抗癌胚抗原单克隆抗体的产生及其在酶联免疫吸附试验中的应用

癌胚抗原(CEA)属于NCA(无特异交叉反应抗原),NCA_2和BGP_1(胆汁糖蛋白)之类复杂的糖蛋白家族。这四类分子在抗原性上有相互关系且共有许多抗原决定簇。用纯化的CEA免疫小鼠、取其脾细胞与S_P2/0骨髓瘤细胞融合,可获得16种抗CEA的单克隆抗体。这些抗体对CEA的亲和力不同(10~8M~(-1)到10~(-1))。在斑点试验中,根据与其它相关抗原     

抗HSV单克隆抗体治疗兔单疱角膜炎的研究

应用5种抗HSV的McAb混合制剂对兔单疱角膜炎进行治疗实验。结果表明McAb有明显治疗作用,不但角膜病变程度轻,发展为角膜实质炎及虹膜炎的眼数也较少。两次实验结果相比说明McAb效价高,同时提高浓度改为眼膏剂型,每日治疗时间延长等均可提高治疗作用,与治疗HSK最有效的ACV无显著差异,是一种治疗HSK很有希望的制剂。     

抗原捕获聚合酶链反应分型检测妇女生殖器单纯疱疹病毒

目的 :　建立直接分型检测妇女生殖器单纯疱疹病毒 (HSV)的抗原捕获聚合酶链反应 (AC -PCR)。方法 :　用抗HSV型共同性糖蛋白单克隆抗体 ,包被聚苯乙烯离心管 ,捕获HSV ,同时加入 3个引物 :HSV - 1 HSV - 2型共同性上游引物及HSV - 1和HSV - 2型特异性下游引物 ,进行PCR扩增。结果 :HSV - 1和HSV - 2标准病毒株均分别扩增出与设计大小相符的 4 77bp和 399bpDNA条带。AC -PCR可检测到 10PFUHSV - 1和 1PFUHSV - 2。用AC -PCR检测了 36 5份妇女生殖器拭子标本 ,阳性 10 1例(2 7.7% ) ,2 3例为HSV - 1(占 2 2 .8% ) ,78例为HSV - 2 (占 77.2 % ) ;其中 112份标本同时用AC -PCR和分离培养法检测 ,AC -PCR的阳性率为 2 6 .8% (30 112 ) ,分离培养法的阳性率为 2 0 .5 % (2 3 112 ) ,两者差异有显著性 (χ2 =4 .5 ,P <0 .0 5 )。结论 :　AC -PCR是特异、敏感、快速分型检测妇女生殖器HSV感染的方法     

抗HSV－糖蛋白（gp30）单克隆抗体重链可变区基因的克隆及序列分析

目的：获得鼠抗ＨＳＶ－２型特异性糖蛋白（ｇｐ３０）单抗重链可变区基因，为基因工程改建及表达奠定基础。方法：从分泌高中和活性的鼠抗ＨＳＶ－２型特异性单抗杂交瘤细胞系中提取ＲＮＡ，逆转录成ｃＤＮＡ，用ＰＣＲ法扩增出抗体重链可变区基因，并克隆入质粒，随机挑选阳性克隆进行核酸序列分析．结果：基因全长３５７ｂｐ，编码１１９个氨基酸，含有维持抗体结构的半胱氨酸，序列内无终止码．结论：所克隆基因具备小鼠抗体重链可变区基因结构特征，与已确认的小鼠抗体ＶＨ基因有较高的同源性，隶属于Ｋａｂａｔ分类体系中的小鼠抗体重链（Ａ）亚组．     

单纯疱疹病毒I型胸苷激酶基因的扩增,克隆和测序

目的：对单纯疱疹Ｉ型胸苷激酶基因扩增，克隆和测序。方法：从单纯疱疹病毒Ｉ型（ＨＳＶ－１）１７ｓｙｎ株感染的ＢＨＫ２１细胞上清液中提取ＨＳＶ－１基因组ＤＮＡ，以此为模板，用ＰＣＲ方法扩增胸苷激酶（ＴＫ），将扩增的片段克隆入载体ｐＵＣ１８中，并进行测序。结果：除终止码外，ＨＳＶ－１ＴＫ基因全部编码区１１８２ｂｐ，编码３７６个氨基酸，其中含１２个蛋氨酸，４个半胱氨酸，ＴＫ的第３７６个氨基酸，其中含１２个     

聚合酶链反应（PCR）对单纯疱疹病毒性脑炎的临床诊断价值

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测技术对１１８例颅内感染性疾病患者及３７例无神神经系统疾病患者脑脊液（ＣＳＦ）中的单纯疱疹病毒ＤＮＡ（ＨＳＶ－ＤＮＡ）进行了检测及分型。结果提示：“散发性脑炎”组的阳性率为３８．４６％（２０／５２），细菌、真菌性脑膜炎、其它病毒性脑炎组以及无神经系统疾病组均为阴性。作者认为：①本检测是目前单纯疹病毒性脑炎（ＨＳＥ）较为简便而准确的早期诊断方法之一；②ＨＳＶ分型检测，对病原诊断更具有全面性；③两型单纯疱疹病毒均可引起ＨＳＥ。     

基因工程单链抗体的研究进展

抗体的ＶＨ基因的ＶＬ基因经寡核苷酸接头连接成ＳｃＦｙ基因，转入原核或真核表达系统中表达，表达产物具有与亲本抗体相同的抗原结合特性和能力。在ＳｃＦｖ基因的ＶＬＣ端连连接柔曲的铰链和易形成螺旋束或卷曲螺旋结构的寡核苷酸，表达产物能在活细胞内折叠成具有活性的双价ＳｃＦｖ。ＳｃＦｖ是研究蛋白质结构与功能最理想的实验系统，本文拟就有关问题作一综述。     

单克隆抗体间接荧光法分型检测单纯疱疹病毒的实验研究

本文选择３株抗单纯疱疹病毒型共同性和型特异性单克隆抗体，建立了分型检测单纯疱疹病毒的单克隆抗体间接荧光法（ＭｃＡｂ－１ＦＡ）．特异性试验和重复性试验证实，ＭｃＡｂ－ＩＦＡ特异性强、重复性好．用此法检测了不同部位来源的５１份临床分离株，分型检测结果与ＥＬＩＳＡ法检测结果一致．提示ＭｃＡｂ－ＩＦＡ有可能成为实验室分型检测单纯疱疹病毒可靠的方法．     

抗肿瘤基因工程单链抗体及其免疫霉素的研究

抗体V_H基因和V_L基因经寡核苷酸接头连接成ScFv基因,转入原核或真核表达系统中表达ScFv.ScFv具有亲本抗体相同的抗原结合特性和能力,且抗原性大大减弱.ScFv分子量小,易穿入肿瘤和实体组织内部, 也易进入病毒峡谷.ScFv与药物、毒素、同位素或酶等偶联构成的导向治疗制剂在血中清除迅速,不残留于正常组织,尤其不在肾脏中积聚,因而毒副作用很小.PCR技术的应用,使制备单链兔疫毒素在二周内即可实现,大大缩短了导向药物的制备时间.改善培养条件,E.coli能表达并装配和折叠成具有生物活性的双价ScFv及其免疫毒素.