影响记忆的因素及中药干预研究概述

记忆的基础是各脑区协调作用并构成神经回路。文章就基因遗传、环境刺激、营养状况和微量元素等影响记忆的因素及中药抗氧化、改善代谢和保护神经元等作用进行概述。     

雾化吸入法在临床中应用的研究进展

雾化吸入是利用雾化器将药物制成微小雾粒,使之吸入呼吸道,以达到消炎、祛痰、平喘等作用的给药方式,具有吸收面积大,起效迅速,不良反应少等优点,已成为治疗呼吸系统疾病最安全、有效的给药方法之一。雾化吸入治疗呼吸系统疾病在临床上已应用多年且成效显著。近年来有大量研究表明,雾化吸入治疗一些非呼吸系统疾病也有不错的疗效,而且不同雾化方式治疗相同疾病时产生的效果有较大的差异。故本文就雾化吸入器的种类、不同雾化方式的效果差异、雾化吸入治疗疾病的类别以及中药制剂的雾化吸入等方面加以综述,为完善中药雾化吸入剂的评价体系和制定临床雾化吸入操作标准提供一定的依据与参考。     

地龙抗大鼠大脑局灶性脑缺血诱导的凋亡研究

目的：观察地龙水提取物对大鼠大脑中动脉缺血再灌注诱导凋亡的影响.方法：大鼠灌胃地龙水提取物（相当生药量1.4 g/kg） 14 d后经大脑局灶性脑缺血再灌注损伤造模,运用HE组织染色、Caspase-3免疫组化染色、Hoechst 33342荧光染色及DNA琼脂糖电泳进行观察.结果：地龙水提取液能有效地减轻缺血再灌注损伤导致的大脑皮层水肿、充血,改善神经元的正常形态结构;地龙水提取液能显著地降低大脑皮层损伤后的caspase-3蛋白表达,降低神经元凋亡.结论：地龙水提取液有良好地抗大鼠大脑缺血再灌注诱导的神经元凋亡作用.     

黄精丸对D-半乳糖和冈田酸所致学习记忆障碍小鼠海马Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响

目的 探讨黄精丸对D-半乳糖和冈田酸所致学习记忆障碍造模的阿尔茨海默病（AD）小鼠海马Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路相关蛋白表达的影响,探讨其相关的作用机制。方法 采用小鼠颈背部皮下注射1.0% D-半乳糖液（0.14 g·kg^-1·d^-1,连续4周）后,再右侧脑室一次性注射冈田酸2 μL（75 ng）,制作小鼠AD模型,经Morris水迷宫检测挑选造模成功的AD小鼠,再随机分为AD模型组,美金刚组（1.3×10^-3 g·kg^-1·d^-1）,黄精丸组（2.5 g·kg^-1·d^-1）,另设假手术组和正常组;同时点给假手术组的小鼠右侧脑室一次性注射生理盐水2 μL处置作造模对照。造模2周后给两实验药物组小鼠灌胃相应剂量的试验药物,持续4周;另外,AD造模2周后,同时给假手术组及AD模型组小鼠每天灌胃等量生理盐水,持续4周;正常组小鼠无特殊处理。灌胃结束后,采用穿梭实验检测各组小鼠学习、记忆水平的区别;免疫组化检测各组小鼠海马CA1区β-catenin及糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）阳性神经元数量改变;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测各组小鼠海马GSK-3β,β-catenin,细胞周期蛋白D₁（CyclinD₁） mRNA表达差异;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组小鼠海马总GSK-3β（t-GSK-3β）,Ser9位磷酸化GSK-3β（p-Ser9-GSK-3β）,Tyr216位磷酸化GSK-3β（p-Tyr216-GSK-3β）,总β-catenin（t-β-catenin）,磷酸化β-catenin（p-β-catenin）和CyclinD₁蛋白表达变化。结果 与正常组比较,AD模型组小鼠痴呆症状较明显,学习与记忆成绩明显降低,海马CA1区β-catenin免疫阳性神经元数量、海马t-β-catenin与CyclinD₁ mRNA及蛋白表达水平,p-Ser9-GSK-3β蛋白水平,p-Ser9-GSK-3β/t-GSK-3β及p-Tyr216-GSK-3β/t-GSK-3β值显著降低（P<0.01）,海马CA1区GSK-3β免疫阳性神经元数量、海马t-GSK-3β mRNA及蛋白表达水平,p-Tyr216-GSK-3β及p-β-catenin蛋白水平,p-β-catenin/t-β-catenin值均显著升高（P<0.01）。与AD模型组比较,黄精丸组小鼠痴呆症状显著改善,学习与记忆成绩明显提高,海马CA1区β-catenin免疫阳性神经元数量、海马t-β-catenin,CyclinD₁ mRNA及蛋白表达水平,p-Ser9-GSK-3β蛋白水平,p-Ser9-GSK-3β/t-GSK-3β值均显著升高（P<0.01）,海马CA1区GSK-3β免疫阳性神经元数量、海马t-GSK-3β的mRNA及蛋白表达水平,p-Tyr216-GSK-3β及p-β-catenin蛋白水平,p-β-catenin/t-β-catenin值均显著下降（P<0.01）,但p-Tyr216-GSK-3β/t-GSK-3β值无明显统计学差异。结论 黄精丸可下调AD小鼠海马t-GSK-3β表达并降低其蛋白活性,上调t-β-catenin表达并增加其蛋白活性,进而使下游CyclinD₁表达增强,促进目的基因转录,发挥治疗AD作用,其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。     

牛珀至宝丹对老年大鼠脑TGF-β1表达和NPCs增殖的影响

目的:探讨牛珀至宝丹对老年记忆减退大鼠学习记忆能力及脑TGF-β1表达和NPCs增殖的影响。方法:以成年大鼠平均逃避潜伏期的均值加两倍标准差和加一倍标准差为参照标准,将老年大鼠随机分为记忆正常组、记忆减退组、牛珀小剂量组及牛珀大剂量组。牛珀至宝丹0.05g/kg、0.1g/kg连续给药15d后,BrdU标记处于增殖状态的NPCs,Morris水迷宫进行学习记忆能力检测,免疫组化检测鼠脑尾壳核、皮质区TGF-β1表达及SVZ、DG部位BrdU阳性细胞数。结果:定位航行实验第4～5d,牛珀大剂量组大鼠平均潜伏期明显缩短,与记忆减退组比较,有显著性差异(P0.05);空间探索实验,牛珀大剂量组大鼠第Ⅱ象限停留时间、第一次平台穿越时间、穿越平台次数与记忆减退组比较,有显著性差异(P0.05);牛珀大剂量组大鼠脑尾壳核及皮质区TGF-β1蛋白表达明显增多,SVZ及DG部位BrdU阳性细胞数明显增加,与记忆减退组比较,有显著性差异(P0.05)。结论:牛珀至宝丹对老年记忆减退大鼠学习记忆能力有明显促进作用,能显著促进内源性NPCs的增殖,其机理可能与牛珀至宝丹增强TGF-β1蛋白在大鼠脑内的表达有关。     

六味地黄丸对老年大鼠行为学的影响及对海马CA1区、CA3区和S1Tr神经元的保护作用

目的 观察六味地黄丸对老年大鼠行为学的影响及对海马CA1区、CA3区和S1Tr神经元的保护作用.方法 将清洁级雄性SD大鼠分为青年对照组(3月龄)、老年对照组(24月龄)和老年用药组(24月龄),通过Morris水迷宫实验,观察其行为学变化,并通过尼氏染色光镜检测,观察大鼠海马CA1区、CA3区及大脑皮质初级躯体感觉皮质区(S1Tr)脑组织细胞数量变化.结果 老年用药组平均逃避潜伏期自第三天起较老年对照组明显缩短,有极显著性差异(P＜0.01).老年用药组锥体细胞轮廓清晰,形态完整,细胞排列紧密,可见少许突起,其细胞数量明显增多,与老年对照组相比,有极显著性差异(P＜0.01).结论 六味地黄丸可以改善自然衰老大鼠空间学习记忆能力,机制可能与其保护海马CA1区、CA3区及S1Tr神经元有关.     

六味地黄丸对老年大鼠学习记忆及基底前脑ChAT阳性神经元的影响

目的:观察六味地黄丸对老年大鼠学习记忆及基底前脑乙酰胆碱转移酶(ChAT)阳性神经元的影响.方法:将清洁级雄性SD大鼠分为青年对照组(3月龄)、老年对照组(24月龄)和老年用药组(24月龄),通过Morris水迷宫实验,比较其学习记忆能力,并运用免疫组织化学方法,检测基底前脑ChAT阳性神经元变化.结果:老年用药组平均逃避潜伏期自第3d起较老年对照组明显缩短,有极显著性差异(P＜0.01).老年用药组基底前脑ChAT阳性细胞数目与老年对照组相比,MSN内有显著性差异(P＜0.05);NBM内有极显著性差异(P＜0.01);VDB内两组之间无明显差异.结论:六味地黄丸可以改善自然衰老大鼠的空间学习记忆能力,机制可能与其保护基底前脑ChAT阳性神经元,增强中枢胆碱能系统功能有关.     

中医院校人体解剖学教学方案设计初探

教学方案设计是教师上课前对课程教学工作的总体设计,基于《正常人体解剖学》课程及中医院校学生的特点,提出教学方案的设计理念——以学生为本、以教材为纲、以创新为方、以效果为准,通过精心构思和巧妙编排,以求在实际教学中取得好的教学效果。     

黄精丸抑制D-半乳糖和冈田酸所致学习记忆障碍小鼠海马神经元tau蛋白过磷酸化的作用机制

目的 探讨黄精丸对D-半乳糖和冈田酸所致学习记忆障碍造模的阿尔茨海默病（AD）小鼠大脑海马神经元糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）,蛋白磷酸酶2A（PP2A）活性的影响及其抑制tau蛋白过磷酸化机制。方法 采用小鼠颈背部皮下注射1.0% D-半乳糖液（0.14 g·kg^-1·d^-1,连续4周）后,再右侧脑室一次性注射（75 ng）冈田酸2 μL,制作小鼠AD模型,经Morris水迷宫检测挑选造模成功的AD小鼠,再随机分为AD模型组,美金刚组（1.3×10^-3 g·kg^-1·d^-1）,黄精丸组（2.5 g·kg^-1·d^-1）,另设假手术组和正常组;同时点给假手术组的小鼠右侧脑室一次性注射生理盐水2 μL处置作造模对照。造模2周后给两实验药物组小鼠灌胃相应剂量实验药物,持续4周。另外,AD造模2周后,同时给假手术组及AD模型组小鼠每天灌胃等量生理盐水,持续4周;正常组小鼠仅日常饲养。灌胃结束后,采用旷场实验及跳台实验评价各小鼠的探索活动能力、焦虑水平及学习记忆能力差异;尼氏染色检测各组小鼠海马CA1,CA3区神经元数量差异;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测各组小鼠海马GSK-3β,PP2A mRNA表达变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组小鼠海马GSK-3β,PP2A,磷酸化tau（p-tau）与总tau（t-tau）蛋白的表达变化。结果 与正常组比较,AD模型组小鼠自发活动能力与探索行为能力低、焦虑水平高,表现出较明显的痴呆状态,少动且易呆卧躲藏,学习反应时间要长,学习记忆错误次数明显增多,海马CA1与CA3区神经元数量均减少,PP2A mRNA及蛋白表达显著下降,GSK-3β mRNA及其蛋白表达,p-tau蛋白水平及p-tau/t-au值均显著升高（P<0.01）,t-tau蛋白表达水平有所降低但差异无统计学意义。与AD模型组比较,黄精丸组小鼠自发活动能力与探索行为能力强、焦虑水平低、学习与记忆成绩明显提高,海马CA1与CA3区神经元数量增多,PP2A mRNA及蛋白表达显著升高,GSK-3β mRNA及蛋白表达,p-tau蛋白水平及p-tau/t-tau值均显著降低（P<0.01）,但t-tau蛋白表达水平差异无统计学意义。结论 黄精丸可抑制AD小鼠海马神经元tau蛋白过磷酸化,恢复tau蛋白功能,保护海马神经,进而发挥抗AD作用,其机制可能与调控海马神经元GSK-3β与PP2A活性平衡有关。     

黄精地龙提取液对老年痴呆大鼠脑内烟碱型乙酰胆碱受体的影响

目的:探讨黄精地龙提取液(EPP)对老年痴呆大鼠脑内α3和α7烟碱型乙酰胆碱受体(α3,α7-nAChR)阳性神经元数量、蛋白及mRNA表达的影响。方法:SD大鼠40只,随机均分为正常组,模型组,脑复康(阳性药物,0.6 g·kg~(-1)·d~(-1))组,EPP(相当生药量4 g·kg~(-1)·d~(-1))组。给大鼠颈背部皮下注射1%D-半乳糖(5 m L·kg~(-1)·d~(-1),连续3周)后,腹腔注射东莨菪碱(2 mg·kg~(-1)·d~(-1),连续后2周)复制大鼠老年痴呆模型;造模1周后同时对脑复康组及EPP组大鼠每天灌胃给相应实验药物,正常组及模型组大鼠灌胃给生理盐水1 mL。实验结束,处死各组大鼠,取出脑组织,一半置于10%中性甲醛液浸泡固定待组织切片检查,另一半置于冰上匀浆,进行mRNA及蛋白提取;运用尼氏染色、免疫组化观察各大鼠大脑皮层第一躯体感觉区(S1Tr)和海马CA1与CA3区的阳性神经元数量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白质免疫印迹(Western blot)检测各大鼠大脑内的α3和α7-nAChR mRNA及蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠大脑S1Tr区和海马CA1及CA3区神经元数量显著减少,大脑内α3和α7-n AChR mRNA和蛋白表达水平均降低(P0.01);EPP能增加痴呆大鼠大脑S1Tr区和海马CA1及CA3区神经元数量,能升高痴呆大鼠大脑内α3和α7-n AChR mRNA和蛋白的表达水平,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:EPP能保护大脑认知学习记忆有关重要区的神经细胞,同时触发α3和α7-n AChR受体效应,提高中枢乙酰胆碱(ACh)含量,进而升高老年痴呆大鼠中枢胆碱能系统活性。