临床致病菌整合子检测及耐药基因盒序列分析

目的对临床菌株中的第一类整合子分布及其耐药基因盒的结构特征进行分析。方法应用PCR方法检测33株临床菌株中的第一类整合酶基因intI，并对intI阳性菌株整合的耐药基因进行测序及序列分析。结果33株临床菌株（100％）均为第一类整合酶基因阳性。耐药基因盒特异PCR扩增发现，29株菌得到1913bp的扩增产物，2株得到1664bp的产物，1株得到1009bp的产物，1株得到1913bp和1009bp两种不同产物。序列分析结果表明，1913bp的扩增产物携带基因盒dhfr、orfF和aadA2，1664bp的扩增产物携带基因盒aadA5和dfr17，1009bp的扩增产物携带基因盒aadA2，aadA2和aadA5均为编码对氨基糖苷类抗生素产生耐药的基因盒，dhfr和dfr17均为编码对磺胺类药物甲氧苄氨嘧啶产生耐药的基因盒；orfF为未知功能的开放阅读框。结论第一类整合子介导的耐药基因广泛存在于临床致病细菌中，提示要加强对耐药基因在细菌种属间水平转移的监测工作。     

临床大肠埃希菌第Ⅰ类整合子检测及耐药基因盒分析

目的对来自临床腹泻患者大肠埃希菌的第Ⅰ类整合子分布及其耐药基因盒的结构特征进行分析。方法应用聚合酶链反应（PCR）方法检测第Ⅰ类整合酶基因intⅠ阳性菌株，并对其整合的耐药基因进行测序及序列分析。结果在40株大肠埃希菌中有28株（70％）第Ⅰ类整合酶基因阳性。耐药基因盒扩增结果，13株菌得到1664bp的扩增产物，10株得到1586bp的产物，3株得到1009bp的产物，2株得到1009bp和1586bp两种不同产物。序列分析结果表明，1664bp携带aadA5和dfr17，1586bp携带aadA1和dhfrⅠ，均为对氨基糖苷类抗生素壮观霉素、链霉素和磺胺类药物甲氧苄氨嘧啶产生耐药的基因盒；1009bp为aadA23b，为对氨基糖苷类抗生素壮观霉素、链霉素产生耐药的基因盒。结论测出的28株第Ⅰ类整合子阳性菌株携带耐氨基糖苷类抗生素的基因，应从基因水平上对细菌耐药及其传播进行监测。     

小飞蓬挥发油提取及成分分析

采用水蒸气蒸馏法提取小飞蓬新鲜叶子中的挥发油,采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)和峰面积归一化法分离分析其化学成分和相对含量。结果表明,小飞蓬新鲜叶子挥发油得率为0.74%,共可分离30种化合物,鉴定出其中的26种,占挥发性成分总量的96.12%。挥发油的主要成分有金合欢烯(18.13%)、β-毕澄茄烯(15.02%)、橙花叔醇(12.04%)、环己醇(9.28%)和榄香烯(8.46%)。     

右旋龙脑-β-环糊精包合物的制备及其结构表征

目的 研究右旋龙脑-β-环糊精最佳包合工艺,并对其进行结构表征.方法 分别采用饱和水溶液法、超声法、研磨法对右旋龙脑进行包合,以综合评分为指标,筛选最佳包合方法.采用L9(34)正交试验设计,筛选超声法制备包合物的最佳工艺参数.采用薄层色谱(TLC)法、傅里叶红外光谱(FIIR)法、X射线粉末衍射(XRD)法对包合物进行结构表征.结果 制备包合物的最佳工艺参数为:右旋龙脑与β-环糊精投料比为1∶6,超声温度为40℃,超声时间为60 min.在该制备工艺条件下包合物的得率高于88.59％,包合率高于95.98％.经过TLC、FIIR和XRD确证其包合物已形成.结论 本工艺具有较好的包合率和得率,右旋龙脑被β-环糊精包合后呈现新的物相特征.     

双料喉风散的薄层色谱分析

目的:建立利用薄层色谱方法控制双料喉风散质量。方法:在不同温度条件下,利用薄层色谱法对双料喉风散中甘草、山豆根、黄连、青黛、人工牛黄等药材进行定性鉴别。结果:在最适的温度条件下,各色谱斑点清晰,分离效果好,阴性对照无干扰。结论:该鉴别方法专属性强、灵敏、可靠,可作为双料喉风散的质量控制方法。     

致病菌耐药因子分布及特征分析

目的 对临床菌株中的整合子分布及其携带耐药基因盒的结构特征进行分析。方法 应用多重PCR方法检测55株临床菌株中的3类整合酶基因intⅠ。并对intⅠ阳性菌株耐药基因盒进行测序及序列分析。结果 55株临床菌株均为第1类整合酶基因阳性（100％）。耐药基因盒特异PCR扩增发现，27株革兰阳性菌株和22株革兰阴性菌株均得到1913bp的扩增产物，携带基因盒为dhfr、orfF和aadA2；6株革兰阴性菌得到1664bp的产物．携带基因盒为aadA5和dfrl7。aadA2和aadA5均为编码对氨基糖苷类抗生素产生耐药的基因盒。dhfr和dfr17均为编码对磺胺类药物甲氧苄氨嘧啶产生耐药的基因盒；orfF为未知功能的开放阅读框。结论 临床致病革兰阳性菌和革兰阴性菌株均广泛存在着整合子结构．应加强对耐药基因在细菌种属间水平转移的监测工作。     

右旋龙脑-β-环糊精包合物稳定性和溶出度的研究

目的:对右旋龙脑-β-环糊精包合物的稳定性和溶出速率进行考察。方法:采用气相色谱法,以右旋龙脑含量测定为指标,分别对右旋龙脑-β-环糊精包合物和混合物进行挥发性试验、热稳定性试验、抗光解试验和溶出度试验。结果:在光和热的影响下,包合物中右旋龙脑的挥发速率要明显小于混合物。溶出度实验表明,包合物的溶出速率明显快于混合物。结论:右旋龙脑被包合后,其稳定性明显优于单纯的右旋龙脑,便于长久贮存而不改变疗效。并且右旋龙被包合后,其体外溶出速率有显著的提高,便于发挥其药效。     

聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳技术在口腔微生物多样性研究中的应用

目的应用聚合酶链反应(PCR)-变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术,分析健康人的口腔菌群及其菌种组成的多样性。方法抽取8名健康人唾液样本,分别提取唾液细菌总DNA,PCR扩增16SrDNA并进行DGGE和系统发育树分析。结果 8名健康人唾液样本的DGGE指纹图谱条带差异性较大,仅有65%相似性,表明采用PCR-DGGE对口腔微生物多样性的检测是可行的。结论 PCR-DGGE技术可较灵敏、直观地反映口腔微生物多样性情况。     

右旋龙脑-β-环糊精包合物的制备及其结构表征

目的 研究右旋龙脑-β-环糊精最佳包合工艺,并对其进行结构表征。方法 分别采用饱和水溶液法、超声法、研磨法对右旋龙脑进行包合,以综合评分为指标,筛选最佳包合方法。采用L9(34)正交试验设计,筛选超声法制备包合物的最佳工艺参数。采用薄层色谱（TLC）法、傅里叶红外光谱（FIIR）法、X射线粉末衍射（XRD）法对包合物进行结构表征。结果 制备包合物的最佳工艺参数为：右旋龙脑与β-环糊精投料比为1∶6,超声温度为40 ℃,超声时间为60 min。在该制备工艺条件下包合物的得率高于88.59%,包合率高于95.98%。经过TLC、FIIR和XRD确证其包合物已形成。结论 本工艺具有较好的包合率和得率,右旋龙脑被β-环糊精包合后呈现新的物相特征。     

吐泻肚痛胶囊急性毒性的研究

目的 观察小鼠在短时间内灌胃吐泻肚痛胶囊药粉的急性毒性.方法 采用经口给药测定小鼠口服吐泻肚痛胶囊的急性毒性.以36 g·kg-1·d-1剂量的吐泻肚痛胶囊药粉(相当于吐泻肚痛胶囊临床每日用量的480倍)灌胃小鼠,连续14 d,观察服药14 d后其毒性反应和死亡情况.结果 小鼠的一般活动、食欲、精神、大小便等均未见异常,体质量未见下降,也未见动物死亡,与对照组比较,未见明显差异.结论 吐泻肚痛胶囊口服给药无明显急性毒性表现.