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1.
嵌合抗CD20抗体片段F(ab'')2的表达及活性 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :为了简化生产步骤 ,提高抗体蛋白的生物活性 ,探索在工程菌体内直接进行抗CD2 0F(ab’) 2 的高效率分泌性表达。方法 :采用单因素考察法优化培养条件 ,使蛋白G柱和S2 0 0 HR分子筛柱分离纯化目的蛋白 ,用MTT法检测抗CD2 0F(ab’) 2 抑制Daudi细胞体外生长的活性。结果 :发现用论文所选定的最适培养条件 ,抗CD2 0F(ab’) 2 的产量有了明显提高 ,从1 9~ 2 .2mg L达到了 3 7~ 4 3mg L ,F(ab’) 2 在表达产物中所占的比例也从 9 7%~ 13 2 %提高到了 38 1%~ 4 6 8% ;使用S2 0 0 HR分子筛柱对蛋白G柱亲和纯化后的产物进一步分离纯化 ,可以使F(ab’) 2 的纯度达到 85 %以上 ;MTT法检测结果证明F(ab’) 2 抑制Daudi细胞生长的IC50 值为 14 6 μg ml,而Fab’为 39 5 μg ml。 结论 :实现了抗CD2 0F(ab’) 2 在工程菌体内的高效率分泌性表达 ,而且所表达的抗CD2 0F(ab’) 2 比抗CD2 0Fab’具有更强的抑制Daudi细胞体外生长的能力 相似文献
2.
阿糖胞苷上调白血病细胞CD86分子及细胞因子表达的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:观察阿糖胞苷(Ara-C)对急性白血病细胞CD86分子表达的影响,并探讨其作用机制.方法:流式细胞术(FCM)检测U937、HL60、NB4细胞经Ara-C处理前后CD86分子表达变化,RT-PCR检测Ara-C对各组细胞CD86mRNA、NF-кB以及细胞因子IFN-γ的表达变化.结果:经Ara-C处理的急性白血病细胞CD86分子表达与对照组相比均明显升高(P<0.05);CD86 mRNA表达水平也明显增强;Ara-C处理后细胞核内NF-кB表达明显上调;并且IFN-γ mRNA在T细胞活化72 h可检测到.结论:Ara-C能使U937、HL60、NB4急性白血病细胞CD86表达增加,有利于NF-кB等转录因子活化,促进CD86转录增强、表达增加并可有效地增强肿瘤细胞的免疫原性,激活T细胞,B7-2在T细胞活化中起着更重要的作用. 相似文献
3.
抗Pgp/抗CD3双特异双链抗体的生物学活性研究 总被引:6,自引:0,他引:6
目的 研究抗Pgp 抗CD3双特异双链抗体介导的特异性靶向杀伤活性。方法 采用亲和层析法分离纯化本室构建的抗Pgp 抗CD3双特异双链抗体可溶性表达产物 ,并用SDS PAGE、Westernblot及抗活细胞间接免疫荧光法鉴定纯化产物 ;采用51 Cr释放试验测定其介导的体外靶向杀伤活性。结果 纯化的抗Pgp 抗CD3双特异双链抗体具有与Jurkat细胞 (CD3 )和K5 6 2 A0 2 (Pgp )细胞结合的活性 ;抗Pgp 抗CD3双特异双链抗体具有介导激活的T淋巴细胞杀伤Pgp表达阳性的耐药肿瘤细胞的作用 ,杀伤作用的强弱显示出效靶比和剂量依赖关系 ,且可被CD3ScFv或PgpScFv特异性的阻断。结论 抗Pgp 抗CD3微型双功能抗体有望成为治疗耐药肿瘤 ,特别是肿瘤残留灶和微小转移灶的治疗的一种新策略。 相似文献
4.
5.
B淋巴细胞的增殖与分化异常与急慢性淋巴细胞性白血病及淋巴瘤等血液系统恶性肿瘤密切相关,目前该类疾病主要治疗措施之一是化疗,但B细胞对化疗药物产生多药耐药(MDR)已成为限制疗效的关键因素。近年研究证实,利用耐药逆转剂、基因治疗及免疫治疗可不同程度逆转MDR。 相似文献
6.
樟芝的研究及其应用现状 总被引:7,自引:0,他引:7
目的:介绍中国台湾产新菌种樟芝的生物学特性,人工培育方法,化学成分及其生理活性,开发现状及其展望.方法:采用固体栽培法和深层液体培养法进行樟芝的人工培育,提取其有效成分进行抗氧化、免疫增强、护肝、抗肿瘤等试验.结果:樟芝在固体和液体培养基中均得到了良好地生长,深层液体培养缩短了培养周期,有效成分以多糖体、三萜类、固醇类、抗氧化物质为主,其子实体、菌丝体和液体培养的过滤液具有抗氧化、提高免疫力、护肝、抗肝炎、抗肿瘤、抗感染等多项生理活性,具有高效低毒的优点.结论:深层液体培养樟芝弥补了野生樟芝资源的严重不足,是值得推广的樟芝培育方法,樟芝野生和人工培育的子实体、菌丝体以及液体培养的过滤液可以加工制成具有抗肿瘤、抗肝炎、护肝、调节免疫、抗衰老、抗炎作用的保健食品和药品,具有很大的开发价值和应用前景. 相似文献
7.
目的:建立裸鼠皮下人B-淋巴细胞移植瘤模型,研究抗CD3/CD20。微型双功能抗体在裸鼠体内的分布。方法:采用亲和层析分离纯化本室构建的抗 CD3/抗 CD20微型双功能抗体可溶性表达产物,并用SDS-PAGE、Western blot、分子排阻层析和 FACS鉴定纯化产物;采用5周龄左右的雌性 BALB/c-nu,经4Gy照射、皮下接种 Raji细胞建立裸鼠皮下人B-淋巴细胞移植瘤模型,并于眼底静脉丛注射125I标记的抗CD3/抗CD20微型双功能抗体,测定各组织中125I的分布。结果:雌性BALB/c-nu经照射、皮下接种1×10~7~3×10~7Raji细胞/只,6~14天均开始出现移植瘤,移植瘤细胞膜表面标记与 Raji相同,且在24小时时肿瘤部位125 I的分布明显低于心、肝、肾、脾,其比值分别为0.08、0.19、0.06和0.51,而 72小时时肿瘤部位125I的分布则高于心、肝、肾、脾,其比值分别为 2.32、9.46、8.24和9.50。结论:抗CD3/抗CD20微型双功能抗体能在裸鼠皮下人B-淋巴细胞移植瘤部位富集,是一个有望用于B细胞恶性肿瘤临床治疗的双特异性抗体。 相似文献
8.
目的:探讨靛玉红衍生物PHⅡ-7抗乳腺癌耐药株MCF-7/ADR增殖作用的初步机制。方法:MTT法检测PHⅡ-7的体外杀伤活性;RT-PCR法、Western blot法检测基因、蛋白表达水平;构建干扰c-fos的短发夹RNA真核表达载体,转染MCF-7/ADR细胞,并建立稳定转染的细胞系;采用细胞计数法绘制生长曲线探讨c-fos表达下调对乳腺癌细胞增殖的影响。结果:PHⅡ-7剂量依赖性地抑制乳腺癌敏感株MCF-7及耐药株MCF-7/ADR增殖;c-fos在耐药株MCF-7/ADR表达明显高于敏感株MCF-7;PHⅡ-7明显抑制c-fos的表达;shRNA显著抑制了c-fos蛋白表达,细胞增殖也被显著抑制。结论:靛玉红衍生物PHⅡ-7浓度依赖性地抑制乳腺癌耐药株MCF-7/ADR增殖,其作用可能与抑制原癌基因c-fos有关。 相似文献
9.
目的:呼吸节律的产生部位和原理一直是神经生物学研究领域中的热门课题。近年来的研究表明,延髓中一个被称为前包钦格复合体(Pre-B觟tzinger complex,PBC)的区域在哺乳动物呼吸节律的产生中起着关键作用。方法:本文通过对一类前包钦格复合体神经元的单房室模型的研究,使用Matlab软件对非线性微分方程进行神经元单房室模型的构建,结合龙格库塔方法,从非线性动力学角度对模型的不同参数的一定范围的变化进行数值分析,考察其蕴含的动力学特性。结果:通过改变单房室模型的不同电生理参数,如离子平衡电位、电容、电导等,得到模型中的全发放、簇发放或者混沌状态,尤其是通过同时调整持续钠电导和依赖钙离子的内质网通道蛋白浓度,可得到明显的加周期和倍周期分岔现象。结论:结合膜电位发放图和峰峰间距图对模型的非线性动力学特性进行分析,并由模型数值分析结果探讨其信号传递和节律编码的规律,为呼吸节律的调控机制提供线索,也为进一步揭示呼吸节律的产生机理提供了重要的参考价值。 相似文献
10.
背景:脑-机接口是在大脑与外部设备之间建立的直接的交流通路,基于运动想象的脑-机接口研究已经从两类运动想象任务的识别发展到多类任务的识别。目的:探寻准确有效的对多任务运动想象脑电信号进行特征提取及模式识别的方法。方法:首先采用公共平均参考法减小多通道中各导联间的相关性,提高脑电信号的信噪比。并对公共空间模式算法进行扩展,采用"一对多"的策略,对4类任务的脑电信号进行特征提取,在模式识别过程中,采用基于决策树法的支持向量机进行分类。对于实验对象样本不充足,结合支持向量机和贝叶斯分类器,将分类结果中具有大概率的测试样本扩充到训练集,最后再次运用支持向量机进行分类。结果与结论:最佳正确率达到92.78%,"一对多"的公共空间模式和基于决策树的支持向量机可以有效地进行多任务脑电信号识别,扩充样本可以提高分类正确率。 相似文献