红景天苷衍生物的合成及其抗疲劳活性研究

目的 设计并合成系列4-取代的新型红景天苷衍生物并研究其抗疲劳作用。方法 通过五乙酰基葡萄糖与不同的4-取代苄基酪醇,经过糖苷化、脱乙酰基合成红景天苷衍生物;采用小鼠负重游泳为实验模型,通过观察测定小鼠的负重游泳时间研究合成衍生物的抗疲劳作用。结果 合成了10个新型红景天苷衍生物;小鼠负重游泳实验显示：阳性对照组（红景天苷）和3a-1组（苯乙基-β-D-葡萄糖苷）的小鼠游泳时间明显高于空白对照组（P<0.05）,差异有统计学意义;其余组均与空白对照组小鼠负重游泳时间相近,差异无统计学意义。结论 本实验设计的红景天苷衍生物合成方法简便、可行;红景天苷及其衍生物苯环上的4位羟基可能与其抗疲劳活性密切相关。     

HPLC测定粉葛饮片中3种黄酮类成分的含量

目的:建立HPLC同时测定粉葛饮片中葛根素、大豆苷元-8-C-芹菜糖-(1→6)葡萄糖苷和大豆苷3种黄酮类成分含量的方法。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.02%磷酸(25∶75)为流动相,检测波长250 nm。结果:精密度、稳定性和重复性合格,3个成分的线性范围分别为0.123～0.737,0.024 9～0.150,0.021 7～0.130μg,3个成分的平均回收率分别为99.4%,99.0%,99.1%,测定了4批粉葛饮片中3个成分的含量。结论:该方法简便、快速、准确度高,可为粉葛饮片的质量控制提供参考依据。     

2-(3,4-二甲氧基苯基)-4-氧代-4H-色烯-3-基乙酸酯的晶体结构及旋光性

目的 探讨具有降血脂作用的黄酮醇衍生物2-（3,4-二甲氧基苯基）-4-氧代-4H-色烯-3-基乙酸酯（4）晶体结构及旋光性。方法 采用X射线单晶衍射技术获得绝对构型及SGW^®-1自动旋光仪测定化合物旋光性。结果 X射线单晶衍射表明化合物4属于正交晶系,P2₁2₁2₁空间群,晶胞参数a=7.763（2）Å,b=13.930（4）Å,c=14.906（4）Å,α=β=γ=90.00°,V=1 611.91（8）ų,Z=8;该晶态下分子间不存在氢键联系,分子以范德华力维系其在空间的稳定排列。从单晶数据可以看出,化合物4中二甲氧基取代的苯环相对于4H-色烯骨架有33.9（2）°扭转,推测可能存在旋光性;进一步的旋光实验结果证明该化合物具有左旋光性,比旋光度为[α]_D^19.1=-5.077°。结论 从单晶结果可知,由于化合物4中,二甲氧基取代的苯环相对于4H-色烯骨架有33.9（2）°扭转,形成手性,化合物具有旋光性。这类非黄酮苷类黄酮具有旋光性,未曾见报道。     

顺铂联合DC疫苗对荷瘤小鼠抗肿瘤作用观察

目的:观察顺铂联合DC疫苗对荷瘤小鼠抗肿瘤作用。方法:用终浓度20μg/ml的顺铂处理体外培养的小鼠黑色素瘤B16或B16-hsp70L1细胞,24小时后,Western blot方法观察HMGB1、hsp70蛋白表达;用顺铂处理的B16或B16-hsp70L1细胞裂解液负载DC,LPS诱导成熟,流式细胞仪分析DCs表面MHCⅠ、ICAM-1、CD86的表达。制备荷瘤小鼠模型,给荷瘤小鼠经腹腔注射顺铂(100μg/只),瘤内注射DC疫苗(3×106/只),观察肿瘤生长曲线、荷瘤小鼠脾脏中肿瘤抗原特异性CD8+T淋巴细胞IFN-γ的分泌及CTL活性。结果:顺铂显著促进B16或B16-hsp70L1细胞HMGB1的表达,对hsp70蛋白表达影响不明显;顺铂处理的B16或B16-hsp70L1细胞裂解液负载DC后,MHCⅠ、ICAM-1及CD86表达率分别为41%、39%、42%和47%、41%、42%;顺铂联合DC疫苗不仅显著抑制荷瘤小鼠肿瘤增殖(P0.05),对荷瘤小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞IFN-γ的分泌及CTL活性也有明显的提高。结论:顺铂处理的B16细胞裂解液可诱导DC活化;联合DC疫苗后不仅显著抑制荷瘤小鼠肿瘤生长,对肿瘤特异性免疫应答也具有一定的促进作用。     

Hsp70L1增强肿瘤细胞疫苗免疫原性的研究

目的:考察Hsp70L1对肿瘤细胞免疫原性的增强作用。方法:用RT-PCR的方法,从小鼠黑色素瘤B16细胞和C57BL/6小鼠脾脏中获得TRP2153-243及Hsp70L1基因。分别插入pcDNA3.1/V5-His真核表达载体,构建pHSP70L1、pTRP和pTRP2-Hsp3种表达载体。分别转染B16肿瘤细胞并制备坏死或凋亡瘤苗,免疫C57BL/6小鼠后移植B16肿瘤细胞,观察肿瘤生长曲线,采用流式细胞术(FCM)或微量细胞毒的方法检测荷瘤小鼠细胞因子INF-γ和CTL活性。结果:将经过HSP70L1、TRP2及TRP2-HSP基因修饰的坏死或凋亡的B16肿瘤细胞免疫正常小鼠后,观察到Hsp70L1及TRP2-Hsp基因修饰的坏死瘤苗可显著抑制荷瘤鼠肿瘤的生长,并显著促进荷瘤鼠脾脏淋巴细胞CTL活性和IFN-γ产生(P0.05,P0.01);HSP70L1免疫刺激作用在坏死瘤苗中更明显。结论:Hsp70L1可明显提高B16瘤苗的免疫原性,且对坏死细胞瘤苗的作用更显著。