多聚酶链反应产物HindⅢ酶切方法探讨

多聚酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）是当代分子生物学的重要技术。在对ＰＣＲ产物进行限制酶消化时，由于限制酶需一定的反应条件，往往需对ＰＣＲ产物进行纯化。我们在应用ＨｉｎｄⅢ酶切ＰＣＲ产物时，采用了纯化后酶切及直接酶切两种方法。经比较，二法结果无差异。由于直接酶切法省去了纯化过程的繁琐步骤，提高了实验效率，故我们认为应用ＨｉｎｄⅢ酶切ＰＣＲ产物时可采用直接酶切法。１　材料和方法１．１　材料１．１．１　样本　正常人外周血取自健康献血员。１．１．２　引物　引物顺序为Ｃ…     

小鼠血浆中马钱素的高效液相色谱测定法及药代动力学

目的建立测定小鼠血浆中马钱素浓度的高效液相色谱法,并研究马钱素在小鼠体内的药代动力学。方法色谱柱为C18柱,流动相甲醇-水(30∶70),流速为0.8 mL·min^-1,检测波长240 nm;血浆样品用固相萃取法预处理。结果线性范围0.01～5.00 μg·mL^-1。日内RSD<10%,日间RSD<15%,回收率86.0%～91.5%,最低定量浓度为10 ng·mL^-1。ig给药0.5 h后血浆药物浓度达峰值,C_max为6.8 μg·mL^-1,_t1/2α为26.1 min,_t1/2β为29.01 min。结论 该方法灵敏度高,操作方便,适用于马钱素的药代动力学研究;本品口服吸收快消除也快。     

香加皮强心成分杠柳毒苷肠菌代谢研究

[目的]检测杠柳毒苷在大鼠和人体肠菌作用下含量与成分的变化。[方法]采用离体粪便温孵法,利用高效液相—紫外法对温孵不同时间的杠柳毒苷及其代谢产物含量进行测定,并利用高效液相—质谱联用法对代谢物进行鉴定。[结果]杠柳毒苷含量随温孵时间的延长呈快速下降的趋势,温孵5h含量降低约75%,与此同时有代谢物生成,并随温孵时间的延长呈上升趋势。[结论]杠柳毒苷在肠菌(大鼠/人体)作用下,代谢迅速,生成了代谢产物杠柳次苷。     

改进稀释液用于氧氟沙星葡萄糖注射液细菌内毒素检查的研究

目的：建立氧氟沙星葡萄糖注射液的细菌内毒素检查法。方法：用缓血酸胺（三羟甲基氨基甲烷）缓冲溶液代替细菌内毒素检查用水做供试品稀释，按《中国药典》2000版二部收载的细菌内毒素检查法进行实验。结果：缓血酸胺缓冲溶液能排除氧氟沙星葡萄糖注射液对鲎试剂凝胶反应的干扰。结论：样品稀释剂改进后，可用细菌内毒素检查法代替兔法做氧氟沙星葡萄糖注射热质检查。     

十二指肠损伤7例报告

我院自 1987～ 2 0 0 2年共收治十二指肠损伤病人 7例 ,均经手术治疗 ,效果满意。报告如下。1　临床资料本组 7例 ,其中男 6例 ,女 1例。年龄 30～ 5 2岁。均为闭合性损伤。损伤部位 :十二指肠降部 6例 ,降部并水平部l例。合并胰腺损伤 4例 ,肝破裂 5例 ,空肠损伤 2例 ,后腹膜血肿 5例 ,肾脏损伤 3例。均有上腹部疼痛 ,恶心、呕吐 ,合并有腹腔脏器损伤时可有腹膜刺激征 ,休克等。本组有 4例排除胸外伤 ,腰背部出现皮下气肿、捻发感等十二指肠损伤的特征性临床表现。本组受伤到手术的时间为 1h至 2 5天。采用Cogbill改良憩室化再简化手术。…     

HPLC法测定小鼠血浆中杠柳毒苷的血药浓度

目的建立小鼠血浆中杠柳毒苷的HPLC测定方法,对其药动学进行研究。方法血浆样品中加入内标地高辛,用甲醇沉淀蛋白-C18固相萃取处理,氮气吹干后流动相复溶进样。色谱条件:色谱柱为Agilent Zorbas SB-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm)和保护柱Agilent Zorbax C18柱(12.5 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(25∶75);体积流量:1.0 mL/min;柱温:25℃;检测波长:220 nm;进样量:20μL。结果此法空白血浆中无内源性物质干扰样品测定,血药浓度线性范围为0.02~2.0 mg/L(r=0.999 8),最低定量限为0.02 mg/L,平均提取回收率大于81.8%,批内、批间精密度RSD均小于4.64%,准确度试验的结果在101.3%~111.7%。结论本方法简便,准确,灵敏度高,并用于小鼠尾静脉注射杠柳毒苷的药时曲线研究。     

六味地黄汤不同配伍对马钱素煎出率的影响

六味地黄汤为<小儿药证直诀>之古方,具滋阴补肾之功效,临床用于肝肾阴虚、腰膝酸软、头晕目眩、耳鸣耳聋、遗精、消渴、盗汗、骨蒸潮热、小便淋沥等证.马钱素为方中山茱萸的活性成分之一,有抗炎及调节免疫功能[1].测定成药中马钱素的含量已有报道[2,3].本文从六昧地黄汤药性配伍关系出发,考察了其对马钱素煎出率的影响,并以此作为六味地黄汤方剂药动学研究的考察指标.     

六味地黄汤中马钱子素小鼠体内药代动力学研究

目的 研究六味地黄汤中马钱子素小鼠体内药代动力学.方法 高效液相色谱-紫外检测法.结果 六味地黄汤小鼠ig给药后,马钱子素的药代动力学模型为单室模型一级吸收,其药代动力学参数为Ka=0.04min^-1,Ke=0.019min^-1,T(peak)=42.4min,t1/2ka=17.4min,t1/2ke=35.75min.结论 此药代动力学参数可能是六味地黄汤中马钱子素受其他成分影响所致。     

杠柳毒苷在大鼠体内的组织分布

目的 考察杠柳毒苷在大鼠体内的组织分布.方法 采用高效液相色谱法测定大鼠静脉注射杠柳毒苷后,组织样品中杠柳毒苷的质量浓度.结果 大鼠iv杠柳毒苷0.74 mg/kg,2、10、20 min后肝中杠柳毒苷的质量浓度分别为(2.447±0.687)、(0.6310±0.272)、(0.2924±0.228)μg/g,在肝中最高,其次是肾、心、肺、脾和脑.结论 杠柳毒苷静脉注射后,在大鼠体内分布迅速,主要分布于肝、肾和心中.