重组人干扰素β-1a注射液制剂安全性研究

目的 检测重组人干扰素β-1a注射液的制剂安全性并探讨可能的影响因素。方法 分别以重组人干扰素β-1a注射液进行家兔肌肉和皮下刺激性试验、豚鼠主动全身过敏性试验、大鼠被动皮肤过敏性试验和体外溶血性试验,检测药物的局部刺激性、Ⅰ型过敏反应性和溶血作用。结果 pH 3.6的11、22 μg/kg重组人干扰素及其空白溶媒对家兔肌肉和皮肤黏膜具有轻度刺激作用,相应剂量下pH为4.3的重组干扰素及其空白溶媒对家兔组织无明显刺激作用;pH 3.5的5.5、22 μg/kg剂量下重组人干扰素及其空白溶媒对大鼠无被动致敏作用,对豚鼠主动致敏作用呈强阳性,辅料中不含人血清白蛋白的样品则对豚鼠无致敏作用;pH 3.5的重组人干扰素对家兔红细胞具有极轻度体外溶血作用,pH 4.5样品则无体外溶血和致红细胞凝聚作用。结论 pH值对重组人干扰素β-1a注射液刺激性和体外溶血性具有一定影响,应注意对其pH值的控制;干扰素对豚鼠致敏作用为辅料中人血清白蛋白所致,临床使用中对人产生致敏的可能性很小。重组人干扰素β-1a注射液制剂安全性较好。     

大蒜油拮抗2,5-己二酮对大鼠神经组织的氧化损伤的效果

目的 探讨大蒜油对2,5-己二酮(2,5-hexanedione,2,5-HD)导致的大鼠神经组织氧化损伤的拮抗作用和对周围运动神经毒性的影响.方法 Wistar雄性大鼠40只,随机分为正常对照组、模型组、人蒜油低、高剂量组,每组10只.模型组及大蒜油低、高剂量组分别给予2,5-HD 300ms/ks腹腔注射,正常对照组给予生理盐水,5次/周,持续6周.大蒜油低、高剂量组提前1周分别给予40和80mg/kg大蒜油灌胃,持续至实验结束.测定后肢撑力指数和平衡指数等神经行为学指标,实验结束取脑、脊髓和坐骨神经分别测定丙二醛(MDA)、还原型谷胱廿肽(CSH)含量、总抗氧化能力(T-AOC)和抑制羟自由基能力.结果 与第0周比较,后肢撑力指数第4周模型组升高44%,大蒜油低剂量组升高50%,大蒜油高剂量组升高49%,但3组间差异无统计学意义(P>0.05);第4周模型组平衡指数降低30%,大蒜油低剂量组降低45%,大蒜油高剂量组降低68%,与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01).大蒜油低、高剂基组大鼠在第4周即出现运动异常,较模型组人鼠提前1周;各组步态评分,模型组,大蒜油低、高剂量组均明显高于对照组,且大蒜油高剂量组高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05).在大脑、脊髓和坐骨神经中,与正常对照组相比,模型组人鼠MDA含量升高,抑制羟自由基能力降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,大蒜油低、高剂量组在各神经组织中MDA含量均明显降低,抑制羟自由基能力明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 大蒜油可拮抗2,5-HD所致的大鼠神经组织氧化损伤,但并末改善2,5-HD导致的周围运动神经损伤,提示氧化-抗氧化损伤不是2,5-HD中毒性神经病的主要机制.     

药物性肝损伤的生物标志物及其评价的研究进展

药物性肝损伤是伴随药物使用而出现的主要不良反应,是肝疾病的主要组成部分,目前血清天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶、碱性磷酸酶和总胆红素等传统标志物在药物性肝损伤的预测和诊断中的地位尚无可取代,但近年发现的血清药物-蛋白加合物、嗜酸性粒细胞、乳酸脱氢酶、谷氨酰胺脱氢酶及基因组学生物标志物等多种新的生物标志物对弥补传统生物标志物检测敏感性和特异性的作用也不可忽视。本文结合药物性肝损伤评价现状对传统生物标志物和近年发现的新的肝损伤生物标志物进行概述,为更好地预测和诊断肝损伤、减轻药物性危害提供可能的帮助。     

大蒜油与大蒜素对急性乙醇性肝损伤预防作用比较

目的 比较大蒜油和大蒜素对急性乙醇性肝损伤预防作用的效果.方法 提前4h给予一次大蒜油或大蒜素后,一次性给予体积分数50%的乙醇,16h后测定血清生化指标和肝脏脂质过氧化指标,肝脏组织苏丹Ⅲ染色观察组织病理学改变.结果 提前给予一次大蒜油、大蒜素均可以有效的预防4.8g/kg乙醇摄入引起的急性肝损伤.与对照组相比,中剂量大蒜油及大蒜素分别使肝匀浆中MDA含量下降了29.9%和25.1%,使血清中的TG降低了44.5%和40.2%.病理学检查表明,模型组有大量橙黄色脂滴蓄积,太蒜油低剂量和大蒜素组小鼠肝脏脂滴明显减少、变小,大蒜油中、高剂量组仅有个别小鼠肝脏切片可见少量脂滴.结论 提前给予一次大蒜油、大蒜素均可以有效的预防4.8g/kg乙醇摄入引起的急性肝损伤,且大蒜油作用效果优于单独应用大蒜素的作用效果.     

尿中肾损伤分子1水平升高对大鼠早期肾损伤的预测作用

目的评价尿中肾损伤分子1(KIM-1)对大鼠早期肾损伤的预测作用。方法制备顺铂、庆大霉素和环孢素诱导的大鼠肾损伤模型。顺铂模型大鼠于单次ip给药后第3,5,6和7天,庆大霉素模型于首次ip给药后第3,7,10和13天,环孢素模型于首次ig给药后第8,15,36和53天通过腹主动脉取血,分离血清。各组大鼠于处死前24 h收集尿液。用自动生化仪检测血清肌酐(SCr)和血尿素氮(BUN)及尿肌酐(UCr)水平,采用ELISA法检测尿KIM-1水平,HE染色进行肾脏组织病理学检查。结果与正常对照组相比,顺铂模型大鼠单次给药后第3天肾组织病理改变不明显,而尿KIM-1升高了4.7倍,SCr和BUN升高了0.3和0.7倍;第5和6天,KIM-1升高了10.0和8.7倍,SCr升高了1.9和3.3倍,BUN升高了3.0和5.1倍,第5天肾组织出现明显的病理改变;第7天,KIM-1水平升高了16.5倍,SCr和BUN水平略降,为正常对照组的1.2和3.0倍。庆大霉素模型大鼠,与正常对照组比较,于首次给药后第7天,SCr和BUN水平和肾组织未见明显改变,KIM-1水平升高了2.6倍;第10和13天,SCr水平升高了1.7和1.6倍,BUN升高了2.0和1.9倍,KIM-1升高了12.5和33.9倍,第10天肾组织出现明显的病理改变。环孢素模型大鼠,与正常对照组比较,在第8天,SCr和BUN水平和肾组织未见异常,KIM-1升高了正常对照组的0.6倍;第15,36和53天,KIM-1分别升高了1.7,4.3和9.3倍,SCr分别为1.0,1.0和1.2倍,BUN分别升高了0.4,0.6和1.2倍,肾组织在第53天时出现明显的病理改变。顺铂模型组SCr,BUN和KIM-1的受试者操作特性曲线的曲线下面积(AUC)分别为0.934,0.953和0.979,庆大霉素模型组SCr,BUN和KIM-1的AUC分别为0.877,0.713和0.932,环孢素模型组SCr,BUN和KIM-1的AUC分别为0.668,0.766和0.976。结论在顺铂、庆大霉素和环孢素诱导的肾损伤模型中,尿KIM-1可用于早期肾损伤的预测。     

肾损伤分子-1、丛生蛋白和胱抑素C对庆大霉素诱导的大鼠肾损伤早期预测的研究

目的应用庆大霉素(GM)诱导的大鼠亚急性肾损伤模型,研究一组新的生物标志物肾损伤分子-1(kidneyinjury molecule-1,Kim-1)、丛生蛋白(clusterin)和胱抑素C(cystatinC)在尿液中的变化,并与传统生物标志物血肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)进行比较,评价其对肾损伤的早期预测性。方法建立GM诱导的大鼠亚急性肾损伤动物模型,检测不同给药时间点模型组和对照组大鼠的SCr、BUN和尿Kim-1、clusterin与cystatinC水平,并进行肾组织病理学检查。结果在SCr、BUN和肾组织病理学未出现异常变化时,大鼠尿Kim-1、clusterin、cystatinC就表现出明显的升高,并随给药时间延长呈线性升高。在SCr、BUN和尿Kim-1、clusterin和cystatinC测定结果的ROC曲线中,尿Kim-1、clusterin和cystatinC的曲线下面积均大于0.9。结论尿Kim-1、clusterin和cystatinC在肾损伤中具有良好的敏感性和特异性,能够提高对药物诱导的肾损伤的早期预测能力。     

肾损伤分子-1、丛生蛋白和胱抑素C对庆大霉素诱导的大鼠肾损伤早期预测的研究

目的 应用庆大霉素（GM）诱导的大鼠亚急性肾损伤模型,研究一组新的生物标志物肾损伤分子-1（kidney injury molecule-1,Kim-1）、丛生蛋白（clusterin）和胱抑素C（cystatin C）在尿液中的变化,并与传统生物标志物血肌酐（SCr）和尿素氮（BUN）进行比较,评价其对肾损伤的早期预测性。方法 建立GM诱导的大鼠亚急性肾损伤动物模型,检测不同给药时间点模型组和对照组大鼠的SCr、BUN和尿Kim-1、clusterin与cystatin C水平,并进行肾组织病理学检查。结果 在SCr、BUN和肾组织病理学未出现异常变化时,大鼠尿Kim-1、clusterin、cystatin C就表现出明显的升高,并随给药时间延长呈线性升高。在SCr、BUN和尿Kim-1、clusterin和cystatin C测定结果的ROC曲线中,尿Kim-1、clusterin和cystatin C的曲线下面积均大于0.9。结论 尿Kim-1、clusterin和cystatin C在肾损伤中具有良好的敏感性和特异性,能够提高对药物诱导的肾损伤的早期预测能力。     

大蒜油对正己烷在小鼠体内代谢成2,5.己二酮的影响

目的 探讨大蒜油对正己烷(n-hexane)在小鼠体内代谢成2,5.己二酮(2,5.hexanedione,2,5-HD)的影响.方法 取健康成年昆明种小鼠,随机分为正己烷染毒组和大蒜油干预组,分别灌胃给予正己烷和大蒜油,染毒结束后取血,分离血清经乙酸乙酯萃取后气相色谱法测定血清中2,5-HD含量.结果 (1)一次性给予4000 mg/kg正己烷后,小鼠血清中2,5-HD含量随时间延长而增加,10 h后达峰值,20 h后几乎不能检出;(2)对照组小鼠血清中未检出2,5-HD;随着正己烷染毒量的增加,小鼠血清中2,5-HD含量明显增加,2000、4000和6000 mg/kg组染毒8 h后小鼠血清2,5-HD含量分别为8.04、16.68和22.38μg/ml,呈明显的剂量一效应关系;(3)不同周龄小鼠给予正己烷8 h后血清中2,5-HD含量有明显差异,5周龄组(22.83;μg/ml)分别大于4周(19.59μg/ml)和6周龄组(16.42μg/ml),差异有统计学意义(P<0.05);(4)不同性别小鼠给予同剂量正己烷后,雌性小鼠血清中2,5-HD含量(13.22 t,g/na)高于雄鼠(10.34μg/ml),差异有统计学意义P<0.05;(5)正己烷染毒前后2 h分别给予80 mg/kg大蒜油,血清中2,5-HD含量与单纯染毒组相比均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),但染毒前给药组较染毒后给药组更低,但差异无统计学意义(P>0.05);染毒前2 h给予不同剂量大蒜油,10、20、40、80 mg/kg大蒜油+3 000 mg/kS正已烷组小鼠血清2,5-HD含量比染毒组分别降低16.2%、20.8%、22.8%和32.1%,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),呈明显的剂量一效应关系.结论 在雌性小鼠血清中正己烷的代谢产物2,5-HD高于雄性;5周龄小鼠血清2,5-HD含量较4周和6周龄小鼠高;正己烷染毒前后给予大蒜油可明显减少2,5-HD的生成.     

大蒜油对正己烷染毒小鼠毒性拮抗作用

目的探讨大蒜油减少小鼠正己烷活性代谢产物的生成作用,为减少正己烷中毒提供实验依据。方法健康成年昆明小鼠,随机分为正己烷染毒组和大蒜油干预组,分别灌胃给予正己烷和大蒜油+正己烷,取血,分离血清经乙酸乙酯萃取后,气相色谱法测定血清中2,5-己二酮(2,5-HD)含量。结果小鼠经正己烷单次灌胃染毒后测定血清2,5-HD含量为(0.14±0.14)μg/mL,10 h后达峰值(24.63±3.52)μg/mL,至染毒后20 h降至(0.02±0.04)μg/mL;正己烷染毒前后给予大蒜油使小鼠6h血清2,5-HD含量分别较单纯染毒组降低32.1%(P<0.01)、24.4%(P<0.05);提前给予大蒜油使小鼠4～14 h含量降低26%～54%不等,其中染毒后4、6、8、10 h与单纯染毒组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),但大蒜油并未改变正己烷染毒小鼠2,5-HD含量曲线的形状和达峰时间。结论大蒜油可抑制正己烷染毒小鼠2,5-HD的产生,降低血清2,5-HD水平,降低正己烷毒性。     

小鼠血清中2,5-己二酮含量的气相色谱测定

目的 建立小鼠血清中2,5-己二酮(2,5-HD)的气相色谱测定方法.方法 取小鼠血清0.3 ml加0.03 g无水K2CO3,加入乙酸乙酯1.2 ml萃取30 min后,进行气相色谱测定.结果 血清中没有杂质干扰2,5-HD的测定,方法最低检出浓度为0.03 μg/ml,线性范围0.03～80.00μg/ml;回收率83.8%～99.9%;日内相对标准偏差(RSD)3.3%～5.2%,日间(RSD)3.3%～8.0%.结论 本方法准确可靠,具有良好的重现性,可用于小鼠血清中2,5-HD含量的测定.