急性肺损伤大鼠肺水通道蛋白1和5的表达及功能的实验研究

目的观察脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素1β(IL1β)对大鼠肺微血管内皮细胞(LMECs)水通道蛋白1(AQP1)表达和功能的影响;同时在LPS诱发的大鼠急性肺损伤(ALI)模型观察AQP1、AQP5表达的变化。方法(1)体外实验:将第3代LMECs随机分为LPS组、TNFα组、IL1β组和DMEM对照组,实验组分别给予LPS、TNFα、IL1β刺激,应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)测定AQP1mRNA的表达以及免疫组化测定AQP1蛋白表达,同时采用放射性核素示踪法测定LMECs内氚水(3H2O)的放射强度。(2)体内实验:40只雄性Wistar大鼠随机分为LPS2h组、LPS4h组、LPS6h组、LPS8h组和对照组,LPS各组制成ALI模型,采用RTPCR测定ALI大鼠AQP1、AQP5mRNA表达以及免疫组化观察AQP1、AQP5蛋白表达。结果(1)体外实验:LPS、TNFα、IL1β组LMECsAQP1mRNA和蛋白表达显著低于DMEM对照组(mRNA表达分别为0.428±0.026、0.446±0.029、0.454±0.023和0.793±0.035,蛋白表达分别为0.366±0.009、0.374±0.014、0.377±0.007和0.660±0.013,P均<0.01);且LMECs内3H2O掺入量[(726±58)、(738±45)、(774±44)脉冲数/min]也显著低于DMEM对照组[(1148±70)脉冲数/min,P均<0.01]。(2)体内实验:ALI大鼠肺组织AQP1、AQP5mRNA表达(LPS2h组0.409±0.018、0.421±0.020,LPS4h组0.421±0.023、0.412±0.023,LPS6h组0.435±0.020、0.388±0.031,LPS8h组0.438±0.016、0.386±0.019)也显著低于对照组(0.794±0.015、0.787±0.022,P均<0.01)。结论AQP1、AQP5可能参与ALI/ARDS液体的异常转运,可能与肺水肿的发病机制有关。     

人参皂甙Rg3对糖尿病肾病大鼠肾组织Bax和B淋巴细胞瘤-2蛋白表达及肾细胞凋亡的影响

目的探讨糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠应用人参皂甙Rg3处理后肾组织Bax、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白表达变化及肾细胞凋亡情况。方法120只雄性SD大鼠,随机分为模型组、治疗组和对照组各40只。模型组、治疗组腹腔注射质量分数2%链尿佐菌素溶液制备DN模型,对照组腹腔注射等量生理盐水。造模成功后,治疗组将0.5 mg/kg人参皂甙Rg3与生理盐水混合溶液灌胃,模型组、对照组大鼠给予等量生理盐水灌胃,均1次/d,连续28 d。疗程结束后大鼠麻醉处死,取肾组织行病理检查,采用TUNEL法检测肾组织细胞凋亡,Western blot法检测肾组织Bax、Bcl-2蛋白相对表达量,实时荧光定量PCR法检测肾组织Bax mRNA、Bcl-2 mRNA相对表达量。结果对照组大鼠肾组织系膜结构、肾小管均正常,小管膜完整光滑,间质未增生;模型组大鼠肾组织系膜结构异常,间质严重增生,肾小管萎缩严重,小管膜粗糙;与模型组比较,治疗组大鼠肾组织系膜细胞增生减轻,肾小管萎缩减少,纤维组织减少;模型组、治疗组、对照组大鼠肾细胞凋亡率[(0.91±0.23)%、(0.56±0.14)%、(0.21±0.03)%]依次降低(P<0.05);模型组、治疗组、对照组肾组织Bax蛋白相对表达量(1.79±0.31、2.73±0.24、3.26±0.12)、Bcl-2蛋白相对表达量(1.42±0.12、2.59±0.25、4.40±0.31)、Bax mRNA相对表达量(0.35±0.02、1.45±0.91、3.12±1.17)、Bcl-2 mRNA相对表达量(1.34±0.87、1.73±0.67、3.91±0.75)依次增高(P<0.05)。结论人参皂甙Rg3对DN大鼠有显著治疗作用,可明显改善大鼠肾组织形态,降低肾细胞凋亡率,上调Bax、Bcl-2表达。     

慢性肾脏病5期非透析患者血清镁与冠状动脉粥样硬化性心脏病及左心室功能的相关性

目的 探讨慢性肾脏病(CKD)5期非透析患者血清镁浓度与冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)及左心室功能的相关性。方法 43例CKD5期非透析患者根据是否患有CHD分为CHD组(24例)和对照组(19例),录入患者一般资料、血清镁、心率(HR)、每搏输出量(SV)、心搏指数(SI)、心输出量(CO)、心脏指数(CI)、射血前时间(PEP)、左心室射血时间(LVET)和PEP/LVET值。利用SPSS 15.0软件进行成组设计t检验及Pearson相关性分析。结果 与对照组相比,CHD组患者血清镁水平、SV、SI及LVET偏低(P<0.05)。CHD组患者血清镁浓度与LVET呈正相关(r=0.66,P<0.01),与PEP/LVET值呈负相关(r=-0.38,P<0.05)。结论 CKD 5期非透析合并CHD患者的血清镁浓度偏低,且与左心室收缩功能相关。     

脂多糖、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β对鼠肺微血管内皮细胞水通道蛋白-1表达的影响

目的　通过观察脂多糖 (LPS)、肿瘤坏死因子 α(TNF- α)、白细胞介素 1β(IL- 1β)对鼠肺微血管内皮细胞水通道蛋白 1(AQP- 1)表达的影响 ,为研究急性肺损伤时肺水异常代谢的机制提供实验依据。方法　在体外培养大鼠肺微血管内皮细胞 ,分为LPS组、TNF α组、IL- 1β组和对照组 ,前三组分别给予LPS 10 0ng/mL、TNF -α 10 0 0U/mL、IL -1β10 0 0U/mL刺激 4h ,应用半定量RT- PCR法以及免疫细胞化学染色法检测AQP- 1的表达。结果　刺激组AQP -1的表达显著低于对照组 (P <0 . 0 1)。结论　LPS、TNF -α、IL- 1β刺激下AQP- 1表达下降 ,提示AQP -1在急性肺损伤时可能与肺水代谢异常有关。     

血管紧张素Ⅱ对肾小球内皮细胞骨架和单层通透性的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对培养肾小球内皮细胞(GENC)形态、单层通透性、肌动蛋白骨架的影响,探讨AngⅡ对GENC炎性损伤的机制。方法倒置显微镜观察AngⅡ对体外培养大鼠GENC的形态影响;用二室弥散系统检测AngⅡ对GENC单层通透性的影响;用免疫细胞化学的方法观察AngⅡ对GENCF-肌动蛋白(F-actin)分布的影响。结果AngⅡ浓度大于0.1mg·L-1作用48h内观察到细胞脱落和破裂。10mg·L-1AngⅡ6、12h可使GENC单层通透性增高、F-actin解聚。结论AngⅡ引起GENC脱落和破裂呈时间和剂量依赖性;AngⅡ引起内皮单层通透性的增高的机制可能与F-actin解聚相关;     

认识高尿酸血症

正通常,当我们面对一个陌生事物时,不安就会悄悄来访。接触与了解陌生事物,都会使人感到不同程度的惶恐。因此,不少患者朋友发现自己的血尿酸值升高后,便陷入了这样的一个场景:尿酸水平偏高了,我该怎么办呢?莫紧张,别害怕,当我们进一步熟悉了陌生事物,就会豁然开朗,惴惴不安的感觉也就会消失殆尽。下面,笔     

前臂近端自体动静脉内瘘在老年血液透析病人中的应用

目的探讨老年血液透析病人在前臂近端建立自体动静脉内瘘的优劣性及临床转归。方法选取在我院进行首次自体动静脉内瘘建立的老年病人,分为近端组(桡动脉起始段与正中静脉或头静脉吻合)和远端组(桡动脉与头静脉吻合),观察2组病人内瘘术后的手术并发症以及内瘘血流量、成熟情况及预后等。结果所有内瘘手术术后即刻成功率为100%。术后6~8周进行内瘘超声评估,近端组和远端组的血流量分别为(1328.5±234.4)mL/min和(1125.6±198.1)mL/min(P<0.05),首次穿刺时间分别为(56±15)d和(62±13)d(P=0.03),首次穿刺成功率分别为87.8%和78.9%(P<0.05)。2组术后总体并发症发生率差异无统计学意义(P>0.05);所有手术6个月的总体通畅率为92.41%,1年的总体通畅率为81.01%。2组病人1年的内瘘存活率差异无统计学意义(85.2%比74.1%,P=0.32),但在第2年时,近端组的存活率为74.3%,明显高于远端组的48.3%(P<0.05);同时近端组由于血栓形成而导致的内瘘闭塞率及再次手术干预次数也低于远端组(P<0.05)。结论前臂近端自体动静脉内瘘具有成熟快、流量充足、通畅率高等优点,对于前臂远端血管条件不佳、需建立内瘘的老年人,尤其是高龄病人可以优先考虑。     

ESRD患者细胞免疫功能与氧化应激关联的研究

目的观察终末期肾脏病（ESRD）患者T淋巴细胞亚群的变化及与氧化应激的关联。方法选择住院和门诊ESRD患者40例,其中20例接受血液透析治疗,为I组;另20例未接受血液透析治疗,为Ⅱ组;选择同期健康体检者20例为Ⅲ组。检测3组血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和T淋巴细胞亚群、凋亡。结果①与Ⅲ组比较,ESRD患者CD3＋、CD4＋T细胞数及CD4＋／CD8＋比值均显著下降（P〈0．05）;而CD3＋、CD4＋T细胞凋亡率显著升高（P〈0．01）;两者呈负相关（r=-0．79,P〈0．01;r=-0．87,P〈0．01）。②与Ⅲ组比较,ESRD患者血清MDA明显升高（P〈0．05）,SOD明显下降（P〈0．05）;并且CD3＋、CD4＋T细胞凋亡率与MDA呈正相关（r=0．41,P〈0．05;r=0．58,P〈0．01）。结论ESRD患者T淋巴细胞亚群数量减少与其凋亡率相关,后者又与氧化应激状态关联。因此推测氧化应激可能诱导淋巴细胞过度凋亡,促使细胞数减少。加重ESRD患者免疫功能紊乱。     

血液透析前临时中心静脉置管117例临床分析

目的探讨中心静脉留置导管在血液净化治疗中的应用,及其并发症的防治。方法回顾2009年8月至2011年1月经中心静脉置管的血透患者,其中颈内静脉置管43例,股静脉置管74例,分析不同置管方法并发症的发生率及防治方法。结果导管留置时间3～115 d,出现的并发症:出血或血肿2例(1.71%),导管相关感染7例(5.98%),导管堵塞8例(6.84%),导管滑脱1例(0.85%),血流量差39次(3.77%),两种置管方法的血流量和透析效果均满意,而颈内静脉置管归置时间长于股静脉置管。结论中心静脉置管操作简便、并发症少,能提供稳定的血流量满足透析要求,是理想的临时血液净化通路。若患者条件许可,可优先选择颈内静脉置管。     

LPS对鼠肺微血管内皮细胞水通道蛋白-1表达及其功能的影响

目的：通过观察脂多糖（LPS）刺激对肺微血管内皮细胞水通道蛋白-1 mRNA表达和功能的影响，以探讨急性肺损伤肺水异常代谢的机制。方法： 在体外培养的大鼠肺微血管内皮细胞（RLMEC），分别使用浓度为100 μg/L、1 mg/L、10 mg/L的LPS与之孵育4 h、12 h、24 h后, 应用氚水掺入法测定RLMEC内氚水的信号强度，并用RT-PCR法测定AQP-1 mRNA的表达。结果： LPS刺激组氚水的信号强度显著低于对照组（P<0.01）；同时LPS刺激组AQP-1 mRNA的表达显著低于对照组。结论： LPS刺激RLMEC AQP-1 mRNA表达和摄水功能下降，提示AQP-1在急性肺损伤时可能与肺水代谢异常有关。