实时荧光定量PCR方法在布鲁氏菌病诊断中应用

目的:评价实时荧光定量PCR法在布鲁菌病中的诊断价值。方法:对296例确诊的布鲁菌病患者和30例健康对照者的血液标本进行SAT、RT-PCR、BC法检测,对急性布鲁菌病组和慢性布鲁菌病组观察并分析RT-PCR检测的性能以及与SAT、BC的符合程度。结果:RT-PCR法对急性期布病组敏感性为76.4%,与SAT、BC的kappa值分别为0.62、0.64,有较好的一致性;RT-PCR法对慢性期布病组其敏感性为27.5%,与SAT、BC的检测结果有很大差别,kappa值仅为0.09、0.08。结论:RT-PCR检测灵敏度介于SAT、BC之间。血清学试验仍然是布鲁氏菌筛查的最好的方法,RT-PCR法仅能作为布鲁菌病诊断的一个补充。     

液相色谱串联质谱法检测肝癌细胞N6- 甲基腺嘌呤核苷甲基化水平

目的 建立同时测定N⁶-甲基腺嘌呤核苷(m⁶A)和腺嘌呤核苷(A)的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),检测肝癌细胞m⁶A甲基化水平。方法 HepG₂和L₀₂细胞mRNA经分离、消化为核苷,再经含对乙酰氨基酚为内标的甲醇沉淀处理。色谱柱为Agilent Proshell 120 EC-C₁₈柱,流动相为0.1 g/dl甲酸水-甲醇(82:18),流速0.4 ml/min,柱温为30 ℃。质谱检测模式为多反应监测(DMRM)模式,测定m⁶A和A的浓度,计算细胞m⁶A甲基化水平。 结果 建立的LC-MS/MS法检测m⁶A和A的浓度分别在0.15～50.00 ng/ml和1.50～500.00 ng/ml浓度范围内线性关系良好(r > 0.999),日内、日间精密度均小于15.00 %,准确度为93.67 %～101.10 %,回收率为91.46 %～97.60 %,基质效应为90.26 %～99.27 %,样品稳定性良好。HepG₂和L₀₂细胞m⁶A甲基化水平分别为(0.73 ± 0.11)%和(1.26 ± 0.22)%。结论 该方法准确、快速、稳定和灵敏,可用于检测肝癌细胞m⁶A甲基化水平。     

滇西边境山区某县县级医疗卫生机构应急能力建设现状分析

目的全面了解滇西边境山区某县医疗卫生机构应急能力建设现状,分析其存在的问题,为当地有关机构提升应急能力提供相应的对策建议。方法采用定量和定性相结合的方法,调查分析其应急能力现状,提出相应的对策建议。结果县医院、妇幼保健院、疾控中心等其它医疗卫生机构分别有53%、53.4%、50%的人认为所在医院重视应急能力建设,不同医疗卫生机构对应急能力建设的重视程度差异无统计学意义(P>0.05);县医院医疗卫生人员相较于妇幼保健院更认同"政府投入不足"是影响医疗卫生机构应急能力提升的根本原因(P<0.05);县医院医疗卫生人员相较于妇幼保健院和疾控中心等其他医疗卫生机构更认同"落实各种优惠和支援政策"是提升医疗卫生机构应急能力的根本途径(P<0.05)。结论该县应急能力建设相对较差,应急能力培训时间不长,全县医疗卫生机构约有1/4的人没有接受过应急能力相关培训,缺乏专业应急队伍,应急管理机制需健全。应进一步推进该县医疗卫生机构应急管理机制建设,完善硬件设施配置,加强应急能力相关培训,建立并落实中长期应急规划,全面提升医疗卫生机构应急能力建设水平。     

人髓核细胞诱导人尿源性干细胞向髓核样细胞分化作用的研究

【摘要】 目的：探讨人髓核细胞（NPCs）诱导对人尿源性干细胞（USCs）向髓核样细胞分化的作用。方法：手术时获取腰椎间盘突出症患者L4/5的髓核组织,并采用贴壁法体外分离培养NPCs;从健康成年人尿液中获取USCs并进行体外培养,通过倒置显微镜观察细胞形态,并采用成骨、成脂、成软骨三系诱导分化及蛋白免疫印迹技术（Western blot,WB）对所获取的USCs进行形态、分化潜能及细胞表面标志蛋白鉴定。使用Transwell小室将P3代NPCs与USCs培养以建立共培养体系,设实验组、对照组及NPCs组,实验组为NPCs与USCs共培养组,对照组为单独USCs培养,NPCs组为单独NPCs培养;培养14d后应用倒置显微镜观察细胞形态;应用定量实时聚合酶链反应（qRT-PCR）及WB分别检测实验组USCs、对照组USCs与NPCs组NPCs中蛋白多糖（ACAN）、SOX-9（SRY-related high mobility groupbox gene 9）、Ⅱ型胶原（COL2）及缺氧诱导因子1α（HIF-1α）的mRNA及蛋白的表达情况;免疫荧光染色观察3组 COL2A1及ACAN荧光表达。结果：培养的USCs成骨、成脂、成软骨三系分化实验结果均为阳性;USCs中干细胞阳性标志物CD29、CD44、CD73和CD90呈高表达,未检出干细胞阴性标志物CD34和CD45。培养14d后倒置显微镜下对照组及NPCs组细胞形态无变化,实验组USCs向髓核样细胞分化,形态变化明显。经共培养诱导14d后实验组及NPCs组中的ACAN、SOX-9、COL2A1及HIF-1α基因mRNA及蛋白表达均显著高于对照组（P<0.05）,ACAN及COL2A1荧光强度明显高于对照组;实验组上述各种mRNA及蛋白表达与NPCs组比较均无统计学差异（P＞0.05）,实验组荧光强度与NPCs组比较无明显差异。结论：在体外实验中,人NPCs可通过共培养的方式诱导人USCs分化为髓核样细胞,可为椎间盘组织工程研究提供NPCs来源。     

超声对肝癌、肝硬化患者腹腔动脉的血流动力学探讨

目的探讨肝癌、肝硬化患者腹腔动脉的血流动力学改变。方法对190例正常人、94例肝硬化合并肝癌、87例肝硬化患者运用灰阶、彩色多普勒、脉冲多普勒超声检查腹腔动脉内径、最高流速、最低流速、平均流速、阻力指数和血流量。结果肝硬化患者腹腔动脉的血流量较正常人明显增加,肝硬化合并肝癌患者腹腔动脉的血流量较肝硬化患者高。结论腹腔动脉血流动力学的改变,可为诊断肝癌、肝硬化提供参考信息。     

一起农村中学风疹暴发的调查报告

20 0 2年 2月 2 7日至 3月 30日 ,济宁市任城区接庄镇南贯集中学发生多例发热、出疹病人 ,经流行病学、临床表现和实验室检查证实为一起风疹暴发 ,现报告如下。根据《全国麻疹监测方案》要求 ,对凡发热、出疹的疑似麻疹病人进行流行病学调查 ,并采集血标本进行血清学诊断 ,由山东省麻疹监测网络实验室济宁市卫生防疫站采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)捕捉法检测麻疹、风疹IgM抗体。风疹按《传染病诊断标准及处理原则》的要求判定。南贯集中学位于济宁市城区东南方向济邹公路约 1 5公里处 ,为镇办中学 ,学生来自附近 1 2个村 ,不寄宿。该学…     

以右侧胸腔积液及肺炎为主要表现的肝囊肿

1病例资料男,68岁。因反复咳嗽、发热数月,加重5天,门诊以“肺炎”收住院。查体:体温38·7°C,脉搏78/m in。右侧胸腔饱满,叩诊呈浊音,右下肺呼吸音消失,双肺可闻及少许干啰音。腹平软,无压痛,肝脏肋下两指触及,脾脏肋下未触及,双下肢无水肿。血白细胞14·5×109/L,中性粒细胞0·72,淋巴细胞0·27,嗜酸粒细胞0·01,红细胞沉降率10 mm/h,尿及粪常规、肝功能、肾功能、电解质均正常。X线胸片示:胸腔大量积液,右肺炎。B超检查示:肝脏内可见多个大小不等的液性暗区,最大100 mm×95 mm,位于肝脏膈面,内部透声不良,可见大量斑点状和片絮状稍强回…     

胸椎椎管狭窄症术后急性硬脊膜外血肿

目的探讨胸椎椎管狭窄症术后急性硬脊膜外血肿的成因、诊断、治疗及预防措施。方法回顾性分析2003年6月～2011年12月因胸椎椎管狭窄症给予后路全椎板减压手术的患者101例,其中术后经再次手术证实术区急性硬脊膜外血肿9例,对其临床表现与再次手术情况进行分析。结果 9例患者全部获得随访,随访时间为3～45个月,平均34个月。血肿清除前神经功能评分为0.89±0.78,血肿清除后的神经功能评分为2.33±1.22,与术前相比差异有统计学意义（t=4.91,P〈0.01）。硬膜外血肿压迫时间为（7.72±7.06）min,血肿清除后神经功能恢复率与血肿压迫时间呈负相关（r=-0.789 6,P〈0.01）。结论胸椎椎管狭窄症手术后急性硬膜外血肿应尽快手术减压,血肿清除越早,术后神经功能恢复越好。     

利用高效液相色谱法建立玉屏风总苷的指纹图谱

目的:以黄芪皂苷Ⅱ为参照峰,建立玉屏风总苷HPLC-ELSD的指纹图谱,对玉屏风总苷进行质量控制。方法:采用HPLC-ELSD法,色谱柱为Agilent C18(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈和0.1%甲酸为流动相进行梯度洗脱,柱温40℃,流速1.0ml·min-1,漂移管温度110℃,N2载气流速3.30 L·min-1。结果:建立了玉屏风总苷的HPLC-ELSD的指纹图谱,确定了17个共有峰,并鉴定了其中4个共有峰,各峰相对保留时间的RSD在0.1%~0.75%之间,相对峰面积的RSD在1.68%~4.82%之间。10批总苷样品的相似度均大于0.94。结论:该法简单、精密度、稳定性、重现性好,适用于玉屏风总苷的指纹图谱检测。     

离心力辅助硫酸氢氯吡格雷晶型I的制备及其稳定性(英文)

硫酸氢氯吡格雷的几个已报道的晶型中,相对于晶型II,晶型I的热稳定性较差,在高温高湿条件下会自发地转变为晶型I I,因而晶型I在生产中难以得到热稳定性好的产品。本文提出利用离心力辅助析晶的方法能生产出高纯度,稳定性好的晶型I产品。所得到的产品分别用粉末X射线衍射仪(PXRD),差示扫描热量仪(DSC)和扫描电镜显微镜(SEM)进行了表征。结果显示:离心力辅助析晶比用传统反溶剂析晶方法得到的晶型I结晶度有明显增加,晶粒生长得更大更完整。通过长期稳定性实验,证明新工艺所得到的产品具有较好的热稳定性,在高温高湿的环境下能长时间储存不变质。