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1.
目的:探究卵巢癌对紫杉醇(PTX)耐药的潜在靶点及其相关机制。方法:体外培养卵巢癌A2780细胞和A2780PTX耐药细胞(A2780/T),采用不同浓度(2,4,8,16,32,64,128,256μmol·L-1)PTX分别干预24 h或48 h,噻唑蓝(MTT)比色法检测PTX对A2780细胞和A2780/T细胞存活率的影响,利用液相色谱质谱/质谱(LC-MS/MS)非标记(Label-Free)定量蛋白质组学方法鉴定和筛选两组细胞中表达差异的蛋白,通过基因本体(GO)注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析,筛选卵巢癌细胞对PTX耐药的潜在生物标志物。以正常培养的A2780细胞作为空白组,采用0,1,4μmol·L-1的PTX处理A2780/T细胞,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测验证潜在靶点转化生长因子-β活化激酶1结合蛋白1(TAB1)及其下游相关分子转化生长因子-β活化激酶1(TAK1),p38有丝分裂活化蛋白酶(MAPK)mRNA和蛋白的表达水平。结果:与空白组比较,PTX干预组的A2780和A2780/T细胞的活力均降低。PTX对A2780细胞的抑制率明显高于A2780/T细胞。A2780细胞中,PTX处理48 h的半抑制浓度(IC50)为0.002μmol·L-1,A2780/T细胞中,PTX的IC50>设置的最高浓度128μmol·L-1,与A2780细胞相比,A2780/T细胞对PTX具有耐药性。通过非标记定量蛋白质组学分析筛选出A2780/T和A2780细胞之间有441种差异表达蛋白和421种特殊差异表达蛋白。GO功能富集分析显示,在差异表达的蛋白质中,结合蛋白占大多数(80%)。根据KEGG通路分析结果和表达位点分析,TAB1被认为可能是卵巢癌对PTX耐药的潜在生物标志物。与A2780细胞比较,A2780/T细胞的TAB1 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01),与TAB1相互作用的TAK1 mRNA和p38 MAPK mRNA亦明显降低(P<0.05,P<0.01),但蛋白表达无显著变化。结论:TAB1可能是卵巢癌对PTX耐药的潜在生物标志物,其机制可能与TAB1/TAK1/p38 MAPK通路有关。  相似文献   
2.
目的 研究消癌平(XAP)注射液和紫杉醇(PTX)联合应用对人卵巢癌SK-OV-3细胞增殖及裸鼠异位移植瘤的抑制作用。方法 将生长至对数期的人卵巢癌SK-OV-3细胞分为6组:对照组、紫杉醇组(10 nmol/L)、消癌平注射液低、高剂量组(20、80 μl/ml)、消癌平注射液低、高剂量联合组(PTX 10 nmol/L+XAP 20 μl/ml、PTX 10 nmol/L+XAP 80 μl/ml),各组分别加入药物干预24 h或48 h后,MTT法测定并计算细胞存活率。将36只雌性荷人卵巢癌细胞SK-OV-3的异位移植瘤裸鼠随机分为6组,包括对照组(G1:生理盐水)、紫杉醇组(G2:PTX 10 mg/kg)、消癌平注射液低、高剂量组(G3:XAP 20 ml/kg、G4:XAP 50 ml/kg)、低剂量联合组(G5:PTX 10 mg/kg+XAP 20 ml/kg)以及高剂量联合组(G6:PTX 10 mg/kg+XAP 50 ml/kg),每组6只。各治疗组予相应药物治疗18 d,观察记录小鼠一般情况、体重、肿瘤体积,并计算抑瘤率。结果 SK-OV-3细胞体外实验结果显示,与对照组相比,消癌平注射液、低剂量联合组和高剂量联合组的SK-OV-3细胞存活率均显著降低(P<0.05或P<0.01),且联合用药组与紫杉醇组相比,也有显著差异(P<0.05),并呈现剂量和时间依赖性。裸鼠异位移植瘤实验结果显示,高剂量联合组的抑瘤率明显高于对照组和紫杉醇组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 消癌平注射液和紫杉醇联用对人卵巢癌细胞SK-OV-3裸鼠异位移植瘤的抑制具有协同作用(P<0.05)。  相似文献   
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