基于有限采样法的骨肉瘤患者甲氨蝶呤体内暴露量估算模型的建立与验证

目的 采用有限采样法估算骨肉瘤患者静脉滴注大剂量甲氨蝶呤(high dose methotrexate, HD-MTX)后的体内药物暴露量,即药时曲线下面积(area under the drug concentration versus time curve, AUC_0-t)。方法 34名骨肉瘤患者共进行67个周期HD-MTX化疗,分别于滴注结束时、开始滴注10,24,48和72 h收集患者血液样本,采用化学发光免疫法(CMIA)进行MTX血药浓度测定。计算得到患者MTX临床药动学参数后,经多元线性回归,建立基于有限采样法的AUC_0-t估算模型。采用Bootstrap法和Jackknife法进行模型准确性验证,采用Bland-Altman分析法评估有限采样法与经典药动学方法之间的一致性。通过绘制ROC曲线,评估AUC_0-t对HD-MTX不良反应的预测性能。结果 综合考虑临床可操作性及准确性,选择两点(c_max、c_{24 h})模型用于MTX AUC_0-t的估算,回归方程为AUC_0-t=6.36c_max+161.30c_{24 h},r²为0.933,平均预测误差为0.47%,均方根误差为6.78%。AUC_0-t对肝功能损伤、骨髓抑制及消化道反应等药物不良反应具有良好的预测能力,P<0.05。结论 基于c_max、c_{24 h}两点估算的有限采样法可以用于骨肉瘤患者HD-MTX药物暴露量的估算,方法简便,易于临床开展,可为MTX个体化用药提供参考。     

液相色谱-串联质谱法监测不同负荷方案替考拉宁治疗骨髓炎患者的血药浓度比较

目的建立并验证液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测替考拉宁血浆浓度，并分析我院不同负荷方案骨髓炎患者的替考拉宁谷浓度(C_min)达标情况。方法建立LC-MS/MS法测定替考拉宁的C_min，考察方法的专属性、标准曲线、精密度与回收率、基质效应和稳定性。收集43例接受替考拉宁治疗的骨髓炎患者，根据给药方案不同分为2组：试验组A患者接受3次负荷剂量400 mg,q12h，试验组B患者接受6次负荷剂量400 mg,q12h，同时进行治疗药物监测(TDM)。两组均于第4天维持剂量给药前30 min采样，检测患者替考拉宁C_min值，比较两组替考拉宁C_min达标情况。结果血浆中替考拉宁标准曲线方程为Y=0.032 4X+0.000 886(r=0.996 4)，在0.20～50.00μg·m L^-1内线性关系良好；质控样本的准确度为94.71%～112.50%内；日内、日间RSD为3.17%～15.19%；提取回收率为81.22%～91.26%；基质效应为93.54%～119.78%...     

LC-MS/MS法测定骨肉瘤患者血清中甲氨蝶呤及其 代谢产物7-羟基甲氨蝶呤的浓度

目的:建立测定人血清中甲氨喋呤及其代谢产物7-羟基甲氨喋呤浓度的LC-MS/MS法,并应用于骨肉瘤患者大剂量甲氨蝶呤化疗后的治疗药物监测,为临床合理用药提供依据.方法:以氨基蝶呤作为内标,血清样品经含内标甲醇沉淀蛋白处理.色谱柱为Agilent Zorbax Eclipse Plus C18;柱温35℃;流速0.4 mL· min-1;流动相为含0.1％甲酸的水溶液和含0.1％甲酸的乙腈溶液,梯度洗脱.质谱检测方式为电喷雾离子阱正离子模式,MRM扫描,监测甲氨蝶呤m/z 455.098→308.000,7-羟基甲氨喋呤m/z 471.187→324.100,氨基蝶呤m/z 441.198→294.100.结果:甲氨蝶呤浓度在2～1000 ng·mL-1 (r=0.9985),7-羟基甲氨蝶呤浓度在20～10000 ng·mL-1(r=0.9984)与峰面积线性关系良好.甲氨蝶呤、7-羟基甲氨蝶呤日内及日间RSD≤6.21％.甲氨蝶呤、7-羟基甲氨蝶呤的平均回收率分别为102.83％～119.34％、88.41％～95.37％.结论:本方法简便、准确、快速,适用于甲氨喋呤及其代谢产物7-羟基甲氨喋呤的血药浓度测定.     

多学科参与的1例大剂量甲氨蝶呤排泄延迟骨肉瘤患者的药学监护

目的通过大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)治疗骨肉瘤时出现排泄延迟的个体化治疗实践,探讨HD-MTX治疗骨肉瘤排泄延迟解救的个体化治疗。方法临床药师通过基因检测预测MTX给药方案、排泄延迟及不良反应风险,多学科联合协同进行HD-MTX化疗的骨肉瘤患者进行药学监护。通过监测MTX血药浓度指导亚叶酸钙解救,针对导致MTX排泄延迟的原因(药物相互作用、尿液pH、尿液量等),采取应对措施。结果患者进行HD-MTX化疗过程中出现排泄延迟及急性肾损伤(AKI),可能与患者水化量、基因型等因素相关。结论骨肉瘤患者行HD-MTX化疗前应进行基因检测,医生根据基因型制定个体化治疗方案,并在化疗过程中及时监测MTX血药浓度、肝肾功能及影响MTX排泄的因素。对MTX排泄延迟患者实施个体化解救,在保持化疗效果的同时避免MTX毒性蓄积,可为同类患者的MTX个体化治疗提供借鉴。     

一例儿童骨肉瘤患者截肢术后镇痛治疗的药学监护

目的 探讨临床药师在儿童患者术后镇痛治疗过程的药学监护作用.方法 临床药师对一例儿童骨肉瘤患者截肢术后进行药学监护,为临床制定多模式镇痛治疗方案提供建议.结果 临床药师协助骨科医生合理使用围术期镇痛药物和儿童截肢术后幻肢痛的用药,同时,及时发现患儿不良情绪,对患儿进行心理安抚,患儿疼痛评分显著下降,顺利出院.结论 临床药师参与术后镇痛方案的制定,提供药学监护,优化镇痛治疗方案,体现药师价值.     

焦磷酸测序法在幽门螺杆菌克拉霉素耐药基因检测及药物疗效评价中的应用

目的本研究建立了幽门螺杆菌(Hp)克拉霉素耐药基因检测的焦磷酸测序方法,在获知耐药情况的同时根据半定量结果初步评估治疗效果。方法通过考察最合适的扩增引物、体系、退火温度建立最优的PCR扩增体系。分别对方法的灵敏度,特异性及一致性进行了评价。通过对44例临床标本的检测,比较本方法与快速尿素酶试验和13 C呼气试验的检出率。结果最优的PCR扩增体系为HiFi体系,最佳退火温度为59.8℃。本方法特异性良好,灵敏度达到100 copies/μL,与Sanger测序结果100.0%一致。36例标本快速尿素酶和焦测序法的检出率分别为48.7%和81.1%,耐药率为10.81%。8例标本13 C呼气试验和焦测序法的检出率分别为75.0%和87.5%,阳性标本检出一致率为100.0%。结论焦测序检测方法具备灵敏度高、快速、半定量的特点,为临床Hp克拉霉素耐药检测及初步疗效评价提供了一种新的方法。     

1例骨肉瘤患者大剂量甲氨蝶呤化疗致肝功能损伤的药学监护

临床药师参与1例骨肉瘤患者大剂量甲氨蝶呤化疗导致严重肝功能损伤治疗,借助治疗药物监测及个体化用药相关基因检测技术,对化疗方案和肝损伤原因进行分析,协助制定护肝治疗方案并对后续化疗方案进行优化。通过临床药师的介入,患者的肝功能逐渐恢复正常,下一周期化疗顺利按时进行。临床药师基于个体化用药技术,积极参与骨肉瘤患者的临床治疗,有助于提高抗肿瘤药物治疗的安全性及有效性。