纤维蛋白原β启动子区单倍型对特发型下肢深静脉血栓的影响

目的 观察纤维蛋白原β(FGB)启动子区单倍型对特发型下肢深静脉血栓(IDVT)的影响.方法 IDVT组及健康对照组各120例.采用启动子区完整测序技术及聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)双重检测纤维蛋白原β链基因启动子区-1 420G/A、-993 C/T、-854G/A、-455 G/A、-249C/T和-148C/T单核苷酸多态性(SNP)及基因型,对上述SNP连锁不平衡分析并构建单倍型模型.结果-993 C/T与-455 G/A、-993 C/T与-148C/T、-455 G/A与-148C/T之间存在较强的连锁不平衡关系(r2分别为0.699、0.509和0.556);构建出8种单倍型模型:单倍型H3、H6在病例组中的频率高于对照组[比值比(OR)分别为32.085和1.896,P＜0.05];单倍型H1、H4、H5和H7在对照组中的频率高于病例组(OR值分别为0.025、0.119、0.644和0.383,P ＜0.05);其余单倍型(H2和H8)在两组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 单倍型H3、H6可能是下肢深静脉血栓(DVT)的危险因素;单倍型H1、H4、H5和H7可能是DVT的保护因素.     

针刺承浆穴配合中药治疗失眠症的疗效分析

近年来,笔者运用针刺承浆穴配合中药治疗失眠症,并与普通针刺疗法配合中药治疗和单纯应用中药治疗失眠症的疗效进行对比分析,旨在探寻治疗失眠症的更有效手段.现报告如下. 1 资料与方法 1.1 临床资料 2010-2013年在我院就诊的失眠患者132例,患者均表现有经常性的睡眠时间减少或不易入睡或寐而易醒,醒后不能再度入睡甚至彻夜不寐,白天困倦、注意力不集中、记忆力减退;均符合《中国精神障碍分类与诊断标准》[1]中失眠症的诊断标准及《中医病证诊断疗效标准》[2]中的辩证诊断标准,并结合国际通用的匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)量表规定的内容进行评分.     

脱细胞猪小肠黏膜下层支架复合软骨细胞构建组织工程软骨

背景：关节软骨损伤后无论是否施加干预,都难以达到满意的修复效果。目的：观察以猪自体软骨细胞为种子细胞复合脱细胞猪小肠黏膜下层构建组织工程软骨的可行性。方法：将培养至第3代的猪膝关节软骨细胞接种于小肠黏膜下层膜上,复合培养48h,构建细胞-载体复合物,光学显微镜、扫描电镜观察软骨细胞在小肠黏膜下层膜上的生长情况。结果与结论：苏木精-伊红染色见细胞在小肠黏膜下层基质层表面呈单层或复层生长;免疫组织化学染色结果显示软骨细胞与小肠黏膜下层表面之间形成一条连续阳性表达条带;扫描电镜见软骨细胞在支架孔隙内贴壁良好生长。     

外周疼痛模型大鼠脊髓背角环氧化酶表达时程的研究

目的 探讨环氧化酶参与疼痛过程的特点,从而为揭示疼痛的中枢机制提供线索.方法 选取雄性Sprague-Dawley大鼠50只,20只大鼠右侧后肢足掌皮下注射生理盐水100μl作为对照组.30只大鼠右侧后肢足掌皮下注射5%(体积分数)福尔马林液100μl作为实验组,注射后2、6 h和1、3、7、14天作为测试时间点,每个时间点随机选取5只大鼠,断头后取大鼠脊髓腰膨大部位1 cm(L4～5)组织并分离出背角部分,以免疫印迹法检测不司时间点环氧化酶1和环氧化酶2蛋白的表达.结果 福尔马林注射后大鼠脊髓环氧化酶1表达在注射后1 d开始增多,达到对照组的(2.44±0.43)倍,持续到14 d表达仍明显增多,达对照组的(3.30±0.39)倍.环氧化酶2的表达仪在注射后2 h表达明显增多,达对照组的(1.87±0.34)倍,注射后6 h即恢复到正常,观察到第14天仍然没有变化.结论 环氧化酶1和2可能都参与疼痛的中枢机制,环氧化酶2在疼痛的早期或发生中起作用,而环氧化酶1可能参与疼痛的维持.

Abstract：

Objective To compare the expression of two cyclooxygenase (COX) isoforms (COX-1 and COX-2) in the spinal cord of rats with inflammatory pain following peripheral formalin injection. Methods Experiments were performed on adult male Sprague-Dawley rats. 100μl of 5% formalin were injected subcutaneously into plantar hind paw of 30 rats to induce pain. The changes of COX-1 and COX-2 expression were evaluated by western blot in 30 rats, respectively at 2 hours, 6 hours, 1 day, 3 days, 7 days and 14 days after injection. The control group rats were injected with 100 μl of 0.9% saline instead of formalin in 20 rats. Results The expression of COX-1 significantly increased at 1day, 3 days, 7 days and 14 days, but the expression of COX-2 only transiently increased at 2 hours. Conclusions COX-1 and COX-2 are increasingly expressed in the spinal cord, furthermore,spinal COX-2 expression is induced early and transiently increased. COX-1 is up-regulated later and remains elevated for long time, which may explain the long-term hyperalgesia evoked by formalin injection.     

腹腔镜保留肾单位肾部分切除术后肾功能分析

目的 寻求影响腹腔镜下保留肾单位肾部分切除术(LNSS)后肾功能恢复的主要因素,检测LNSS的安全性,明确肾脏热缺血安全时间.方法 回顾性分析本院30例次LNSS患者的临床资料,术前及术后3个月采用99Tcm-二乙三胺五乙酸肾动态显象检测肾小球滤过率(GFR),术前、术后24h及术后一周检测血肌酐水平,统计分析影响术后...     

HSP70多肽复合物修饰DCs疫苗抗胰腺癌荷瘤小鼠的实验研究

目的:探讨负载热休克蛋白70多肽复合物(HSP70-PC)抗原的树突状细胞(DCs)疫苗对胰腺癌荷瘤小鼠的免疫治疗作用.方法:采用低渗裂解、ConA-Sepharose亲和层析及ADP-Agarose亲和层析法,从小鼠胰腺癌(MPC83)肿瘤组织中纯化HSP70-PC,修饰小鼠骨髓来源的树突状细胞(DCs),制备树突状细胞HSP70多肽肿瘤疫苗,用MTT法检测混合淋巴细胞反应(MLR)中HSP70-PC致敏DC对CTL的增殖及活化效果;建立MPC83荷瘤小鼠模型,观察树突状细胞HSP70多肽肿瘤疫苗对荷瘤小鼠治疗的效果和小鼠存活期.结果:经上述方法分离、纯化获得了较高纯度的HSP70-PC蛋白质;HSP70-PC在1.5～2.0 μg/ml范围内可达到刺激树突状细胞最强效果,用HSP70-PC修饰的DCs能增强T细胞的增殖和活化能力;应用树突状细胞HSP70多肽肿瘤疫苗治疗荷瘤小鼠能显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,延长荷瘤小鼠存活期.结论:采用低压亲和层析柱可从胰腺癌瘤块中获得较高纯度HSP70多肽复合物,其修饰的DCs疫苗用于荷瘤小鼠免疫治疗有显著疗效,为临床胰腺癌生物免疫治疗奠定基础.     

碱性成纤维细胞生长因子基因转染兔骨髓间充质干细胞*☆

背景：碱性成纤维细胞生长因子对于创伤修复具有明显的促进作用,但局部应用难以持久地发挥作用。 目的：观察碱性成纤维细胞生长因子基因转染至兔骨髓间充质干细胞后的表达情况。 设计、时间及地点：细胞基因学体外观察,于2009-03/08在云南大学生命科学院完成。 材料：日本大耳白兔1只,购于昆明医学院动物科。pCDNA3.1质粒为美国Invitrogen产品。 方法：抽取兔髂前上棘骨髓,采用贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,待细胞融合至培养瓶底80%时消化传代。参考GeneBank碱性成纤维细胞生长因子cDNA序列设计合成基因,电泳纯化后xholⅠ、BamHⅠ双酶切回收凝胶,以限制性核酸内切酶对PcDNA Vector质粒进行酶切、电泳和凝胶回收,连接碱性成纤维细胞生长因子DNA与PcDNA Vector质粒,构建pCDNA-碱性成纤维细胞生长因子真核表达载体,运用脂质体转染法将重组体转染至兔骨髓间充质干细胞中,并筛选稳定转染株。 主要观察指标：骨髓间充质干细胞表面抗原的表达,Western blot法检测目的蛋白的表达。 结果：流式细胞仪检测结果示所培养细胞表面抗原呈CD90,CD44阳性,CD45呈阴性;免疫组化检测结果示骨髓间充质干细胞血管源性细胞表面抗原CD34呈阴性,而相对特异性标记物CD44呈阳性。转染碱性成纤维细胞生长因子的骨髓间充质干细胞提取的细胞裂解液中,在Mr 23 000处有一条明显阳性杂交带;而转染pCDNA3.1(-)空载体的骨髓间充质干细胞提取蛋白未见阳性条带。 结论：实验成功地将碱性成纤维细胞生长因子基因转染至兔骨髓间充质干细胞,该目的基因可稳定表达。     

超声引导下经皮肾镜取石术治疗上尿路结石23例疗效观察

对23例上尿路结石患者行彩色多普勒超声引导下经皮肾镜取石术（PCNL）。结果工作通道均一次完成，结石均被击碎，结石排除率100％，未出现并发症。证明PCNL治疗上尿路结石定位准确、创伤小、手术并发症少、恢复快。     

下颌无牙颌牙槽嵴牙位划分方法的初步探讨

目的:初步探讨下颌无牙颌牙槽嵴牙位划分方法,为测量分析下颌牙槽嵴形态及其对义齿稳定影响提供定位依据.方法:收集符合标准的下颌无牙颌患者模型302例,从中随机选取50例,通过三维激光扫描获取石膏模型牙槽嵴表面数据,运用SolidWorks软件确定咬合平面、并在牙槽嵴顶线的投影上利用各天然牙中点至中切牙近中面长度占同侧天然牙列近远中长度(正中切牙近中面至第二磨牙远中面)的百分比值确定各牙位,标记并连接各测量点:牙槽嵴顶中央点投影(A),左侧磨牙后垫前缘投影(L),右侧磨牙后垫前缘投影(R),左右磨牙后垫前缘投影连线(LR)的中点(M),连接A、M并标记AM中点C;连接C到各牙位中点标记点,并连接M到后牙区各牙位中点标记点,测量各连线与AM的夹角;统计分析测量的数据.结果:在前牙区,C点到各个牙位中点连线近似位于同心圆上,连线与AM的夹角稳定性高(C.V＜5％);在后牙区,M点到各个牙位中点连线与AM的夹角较C点连接角度的方差和极差更小,稳定性更高(C.V＜5％);同时,利用AM与LR的比值作为定位角度参数建立预测方程,可有效较正各牙位定位偏差.结论:选择下颌牙槽嵴中央线上不同的牙位划分线原点,使用划分线与矢状线的夹角平均值,并通过咬合平面上牙槽嵴顶线投影的高宽比作为参数建立牙位划分角度预测方程,可在下颌牙槽嵴顶线上较稳定地划分各牙牙位.     

全虫镇痛汤治疗三叉神经痛60例疗效观察

笔者在临床上采用自拟方全虫镇痛汤治疗三叉神经痛60例，均获得较满意的疗效。现将其治疗观察情况介绍如下。 　　1.临床资料 　　1.1　一般情况　60例中，男22例，女38例，年龄最大79岁，最小43岁；病程最短5天，最长8年；属第Ⅰ枝者3例，属第Ⅱ枝者30例，属第Ⅲ枝者19例，属第Ⅱ、Ⅲ皆有者8例。 　　1.2诊断依据　①疼痛常呈突然发作，疼痛部位限于三叉神经分布区内，多以面颊、上下颌部为多见。②疼痛发作短暂，数秒钟或数分钟后缓解，连续数小时或数天内反复发作。③疼痛呈现阵发性闪电样剧痛，痛如刀割、火灼、针刺样，可伴有痛侧面部肌肉抽动，皮肤潮红，流泪、流涎等症。 　　2.治疗方法 　　2.1　药物组成：生石灰30克(先煎)、赭石20克(先煎)、生石膏15克(先煎)、天麻10克、钩藤10克、全虫6克、蜈蚣3条、当归10克、白芍10克、枣仁10克 　　2.2　运用　大便干结、舌苔黄者加大黄6克；血压高，头晕者加地龙10克；肢体麻木者加鸡血藤15克；口苦心烦者加白芷10克、细辛3克。上方水煎2次，共取计400毫升，分2次服。