心脏病合并糖尿病患者围术期自噬微管相关蛋白轻链3抗体Ⅱ水平变化及其与炎性因子水平、心肌缺血再灌注损伤的相关性研究

背景细胞自噬在心肌缺血再灌注损伤及2型糖尿病发生发展过程中发挥着重要作用,因此明确心脏病合并糖尿病患者围术期细胞自噬作用具有重要意义。目的分析心脏病合并糖尿病患者围术期自噬微管相关蛋白轻链3抗体Ⅱ(LC3Ⅱ)水平变化及其与炎性因子水平、心肌缺血再灌注损伤的相关性。方法选取2016—2017年武汉大学人民医院心胸外科收治的心脏病合并糖尿病患者64例作为观察组,同期未合并糖尿病的心脏病患者64例作为对照组。两组患者均根据冠状动脉、瓣膜及血管病变情况选择相应手术方法,比较两组患者手术前后LC3Ⅱ及炎性因子〔包括白介素6(IL-6)及白介素8(IL-8)〕水平,术后24 h乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平;LC3Ⅱ水平与围术期心脏病合并糖尿病患者IL-6、IL-8、LDH、cTnT、CK-MB水平的相关性分析采用Pearson相关分析。结果 (1)两组患者术前LC3Ⅱ、IL-6、IL-8水平比较,差异无统计学意义(P0.05);术后观察组患者LC3Ⅱ、IL-6、IL-8水平高于对照组(P0.05)。(2)术后24 h观察组患者LDH、cTnT、CK-MB水平高于对照组(P0.05)。(3)Pearson相关分析结果显示,LC3Ⅱ水平与围术期心脏病合并糖尿病患者IL-6(r=0.955)、IL-8(r=0.962)、LDH(r=0.981)、cTnT(r=0.964)、CK-MB(r=0.969)水平呈正相关(P0.01)。结论心脏病合并糖尿病患者围术期LC3Ⅱ水平较高,且LC3Ⅱ水平与炎性因子水平及心肌缺血再灌注损伤有关。     

参附对失血性休克大鼠肺组织的保护作用

目的:研究参附预处理是否对失血性休克大鼠的肺组织起保护作用。方法:雄性SD大鼠随机分为4组(n=10):对照组,失血性休克(HS)组,2 mL/kg参附(SF1)组,4 mL/kg参附(SF2)组。盐水或参附在在休克前30 min通过尾静脉注入大鼠体内。除对照组外,其它3组经10 min股动脉缓慢放血使大鼠平均动脉压达(40±5) mmHg诱发失血性休克,通过放血或输血维持大鼠休克状态60 min。在复苏后4 h,测定大鼠肺组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、Bcl-2、Bax和Caspase-3的含量。并测量支气管肺泡灌洗液(BAL)中的蛋白质和细胞含量以及观察肺组织病理学变化。结果:与HS组比较,SF2组MDA、Bax及Caspase-3水平降低;而SOD活性和Bcl-2增高。与此相应的是SF2组BAL中蛋白质和细胞的含量显著降低及肺组织病理学评分降低。结论:大剂量参附预处理对缺血再灌注大鼠肺损伤具有保护作用。涉及的潜在机制是改善肺组织的抗氧化作用。     

脑电双频指数指导无痛胃镜检查中瑞芬太尼最适剂量的选择

目的 探讨在无痛胃镜检查中瑞芬太尼复合丙泊酚静脉麻醉时瑞芬太尼的最适剂量.方法 接受无痛胃镜检查患者300例,按照随机数字表法随机双盲分成3组(每组100例):瑞芬太尼1组(R1组,瑞芬太尼0.25 μg/kg)、瑞芬太尼2组(R2组,瑞芬太尼0.5 μg/kg)、瑞芬太尼3组(R3组,瑞芬太尼1.μg/kg).记录各组麻醉前(T0)、置入胃镜时(T1)、退出胃镜时(T2)的BIS值、MAP、HR、SpO2,并记录各组患者丙泊酚用量、术中辅助呼吸和术中体动例数、胃镜检查时间、苏醒时间、术中知晓及术后恶心呕吐的情况、离院时间、离院时眩晕等.结果 3组患者To、T1、T2时BIS值、MAP、HR组间分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).与R3组比较,R1组、R2组在T1时点SPO2[(96.9±2.1)％、(96.2±2.9)％比(92.1±5.5)％]明显较高,差异有统计学意义(P＜0.05);在T1时点R1组与R2组比较以及T2时点3组分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).丙泊酚用量R1组[(110±12) mg]、R2组[(65±8)mg]明显多于R3组[(48±6)mg],R1组丙泊酚用量也明显多于R2组,同时术中辅助呼吸R1组(6％)、R2组(9％)较R3组(21％)明显减少,差异均有统计学意义(P＜0.05).与R2组、R3组比较,R1组患者苏醒时间、离院时间明显延长,术中体动及离院时眩晕发生较多(P＜0.05),但R2组、R3组比较差异无统计学意义(P＞0.05).3组患者胃镜检查时间、术中知晓及术后恶心呕吐发生情况比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 以0.5 μg/kg瑞芬太尼辅助适量丙泊白酚是胃镜检查中较适合的搭配方案.     

盐酸戊乙奎醚对失血性休克大鼠肠黏膜的保护作用

目的拟用失血性休克模型来研究盐酸戊乙奎醚是否对肠黏膜缺血再灌注损伤具有保护作用。方法将雄性SD大鼠随机分为四组(n=8):对照组、休克组、小剂量盐酸戊乙奎醚组(0.15 mg/kg)和大剂量盐酸戊乙奎醚组(0.30mg/kg)。盐酸戊乙奎醚或等量生理盐水在休克前30 min通过尾静脉注入大鼠体内。除对照组外,其他三组经15 min股动脉缓慢放血使大鼠平均动脉压达(40±5)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)诱发失血性休克,通过放血或输血维持大鼠休克状态60 min。休克结束30 min内输注大鼠自身血液和林格液(32 mL/kg)进行复苏。复苏4 h之后检测肠黏膜pH(pHi)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙戊二醛(MDA)及钙离子(Ca2+)的含量,并观察肠黏膜组织病理学改变。结果与休克组比较,大剂量盐酸戊乙奎醚组NO、MDA及Ca2+的含量显著降低;而SOD活性和pHi增高。与此相应的是肠黏膜细胞凋亡及组织病理学评分降低。结论大剂量盐酸戊乙奎醚对失血性休克大鼠肠黏膜具有保护作用,其机制可能与抑制细胞死亡和保存细胞抗氧化功能相关。     

参附对大鼠肠缺血再灌注时肠上皮细胞Caspase-3,Bcl-2基因表达的影响

目的研究参附注射液(简称参附)对大鼠肠缺血再灌注期间黏膜上皮细胞凋亡的影响,并探讨其可能机制.方法采用大鼠肠缺血再灌注模型.24只大鼠随机分为对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)和参附治疗组(SF组),SF组于阻断前30 min静注SF液2 mL/100g.再灌注2 h检测回肠黏膜上皮细胞Cas-pase-3,Bcl-2蛋白的表达及细胞凋亡;同时观察小肠黏膜病理形态学改变.结果凋亡细胞检测显示I/R组凋亡细胞显著增多,SF组凋亡细胞数较I/R组显著减少而多于C组(均P＜0.05);Caspase-3,Bcl-2蛋白的表达Caspase-3表达I/R组显著多于SF组和C组(P＜0.01),SF组与C组无明显差异;Bcl-2表达SF组显著高于I/R组(P＜0.05),后者显著低于C组(P＜0.05);SF组小肠黏膜病理损伤程度明显减轻I/R组(P＜0.01).结论参附注射液通过抑制Caspase-3表达和促进Bcl-2基因表达减少缺血再灌注期间肠黏膜上皮细胞的凋亡,从而减轻肠黏膜缺血再灌注损伤.     

参附注射液对肠缺血再灌注时大鼠肾组织iNOS表达的影响

目的观察参附注射液（SFI）对大鼠肠缺血再灌注（IRI）肾组织内诱生型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响，初步探讨其肾保护作用机制。方法采用钳闭大鼠肠系膜上动脉复制缺血再灌注模型。健康成年雄性大鼠随机分为缺血再灌注＋生理盐水组（IRL＋SFI组）、SFI预处理组（IRI＋NS组）和假手术组（C组）。IRI＋SFI组缺血前30min恒速泵入SFI 10ml／kg，阻断SMA造成肠缺血1h后再开放；IRI＋NS组在缺血前30min泵持续注入等量NS。应用免疫组织化学方法和图像分析系统检测肾组织中INOS的表达和分布，比较各组血清肌酐（Cr）、尿素氮（BUN），同时观察肾脏组织形态学改变。结果与C组比较，IRI＋NS组INOS表达明显增强（均P〈0．01），血清Cr、BUN明显增加（P〈0．01）；与IRI＋NS组比较，IRI＋SFI组iNOS表达明显降低（均P〈0．05），血清Cr、BUN明显降低。病理学检查显示SFI能明显减轻肠I／R导致的肾组织的病理损害。结论SFI明显减轻肠I／R所致的肾组织的损伤，其机制与抑制iNOS的表达有关。     

右旋美托咪啶对硬膜外麻醉患者镇静效应的影响

目的:观察右旋美托咪啶(Dex)对硬膜外患者的镇静效应及其对呼吸循环的影响,探讨其能否安全有效地应用于硬膜外麻醉患者。方法:选择60例下肢手术患者,行硬膜外麻醉,麻醉平面测试满意后,用微量泵泵注右旋美托咪啶,负荷量0.4μg/kg,10min内泵完,然后以0.2μg/(kg.h)维持输注,记录给药前(T0)、输注负荷量结束即刻(T1)、输注维持量5min(T2),输注维持量10min(T3)、输注维持量30min(T4)、输注维持量1h(T5),停止输注后10min(T6)、停止输注后30min(T7)时的脑电双频谱指数(BIS)、SBP、DBP、MAP、HR、RR、SpO2,并对患者进行OAA/S镇静评分。结果:T1-T7时点患者的SBP、DBP、MAP、SpO2与T0时相比差异无统计学意义,但在T1～T7时点患者的HR明显降低,与T0时相比差异有统计学意义(P<0.05),同时RR在T1～T6时也明显降低,差异亦有统计学意义(P<0.05);T1～T5时点的BIS值与T0时BIS值相比明显降低差异亦有统计学意义(P<0.05);在T1～T6时OAA/S评分明显降低,与T0时的值相比差异亦有统计学意义(P<0.05);但在T7时,BIS、OAA/S评分与T0时相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:右旋美托咪啶可安全有效地应用于硬膜外麻醉患者的术中镇静。     

人大肠癌细胞系HCT116中Sirt 1基因敲除细胞株的构建

目的利用AAV介导的体细胞基因敲除技术,在人大肠癌细胞系HCT116中对靶基因Sirt 1进行敲除,达到基因沉默的目的。方法构建Sirt1打靶载体,通过病毒包装、感染、药物筛选、PCR鉴定、Western blotting鉴定等步骤获得Sirt 1基因敲除的细胞株。结果经过筛选和鉴定后获得两个Sirt1-/-阳性克隆,成功构建HCT116 Sirt1-/-细胞系。结论通过体细胞敲除技术,我们成功地获得Sirt1敲除肠癌细胞株。