不同方法制备的富含血小板血浆裂解液对成人骨髓间充质干细胞增殖、成骨的影响

目的:用不同方法制备富含血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)裂解液,在不同体积分数下找到最适成人骨髓间充质干细胞(human bone marrow stromal cells,hBMSCs)体外增殖及其向成骨细胞分化的PRP裂解液制备方法。方法:抽取成人骨髓20mL,采用密度梯度离心法分离骨髓,贴壁培养法获得成人骨髓间充质干细胞;抽取静脉血80mL,分别用1次离心法、2次离心法和3次离心法制备PRP,进行血小板计数分析。-80℃冻存后,反复解冻、冻存至少3次以上获得PRP裂解液;将第2代细胞分别培养在体积分数为5%、10%、15%、20%的不同方法获得的PRP裂解液的培养液中,24、48、72、96h后检测细胞的增殖状况;将第2代细胞分别培养在体积分数为5%、10%、15%、20%的PRP裂解液和不加PRP裂解液的成骨细胞诱导液中,观察骨髓间充质干细胞的成骨表达以及PRP裂解液对其成骨矿化的影响。结果:各组PRP裂解液均促进hBMSCs增殖作用,差异有统计学意义(均P<0.01),各组细胞增殖在体积分数15%PRP裂解液组、72h时达到峰值,其中3次离心方法获得的细胞增殖最明显。Vonkossa’s染色观察细胞的成骨作用,各组成骨细胞数量随着PRP裂解液浓度上升而增多。3种方法获得的PRP裂解液都在培养液体积分数15%时获得的成骨细胞数量最多,其中第3种离心方法获得的矿化结节较第1种离心方法、第2种离心方法明显。结论:PRP裂解液对hBMSCs的体外增殖有促进作用,并且第3种离心法制备PRP裂解液对细胞成骨表达和成骨矿化作用最明显。     

中药外敷治疗四肢骨折疼痛患者的临床分析

目的探讨中药外敷治疗四肢骨折疼痛患者的临床疗效。方法选取我院收治的208位四肢骨折疼痛患者,随机分为对照组与观察组,各104例。对照组采取常规的皮肤消毒清理,且口服止痛药。观察组则在进行常规的皮肤消毒清理后在患处外敷中药金黄散进行止痛,对比观察一周后两组患者的止痛效果。结果观察组的VAS疼痛评分以及不良反应发生率均显著低于对照组(P0.05)。结论中药外敷治疗四肢骨折疼痛患者具有良好的止痛效果,且不良反应的发生率更低,更为安全可靠。     

局部注射血小板源性生长因子对大鼠跟腱末端病组织结构的影响

目的:观察血小板源性生长因子对末端病末端组织结构的影响,为血小板源性生长因子治疗末端病提供实验基础和理论依据.方法:对筛选后的大鼠随机分成3组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)组,其中Ⅰ组为血小板源性生长因子注射组,Ⅱ组为生理盐水注射组,Ⅲ组为对照组.将Ⅰ、Ⅱ组大鼠放入电刺激跳跃造模装置里,通交流电4次·min-1,通电电压由小逐步加大,直到大鼠出现有效跳跃为止,共持续20 min,休息10 min,再持续20 min.每天训练1次,每周6次,周日休息,持续4周.实验过程中常规纯鼠料喂养.每周分别对血小板源性生长因子组和生理盐水组大鼠跟腱部位注射0.2 mL血小板源性生长因子和生理盐水,其注射时间均为大鼠休息日,对照组不做任何处理,造模4周后处死大鼠,进行取材,组织切片制作,HE染色.显微镜下观察每个样本跟腱末端、纤维软骨区、跟骨区、腱骨界面、腱围共5个区域病理变化.结果:血小板源性生长因子注射组大鼠跟腱末端区发生了轻微的病理性变化.生理盐水注射组大鼠跟腱末端区发生了明显的病理性变化.对照组大鼠跟腱末端区未发生明显的病理性变化.结论:注射血小板源性生长因子可以不同程度的有效地预防大鼠跟腱末端病的发生.     

陶瓷化骨对成人骨髓基质干细胞分化的影响

目的:观察陶瓷化骨时成人骨髓基质干细胞生长和分化的影响.方法:体外分离培养成人骨髓基质干细胞,将第二代细胞以陶瓷化骨为载体进行培养,利用倒置显微镜、碱性磷酸酶细胞化学染色、碱性磷酸酶活性检测等条件,了解陶瓷化骨对成人骨髓基质干细胞生物学行为的影响.结果:体外连续培养6d,倒置显微镜下可见成人骨髓基质干细胞与陶瓷化骨相容性好,材料周边细胞生长密集,并有向陶瓷化骨趋化迁移现象,3周后形成矿化结节.碱性磷酸酶染色呈阳性、碱性磷酸酶活性检测有明显的细胞分泌量.结论:体外培养条件下,陶瓷化骨可诱导成人骨髓基质干细胞向成骨和骨质细胞分化.     

富含血小板血清裂解液治疗皮肤缺损32例

目的:观察富含血小板血清裂解液治疗皮肤缺损的临床疗效。方法:2010年12月至2011年12月,采用富含血小板血清裂解液治疗皮肤缺损患者32例,男23例,女9例。年龄18～54岁,中位数37.5岁。缺损部位:手部皮肤缺损5例,缺损面积1.5 cm×1.5 cm至4 cm×3 cm;脚部皮肤缺损8例,缺损面积2.5 cm×1.0 cm至6 cm×4.5 cm;上肢皮肤缺损7例,缺损面积3.5 cm×2.5 cm至8 cm×7.5 cm;下肢皮肤缺损12例,缺损面积6.5 cm×4.5 cm至10 cm×9.5 cm。新鲜性损伤24例,陈旧性损伤8例。所有患者均做细菌培养,其中1种细菌生长者6例,2种细菌生长者2例;金黄色葡萄球菌3例,大肠杆菌3例,绿脓杆菌2例,变形杆菌2例。术后随访观察伤口愈合情况及并发症发生情况。结果:所有患者均获得随访,随访时间0.8～2个月,中位数1.3个月。伤口均愈合,无感染等并发症发生。15例在喷洒富含血小板血清裂解液10 d左右时伤口处长出新的皮肤,13例在喷洒富含血小板血清裂解液20 d左右时伤口处长出新的皮肤,4例在喷洒富含血小板血清裂解液30 d左右时伤口处长出新的皮肤。结论:采用富含血小板血清裂解液治疗皮肤缺损,效果良好,值得进一步深入研究和推广应用。     

奥美拉唑对多潘立酮在大鼠体内药动学的影响

 目的 研究奥美拉唑对多潘立酮在大鼠体内药动学的影响。方法 10只健康雄性Wistar大鼠随机分成2组（分别为单独和联合给药组,用LC-MS/MS测定血浆中多潘立酮的浓度。结果 单独用药与联合用药组t_max分别为（0.80±0.11, （1.20±0.45 h, ρ_max分别为（103.0±26.6,（72.6±9.23 μg·L-1,均具有显著性差异(P<0.05,其他药动学参数无显著性差异(P>0.05。结论 联合用药后奥美拉唑延缓了多潘立酮的吸收速度。