聚乙二醇化重组人胰岛素注射液Beagle犬毒动学研究

目的 研究毒性剂量暴露下聚乙二醇化重组人胰岛素注射液（PEG-Det）的毒动学（TK）,以评价系统暴露与剂量、时间及毒性结果之间的关系,通过重复给药分析药物在体内是否存在蓄积及代谢方式是否改变等特性。方法 32只健康Beagle犬随机分为4组,每组8只,雌雄各半,分别sc低、中、高剂量（37.5、75.0、150.0 μg/kg）PEG-Det及溶媒,每周给药2次,重复给药9个月。分别于首次（d1）、中期（d89）和末期（d260）给药后采用放射免疫分析（RIA）法检测不同时间血药浓度,采用罗氏血糖仪同步测定动物血糖水平。试验数据采用DAS 3.0药动程序拟合分析并计算TK参数。结果 各剂量组动物sc给药后,随血药浓度升高伴随血糖降低,且与给药剂量呈正相关;随给药频率增加,血糖降低幅度减小;单次和多次给药后,PEG-Det的C_max和AUC与剂量均呈正相关;随给药频率增加,各剂量组的C_max和AUC_ss降低,且给药末期（9个月）的蓄积指数（R_Cmax和R_AUC）均小于1;各剂量组在给药不同阶段的消除半衰期t_1/2z为20~30 h;达峰时间T_max和清除率CL_z/F均在一定范围内波动,不与剂量相关。结论 Beagle犬重复sc给予PEG-Det 37.5、75.0、150.0 μg/kg,随给药剂量增加,药物暴露量增大;经多次给药后,血浆中胰岛素浓度趋于平稳,体内无药物蓄积;且血糖降低幅度减少,在维持有效浓度和药效的基础上,降低了由低血糖带来的安全性风险。     

聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子注射液在健康志愿者中的药动学和药效学研究

目的研究聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子(PEG-G-CSF)注射液在健康人体单次给药的药动学(PK)和药效学(PD)特征,评价其PK/PD相关性。方法采用单中心、随机、双盲、安慰剂对照试验设计,36例健康受试者分别单次sc PEG-G-CSF注射液30、60、100、200μg/kg,分别于给药前(0 h),给药后1、3、6、8、10、12、24、48、72、96、120、144、192、240、312、408 h采肘静脉血,双抗体夹心酶联免疫分析(ELISA)法检测血清药物浓度,所有血药浓度–时间数据采用DAS3.2.4药动学程序软件进行处理,用非房室模型拟合计算药动学参数,t_(max)、C_(max)采用实测值;AUC采用梯形法计算。并同步监测血清绝对中性粒细胞计数(ANC)。结果在30~100μg/kg剂量范围内t_(max)较为恒定,为8.0~12.4 h;当给药剂量升至200μg/kg时,t_(max)后移至24.0 h;C_(max)和AUC_(0～408h)随剂量递增而呈更大比例增大,即当剂量增加约7倍时,C_(max)和AUC_(0～408h)分别增大14、26倍。各剂量组t1/2Z较为一致(约61 h)。血清中的ANC水平与给药前比较均有显著升高,ANC的达峰时间(t_(max)(ANC))随着剂量增加而延长,且明显滞后于血药浓度的t_(max);ANC的峰浓度(C_(max)(ANC))和随时间变化曲线下面积(AUC_(0～408h)(ANC))与给药剂量的相关性不甚明显。给药后1周内血液中ANC一直维持在较高水平范围内,而血清中PEG-G-CSF的浓度在8~24 h达到峰值,较PD的达峰时间早。结论健康受试者单次sc PEG-G-CSF注射液30~200μg/kg呈现非线性动力学特征。在血液中的清除主要经嗜中性粒细胞受体介导,并且具有自我调节的清除机制。与非PEG化的rh G-CSF比较,PEG-G-CSF显示了其在体内的长效特性。     

国产与进口重组人胰岛素注射液Beagle犬皮下注射的生物等效性研究

目的：以美国礼来公司重组人胰岛素注射液（优泌林R,Humulin R）为对照品,评价国产重组人胰岛素注射液（Insulin R）的相对生物利用度和生物等效性。方法采用自身随机交叉给药方案,12只健康Beagle犬分别sc同剂量Insulin R和Humulin R,按设计采集6 h内动态血标本。采用罗氏血糖仪与检测血药浓度同步测定动物血糖水平;放射免疫分析（RIA）法检测血药浓度;试验数据采用DAS 3.0药动学程序拟合计算参数,并进行生物等效性分析。结果 Beagle犬自身交叉sc Insulin R和Humulin R 0.5 U/kg后的血浆最低葡萄糖浓度（Cmin）分别为（1.6±0.4）、（1.6±0.2）mmol/L;达到最低浓度所需时间（tmin）分别为（1.0±0.5）、（1.1±0.6）h。Insulin R和Humulin R的主要药动学参数均值分别为：达峰时间（tmax）为（0.43±0.21）、（0.42±0.09）h;峰浓度（Cmax）为（203.2±63.3）、（193.5±63.1）μU/mL;药时曲线下面积（AUC0-6 h）为（281.2±47.5）、（266.6±62.5）μU/(mL·h);受试药Insulin R相对于对照药Humulin R的相对生物利用度为（109.4±25.5）%。结论两种重组人胰岛素注射剂在健康Beagle犬体内具有生物等效性。     

高脂饮食对非洛地平在中国健康受试者体内药动学的影响

目的研究高脂饮食对非洛地平在健康中国人体内的药动学影响。方法 10名健康男性受试者随机分成2组,分别于空腹或进食高脂餐后口服非洛地平缓释片1片(10 mg/片),采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定血浆中非洛地平的浓度,用DAS 2.1.1软件计算主要药动学参数,用SPSS 19.0软件对主要药动学参数进行统计学分析。结果受试者于空腹和进食高脂餐后口服非洛地平缓释片的主要药动学参数ρmax、tmax、AUC0-36 h分别为(5.78±3.22)μg·L-1和(9.29±3.47)μg·L-1、(3.11±1.27)h和(5.33±1.80)h、(46.6±24.2)μg·h·L-1和(58.7±18.6)μg·h·L-1;对空腹与进食高脂餐后给药的主要药动学参数采用配对t检验进行统计分析,ρmax和tmax具有显著性差异(P<0.05)。结论高脂饮食可显著降低非洛地平的吸收速度,并显著提高峰浓度。     

注射用重组人成纤维细胞生长因子-21食蟹猴药动学研究

目的 研究注射用重组人成纤维细胞生长因子-21（FGF-21）在食蟹猴体内单次和多次皮下给药后的药代动力学特征。方法 采用随机、平行和剂量递增设计,18只食蟹猴分别单次sc150、300和600 μg/kg的FGF-21或多次sc 300 μg/kg的FGF-21,按设计采集动态血清样本。采用双抗体夹心ELISA法检测血清中药物浓度的动态变化,采用DAS 3.2.4药动程序拟合并计算药动参数。结果 食蟹猴单次sc FGF-21后,各剂量组峰浓度C_max和药时曲线下面积AUC_（0-24h）、AUC_（0-∞）均随给药剂量的增加而增大,C_max、AUC_（0-24h）和AUC_（0-∞）三者均与剂量呈线性相关,各剂量组t_1/2Z、T_max、CL_z和V_z均较为一致。与单次给药相比,食蟹猴多次sc给药后的t_1/2z有所延长但其他主要PK参数（T_max、V_z和CL_z等）均较为一致,多次给药后,体内药物无蓄积倾向。结论 食蟹猴单次sc FGF-21后,在150~600 μg/kg剂量范围内呈现线性动力学特征。单次与多次sc给予FGF-21后,两者的PK行为特征基本一致,无明显药物蓄积。     

聚乙二醇化新型集成干扰素注射液大鼠药物代谢动力学研究

目的研究聚乙二醇化新型集成干扰素(pegylated consensus interferon,PEG-cIFN)注射液在大鼠体内的药代动力学特征,并与非聚乙二醇化的集成干扰素(consensus interferon,cIFN)进行比较。方法大鼠分别单次皮下注射不同剂量PEG-cIFN(7、14和28μg/kg)和cIFN(7μg/kg),采用酶联免疫分析法测定不同时间血清药物浓度,实验数据以DAS 3.0药动程序拟合并计算药动参数。结果大鼠分别单次皮下注射PEG-cIFN低、中和高3个剂量组后,峰浓度(the peak concentration,Cmax)和药时曲线下面积(the area under the serum concentration-time curve,AUC)随剂量增加呈更大比例增大,清除率(clearance,CL)随剂量增大而降低;达峰时间(the time to reach peak concentration,Tmax)和消除半衰期(elimination half life,t1/2β)与剂量呈非相关,且较为恒定(10～20 h);相同剂量下的PEG-cIFN较cIFN t1/2β延长15倍;CL降低10倍;Tmax滞后约10倍;AUC增加8倍,而Cmax降低近1倍。结论上述研究结果表明,PEG化后的IFN确实能改善和提高药代动力学/药效动力学特性,延长半衰期,降低清除率,增加暴露量,减小血清峰-谷浓度比率,延缓药物体内作用时间,具有长效作用。     

国产与进口重组人胰岛素注射液Beagle犬皮下注射的生物等效性研究

目的以美国礼来公司重组人胰岛素注射液（优泌林R,Humulin R）为对照品,评价国产重组人胰岛素注射液（Insulin R）的相对生物利用度和生物等效性。方法采用自身随机交叉给药方案,12只健康Beagle犬分别sc同剂量Insulin R和Humulin R,按设计采集6 h内动态血标本。采用罗氏血糖仪与检测血药浓度同步测定动物血糖水平;放射免疫分析（RIA）法检测血药浓度;试验数据采用DAS 3.0药动学程序拟合计算参数,并进行生物等效性分析。结果 Beagle犬自身交叉sc Insulin R和Humulin R 0.5 U/kg后的血浆最低葡萄糖浓度（Cmin）分别为（1.6±0.4）、（1.6±0.2）mmol/L;达到最低浓度所需时间（tmin）分别为（1.0±0.5）、（1.1±0.6）h。Insulin R和Humulin R的主要药动学参数均值分别为：达峰时间（tmax）为（0.43±0.21）、（0.42±0.09）h;峰浓度（Cmax）为（203.2±63.3）、（193.5±63.1）μU/m L;药时曲线下面积（AUC0-6 h）为（281.2±47.5）、（266.6±62.5）μU/（m L·h）;受试药Insulin R相对于对照药Humulin R的相对生物利用度为（109.4±25.5）%。结论两种重组人胰岛素注射剂在健康Beagle犬体内具有生物等效性。     

金黄色葡萄糖球菌肠毒素C2改构蛋白大鼠药动学研究

目的 研究金黄色葡萄糖球菌肠毒素C2改构蛋白（2M-118）在大鼠体内单次和多次给药后的药动学特征。方法 24只大鼠随机分为3组,每组8只,雌雄各半,分别单次iv低、中和高剂量（1、2和4 mg/kg）2M-118,高剂量组大鼠于单次给药后,继续每天给药1次,共给药8次。于给药前（0 h）,首次及末次给药后5、10、20、30、45 min和1.0、1.5、2.0、4.0、6.0、8.0 h采集眼静脉丛全血约0.5 mL,制备血清。采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测大鼠血清药物浓度,采用DAS 3.2.8药动程序计算药动学参数。结果 大鼠单次iv 2M-118后,在1～4 mg/kg剂量内,峰浓度（C_max）、初始浓度（C₀）和药时曲线下面积（AUC）均与剂量呈正相关;消除相半衰期（t_1/2Z）随剂量递增明显延后,平均t_1/2z分别为0.24、0.60和1.18 h;表观分布容积（V_z）随剂量递增而增大;各剂量组的清除率（CL_z）较为一致。与同剂量（4 mg/kg）单次给药相比,大鼠多次给药后的主要药动学参数基本保持一致,体内药物无蓄积倾向。结论 大鼠单次iv 2M-118后,在1～4 mg/kg剂量内,体内暴露量与剂量呈正相关,其清除可能呈现非线性动力学特征;单次与多次iv给予相同剂量2M-118后,药动学行为特征基本一致,无明显药物蓄积。     

重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子栓在大鼠和Beagle犬中的免疫原性

目的在大鼠和Beagle犬阴道给予重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,rhGM-CSF)栓3个月的长期毒性试验中,检测给药后动物血清中是否产生抗rhGM-CSF抗体和抗体的中和活性。方法 SD雌性大鼠设rhGM-CSF栓0(赋形剂对照组)、0.24、0.96和3.84 mg/kg 4个组;Beagle雌性Beagle犬设0(赋形剂对照组)、0.07、0.28和1.12 mg/kg 4个组。每天给药1次,连续3个月,恢复期1个月。间接ELISA法检测动物血清中抗rhGM-CSF的结合抗体,TF-1细胞/MTT比色法检测抗体的中和活性。结果①大鼠从给药1个月起至恢复期结束,3个剂量组动物血清中均能检测到抗rhGM-CSF的抗体;低剂量和中剂量2组间动物血清的抗体滴度差异无统计学意义,但与高剂量组相比低剂量组和中剂量组差异有统计学意义。体外测活法显示,各剂量组在给药1个月后有部分动物产生中和抗体;给药3个月或恢复期1个月时全部受检动物均产生中和抗体。②Beagle犬的各剂量组动物血清中均未检测到抗rhGM-CSF的抗体。结论 rhGM-CSF栓经阴道局部连续给予3个月的长期毒性试验中,啮齿类动物大鼠血清中各剂量组均产生抗rhGM-CSF的抗体,且抗体可中和GM-CSF的生物活性;而非啮齿类动物Beagle犬血清中则未检测到抗rhGM-CSF抗体。rhGM-CSF栓对大鼠具有免疫原性。