮层破溃结痂,约14 d痂退后明显褪色,病理表现为真皮浅层毛细血管的闭锁,表皮细胞增生,两组无明显差别;激光能量密度为60 J·cm-2组表皮损伤的程度要明显弱于120 J·cm-2,但均产生明显的褪色效果.结论:HB脂质体对鸡肉垂真皮浅层毛细血管网具有较好的破坏作用,但对正常表皮也产生可逆性损伤.  相似文献   
6.
目的研究新型光敏剂17,4-位氨基磺酸竹红菌乙素衍生物(17-4-amino-1-butane-sulfonic acid-hypocrellin B,4SB)的光谱特性及其与人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)的相互作用规律,为4SB临床和基础研究提供实验依据。方法使用分光光度计和荧光光谱仪测量4SB在PBS和HSA溶液中的吸收光谱和荧光光谱,并与临床使用的光敏剂血卟啉衍生物(hematoporphyrin derivative,HpD)作对比,研究HSA对4SB光谱的影响。将4SB溶于HSA溶液后持续震荡,不同的时间点测定4SB吸收光谱和荧光光谱,观察4SB与HSA作用的时间规律。观察HSA对4SB吸收和荧光光谱的影响:将浓度为0、1.25、2.5、5.0、10和20μM/ml的HSA加入5μM/ml的4SB中,测定吸收光谱和荧光光谱。HSA与4SB相互的荧光淬灭:将不同浓度的4SB加入HSA中,测定4SB的荧光光谱;将不同浓度的4SB加入HSA中,测定HSA的荧光光谱。结果 4SB在600 nm以上的波段较HpD的吸收有很大提高,在人血清溶液体系中此峰红移且增强了2.3倍。4SB与HSA的结合时间是30 min。HSA与4SB是1对1的特异性结合,且位点在色氨酸残基附近。结论 4SB在红光波段吸收好,与白蛋白结合后增强了对光的吸收,与白蛋白1∶1结合,是一种有开发前景的光敏剂。  相似文献   
7.
目的:评价以芦荟全叶冻干粉、小麦膳食纤维、苹果醋粉等为主要成分的保健食品通便功能。方法按卫生部《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中润肠通便功能检验方法开展实验。经口给予小鼠3.0、1.0、0.5 g/kg体质量(相当人体推荐量的30、10、5倍)剂量的受试物15 d,采用不同剂量的复方地芬诺酯制备肠蠕动抑制模型和便秘模型。测定肠蠕动抑制模型小鼠小肠墨汁推进率、便秘小鼠排便时间、排粪便粒数和粪便重量。结果各剂量组小鼠各周体质量、体质量增加值未见明显变化;受试物低、中剂量组的小肠推进速度、第一粒黑便排出时间、6h排黑便粒数和黑便总重量与模型对照组比较变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05);受试物高剂量组的小肠墨汁推进率和墨汁推进转换值则有明显增加,第一粒黑便排出时间提前,6 h排黑便粒数和黑便总重量有明显增加,与模型对照组比较,统计学分析差异有统计学意义(P<0.05)。结论根据《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版),该受试物具有通便功能。  相似文献   
8.
目的 探讨光动力学疗法对兔耳增生性瘢痕的作用。方法 建立兔耳增生性瘢痕模型后,将增生性瘢痕块随机分为血卟啉单甲醚(HMME)一光动力学疗法(PDT)治疗组和对照组(n=12)。观察瘢痕生长情况,建模术后28d取材行常规HE染色和胶原纤维VG染色,计算微血管密度,观察PDT对瘢痕的影响。结果 PDT治疗后瘢痕厚度显著降低,真皮层变薄;微血管数量及成纤维细胞数量减少,且主要位于真皮深层;胶原含量下降,胶原纤维排列较规则有序。结论 在瘢痕形成早期,HMME—PDT能够有效抑制兔耳瘢痕的增生,该方法有可能成为瘢痕预防与治疗的有效方法。  相似文献   
9.
目的观察不同参数的血卟啉单甲醚-光动力学疗法(HMME-PDT)对兔耳增生性瘢痕的生物学效应,为临床应用HMME-PDT防治增生性瘢痕提供实验依据。方法建立兔耳增生性瘢痕模型后,将150个增生性瘢痕块随机分为HMME-PDT治疗组和对照组。PDT治疗组给予HMME10mg/kg,分别在给药后即刻、30min、1和3h行半导体激光照射,波长630nm,能量密度分别为5、10和20J/cm^2。观察瘢痕生长情况,术后28d取材行常规HE染色,计算各组瘢痕增生指数,分析HMME-PDT对瘢痕的影响。结果静脉注射HMME10mg/kg后,以功率密度为20mW/cm^2,能量密度为5J/cm^2的半导体激光在给药后即刻和30min照光时能对瘢痕增生块产生抑制效应,其中以时间间隔为30min时的作用更加显著,而能量密度为20J/cm^2的激光照射瘢痕增生指数仍然较高,甚至超过空白对照组。结论HMME-PDT对兔耳增生性瘢痕的生物学效应与光敏剂的剂量和激光照光时间、给药后至照光的时间间隔和能量密度密切相关。  相似文献   
10.
微波消解法处理明胶空心胶囊类样品的方法研究   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
 目的 提高微波消解法处理明胶空心胶囊类样品实验的安全性和消解效率。方法 采用配有温度和压力传感器的微波消解系统对不同消解条件进行考察,优化实验方案。结果 使用高比例过氧化氢参与明胶空心胶囊类样品预消解,可使后续微波消解时的压力增高变缓,最高压力下降,同时缩短实验时间,提高消解效率。结论 该方法有效解决了《中国药典》方法预消解时间长和采用普通消解罐时易发生“爆罐”的问题,提高了实验安全性和方法适用性。  相似文献   
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