基于“药辅合一”制备艾天羊肌肉关节通络膏Ⅱ并评价药效

目的 发挥“药辅合一”的优势,将艾天羊肌肉关节通络膏（ATY乳膏）油相的中链脂肪酸更换为薄荷油,优化处方工艺,得到ATY乳膏Ⅱ,并对2种通络膏进行药效学比较研究。方法 以油/水相质量比、促透剂、添加剂量和药液与基质质量比为考察因素,采用Box-Behnken响应面法优化ATY乳膏Ⅱ制备工艺。通过热板实验,研究比较2种通络膏对小鼠痛阈值的影响;通过小鼠耳肿胀实验,研究比较2种通络膏抗炎的作用;通过醋酸扭体实验,观察2种通络膏对化学刺激引起的疼痛的影响。结果 ATY乳膏Ⅱ的优化工艺处方为油/水相质量比35∶65,促透剂添加剂量8%,药液与基质质量比1∶10。药效实验中,改进后的ATY乳膏Ⅱ组与模型组比较,可显著提高小鼠痛阈值（P<0.01）,抑制二甲苯致小鼠耳肿胀的程度（P<0.01）,对化学刺激引起的疼痛具有一定的镇痛作用（P<0.01）;且上述作用ATY乳膏Ⅱ优于ATY乳膏。结论 改进后的ATY乳膏Ⅱ的工艺简单、可行,稳定性良好,且具有活血化瘀、抗炎镇痛作用。     

柱前衍生HPLC-UV同时测定人工牛黄中胆酸及猪去氧胆酸的含量

目的建立柱前衍生HPLC-UV同时测定人工牛黄中胆酸及猪去氧胆酸的含量。方法以2-萘基溴甲基酮为衍生试剂,三乙胺为催化剂,60℃水浴条件下对胆酸及猪去氧胆酸进行衍生,考察衍生试剂用量、催化剂用量及反应时间等对衍生产物的影响,确定衍生反应的条件,然后考察建立HPLC-UV分离检测方法对人工牛黄中胆酸及猪去氧胆酸含量进行测定。结果当衍生试剂的摩尔量与胆酸及猪去氧胆酸的摩尔总量的比大于30∶1,催化剂的摩尔量与两者的摩尔总量的比在5∶1~60∶1范围内,在60℃水浴条件下反应50 min时,胆酸及猪去氧胆酸的衍生物反应完全。方法学验证:胆酸在0.4~5.0μg范围内线性关系良好(r=0.999 5);猪去氧胆酸在0.12~1.5μg范围内线性关系良好(r=0.999 8)。胆酸的平均回收率(n=6)为100%,RSD为2.40%;猪去氧胆酸的平均回收率(n=6)为101%,RSD为1.33%。此批次人工牛黄样品中胆酸的含量为5.55%,猪去氧胆酸的含量为2.55%。结论本方法灵敏度高、准确可靠、稳定性和重复性好,可用于测定人工牛黄中胆酸及猪去氧胆酸的含量。     

丹参酮IIA脂化乳的制备及其稳定性研究

目的制备丹参酮ⅡA脂化乳,并考察丹参酮ⅡA脂化乳在人工胃肠液中的稳定性,为脂化乳作为口服制剂的合理性和可行性研究提供依据。方法制备丹参酮ⅡA混悬液、脂化乳、脂化乳粒。以原型药物为对照,采用紫外分光光度法测定不同制剂中丹参酮ⅡA的质量浓度。比较丹参酮ⅡA混悬液、脂化乳、脂化乳粒在人工胃液和人工肠液中的变化。结果不同制剂中丹参酮ⅡA在人工胃液中的质量浓度均有所降低,但脂化乳、脂化乳粒均较混悬液中丹参酮ⅡA质量浓度高。在人工胃液中,3 h后混悬液中丹参酮ⅡA质量浓度比脂化乳粒少11.8%、比脂化乳少33.3%。脂化乳粒、脂化乳在人工肠液中丹参酮ⅡA质量浓度几乎没有变化,混悬液中丹参酮ⅡA质量浓度有所降低,但较胃液中降低幅度有所缓和。在人工肠液中,6 h后混悬液中丹参酮ⅡA质量浓度比脂化乳粒少20.3%、比脂化乳少25.8%。结论丹参酮ⅡA脂化乳、脂化乳粒均能提高人工胃、肠液中所包载丹参酮ⅡA的稳定性,且脂化乳效果优于脂化乳粒,提示稳定体系有助于进一步提高人工胃、肠液中制剂稳定性。     

乳剂型凝胶剂预混辅料的初步研制

该实验旨在研究乳剂型凝胶剂预混辅料。以最为常用、成本低廉和工艺简单等为标准筛选辅料和设计配方。采用星点设计-效应面法进行实验设计,以主观评分为指标,使用Design-Expert 8.0.6 Trial进行数据拟合与分析,绘制三维效应曲面图和二维等高线图。结果确定最佳范围为A(卡波姆940):0.05~0.065 g;B(蓖麻油):1.00~1.12 m L;C[聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯(吐温-80)]:0.15 m L。选取最佳配方为卡波姆0.057 5 g,蓖麻油1.1 m L,吐温-80 0.15 m L。对制得的基质进行了初步稳定性评价和一些流变学特性如黏度、触变性的考察。并以此最佳配方为基质,分别以98%芦丁、98%盐酸小檗碱和98%盐酸小檗胺为主药制备乳剂型凝胶制剂,以0.9%生理盐水为接收液,1 h内3种制剂的透皮量均在1%以下。可见,该基质具有发展成为预混辅料的潜力。该配方制得的乳剂型凝胶基质具有较好外观,具有一定的稳定性、较好黏度和触变性,在1 h内无皮肤刺激性。     

25味珊瑚丸载药纳米颗粒的生物效应研究

目的探讨25味珊瑚丸载药纳米颗粒(Ershiwuwei Shanhu’ Pill,ESP)于体内外的生物效应。方法将ESP纳米颗粒与SH-SY5Y细胞共培养8 h,荧光示踪与透射电镜(Transmission electron microscopy,TEM)观察其在细胞吸收分布情况。大鼠随机分为空白对照组和用药组,分别通过尾静脉注射生理盐水或ESP,HE染色观察肝脏形态的变化,旷场实验(Open field test)评估大鼠兴奋度变化,扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察SH-SY5Y细胞在25味珊瑚丸不溶组分上的生长情况。结果25味珊瑚丸纳米颗粒出现在各种细胞器中,出现破碎的细胞核。体内实验中,用药组大量肝细胞液化坏死,与模型组相比,用药组大鼠动物总运动距离显著增加(P0.05),细胞可在25味珊瑚丸不溶组分生长良好。结论 25味珊瑚丸载药纳米颗粒可能导致大鼠焦虑并具有强烈的肝毒性。     

艾天羊活血止痛按摩乳膏的制备及药效研究

目的:制备光泽、均匀、易涂抹的艾天羊活血止痛按摩乳膏,并对其进行药效学研究。方法:基于药辅合一的理念,将花椒油作为乳膏油相;通过单因素以及星点设计-效应面法,优化处方;通过小鼠扭体实验、耳肿胀实验,研究其镇痛和抗炎的作用。结果:得到载药10%、内外均匀光滑、涂展性好、稳定的乳膏;且制备的乳膏镇痛率为(56.48±4.59)%,和对照组相比较能显著延长小鼠扭体潜伏期(P0.05);减少小鼠扭体次数(P0.05);抑制小鼠耳廓肿胀率为(56.02±5.52)%,和模型组相比有差异有统计学意义(P0.05)。结论:制备的艾天羊活血止痛按摩乳膏涂展性好、外观均一;小鼠药效实验表明,其具有良好的镇痛和抗炎的作用。     

金石利咽口崩片的制备及药效学研究

目的:优化金石利咽口崩片处方和制备工艺,并考察其对急性咽炎的药效。方法:以片剂外观、硬度、脆碎度、口感和崩解时间为指标优化处方和制备工艺;采用超高效液相色谱法(UPLC)对有效成分绿原酸进行含量测定;以氨水咽部喷雾方法建立急性咽炎动物模型,比较金石利咽口崩片及原制剂金石利咽颗粒的药效。结果:优化处方为羧甲基淀粉钠55%、微粉硅胶9%、滑石粉0. 5%、硬脂酸镁0. 5%。以此处方制备金石利咽口崩片的硬度为4～6 kg,崩解时间为56 s,脆碎度在4. 8%左右;片剂中绿原酸含量为0. 033%。大鼠日常表现、血常规和炎症介质PGE2含量结果均表明,金石利咽口崩片治疗急性咽炎效果优于阳性药草珊瑚含片。结论:该口崩片处方工艺可行、操作简便,含量测定方法灵敏度高、重复性好,对急性咽炎有效,与金石利咽颗粒剂药效相当,将金石利咽颗粒剂改变剂型为金石利咽口崩片合理、可行。     

纳米载体SWCNT投递Bcl-2 siRNA促进U251细胞凋亡

目的设计和构建特异性siRNA纳米载体SWCNT-siRNA,通过体外实验,研究其对脑胶质瘤的作用。方法设计合成特异性Bcl-2 siRNA,利用超声技术合成SWCNT-siRNA复合物,动态散射粒度分析仪进行粒径分析;体外培养U251胶质瘤细胞,SWCNT-siRNA复合物处理细胞后,激光共聚焦显微镜追踪siRNA进入细胞的分布。PCR检测靶基因Bcl-2沉默情况,Annexin-V FITC与PI联合标记细胞后,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果通过粒径分析证明siRNA成功缠绕到SWCNT上形成稳定的复合物siRNA-SWCNT。利用激光共聚焦显微镜对标记红色荧光的siRNA进行追踪,发现siRNA成功投递到细胞内。PCR验证了被投递到胞浆的siRNA很好的沉默目标基因Bcl-2。通过流式细胞仪分析发现,与对照组比较发现其可以抑制肿瘤细胞生长,促进肿瘤细胞早期凋亡。结论 SWCNT作为纳米载体投递Bcl-2 siRNA进入U251胶质瘤细胞,通过降解Bcl-2 mRNA抑制Bcl-2的表达并促进胶质瘤细胞的凋亡。     

丹酚酸B脂化乳的制备及其稳定性研究

目的制备丹酚酸B脂化乳,并考察其在人工胃肠液中的稳定性。方法制备丹酚酸B脂化乳粒、脂化乳。采用紫外分光光度法测定并比较脂化乳粒、脂化乳中丹酚酸B在人工胃液和人工肠液中的变化。结果不同制剂中丹酚酸B在人工胃液中的量均有所降低,但脂化乳和脂化乳粒均较水溶液中丹酚酸B的量高,3 h后丹酚酸B水溶液中药物的量分别较脂化乳、脂化乳粒少19.3%、6.4%。不同制剂中丹酚酸B在人工肠液中的量均有所降低,但脂化乳、脂化乳粒均较水溶液中丹酚酸B的量高,6 h后丹酚酸B水溶液中药物的量分别较脂化乳、脂化乳粒少32.7%、5.3%。结论丹酚酸B脂化乳、脂化乳粒均能提高人工胃、肠液中所包载药物的稳定性;且脂化乳效果优于脂化乳粒。