木犀草素降低大肠埃希菌对呼吸道上皮细胞感染的作用机制研究

目的：探讨亚抑菌浓度（sub-minimal inhibitory concentration,亚-MIC）木犀草素降低临床分离大肠埃希菌对呼吸道上皮细胞HBE感染的作用机制,为临床抗感染的治疗提供新的思路。方法：采用微量肉汤稀释法检测木犀草素对大肠埃希菌临床株E367的MIC值,采用多功能酶标仪测定亚-MIC木犀草素对细菌生长的影响,采用CCK-8法测定亚-MIC木犀草素处理大肠埃希菌对HBE细胞毒性的影响,采用ELISA试剂盒测定细胞炎症因子白细胞介素（interleukin,IL）-6、IL-8及肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平,采用Western Blot测定p-p65/p65、p-IκBα/IκBα蛋白表达水平。结果：1/4 MIC-1/32 MIC木犀草素对大肠埃希菌的生长没有影响,且能剂量依赖性地降低大肠埃希菌对呼吸道上皮细胞的毒性。大肠埃希菌感染细胞后其炎症因子IL-6、IL-8、TNF-α水平和p-p65/p65、p-IκBα/IκBα蛋白表达水平均显著增高。与细菌处理组相比,木犀草素和大肠埃希菌共同处理细胞后其IL-6、TNF-α水平及p-p65/p65、p-IκBα/IκBα蛋白表达水平显著降低,而细胞因子IL-8水平几乎不变。结论：木犀草素可能通过免疫调节抑制大肠埃希菌对呼吸道上皮细胞的感染作用。     

黄芩苷/黄芩素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抗药性的逆转作用研究

目的:研究黄芩苷/黄芩素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)抗药性的逆转作用,并初步探索其逆转机制。方法:以平皿法测定黄芩苷/黄芩素与苯唑西林对MRSA的协同抗菌效力;以分光光度法测定黄芩苷/黄芩素协同苯唑西林对MRSA生长密度的抑制作用;以青霉素结合蛋白(PBP2a)胶乳凝集试剂盒检测黄芩苷/黄芩素对PBP2a生成的抑制效力。结果:黄芩苷/黄芩素联合苯唑西林对临床分离的MRSA有显著的协同抗菌作用,16μg·mL-1的黄芩素即可显著逆转MRSA对苯唑西林的高度耐药;黄芩苷/黄芩素对MRSA产生PBP2a有显著抑制作用。结论:黄芩苷/黄芩素可通过抑制MRSA产生PBP2a来逆转其对苯唑西林的高度耐药,这一现象从理论上为临床治疗MRSA感染提供了新的方法和思路。     

单次与多次静脉滴注盐酸米诺环素在健康志愿者的药动学

目的:研究单剂量单次与多次静脉滴注盐酸米诺环素后的药动学。方法:9例中国男性健康成年志愿者,年龄(20±1．4)岁,静脉滴注盐酸米诺环素,每次100mg,bid,连续给药11次。用高效液相色谱法测定血药浓度,用3P97软件拟合药动学参数。结果:受试者静脉滴注盐酸米诺环素后,体内过程为二房室模型。连续给药11次后,AUC_(0-τ)值比首次给药显著增加,第11次给药后AUC_(0-τ)~(?)与单次给药AUC_(0-∞)~(?)比较有差异(P＜0．05)。其他参数t_(1/2)α,t_(1/2)β,k_(21),k_(10),k_(12)和V_c经t检验无显著性差异(P＞0．05)。平均稳态血药浓度C_(avg)为(7．286±1．993)μg·mL~(-1),稳态血药浓度-时间曲线下面积AUC_(0-τ)~(?)为(87．431±23．912)mg·L~(-1)·h,药物浓度的波动系数为(0．316±0．064),药物在体内的蓄积因子为(2．221±0．357)。受试者给药期间未出现严重不良反应。结论:本研究中连续给药方案在人体内可达到有效血浆浓度,但连续给药11次后体内有蓄积,建议临床按此方案用药时,使用时间不宜过长,以减少药物不良反应。     

2种奥沙普秦肠溶片的人体相对生物利用度研究

目的:比较2种国产奥沙普秦肠溶片的相对生物利用度。方法:20名健康志愿者分别单剂量交叉口服受试制剂和对照制剂各400mg,采用高效液相色谱法测定人血浆中奥沙普秦浓度;采用3p97软件计算二者药动学参数,并计算生物利用度。结果:受试制剂和对照制剂的t1/2β分别为(73.468±24.354)、(73.556±24.406)h,tmax分别为(13.275±8.012)、(13.200±15.154)h,Cmax分别为(44.283±7.535)、(45.429±15.107)μg/ml,AUC0～Tn分别为(4471.792±1387.724)、(4234.328±1741.380)(μg.h)/ml,AUC0～inf分别为(5040.407±2092.744)、(4858.292±2423.656)(μg.h)/ml,均无统计学差异;受试制剂的相对生物利用度为(112.8±38.5)%。结论:2种国产奥沙普秦肠溶片具有生物等效性。     

头孢克洛胶囊人体药代动力学和生物等效性评价

目的考察国产头孢克洛胶囊与参比制剂在健康人体内的生物等效性。方法采用高效液相色谱法测定血浆中头孢克洛的质量浓度,通过对20名男性健康受试者单次交叉口服750 mg头孢克洛的受试制剂和参比制剂,计算其药物动力学参数及相对生物利用度。结果受试制剂和参比制剂的0～t药时曲线下面积(AUC0-t)分别为(29.460±5.731)和(30.106±5.349)μg/(mL.h),0～∞药时曲线下面积(AUC0～∞)分别为(30.327±6.128)和(30.909±5.497)μg/(mL.h),峰浓度(Cmax)分别为(20.901±4.070)和(21.067±3.422)μg/mL,达峰时间(tmax)分别为(0.900±0.462)和(0.800±0.208)h,半衰期(t1/2)分别为(0.660±0.082)和(0.666±0.070)h,受试制剂的相对生物利用度为(98.0±9.6)%。结论受试制剂头孢克洛胶囊与参比制剂生物等效。     

盐酸左氧氟沙星片生物等效性研究

目的评价两个不同厂家的盐酸左氧氟沙星片剂的人体生物等效性。方法对20名男性健康自愿受试者采用两制剂、两周期自身双交叉设计方法,口服单剂量试验药物（重庆市庆余堂制药有限公司）或对照药物（浙江京新药业股份有限公司）300mg,采用高效液相色谱-荧光检测法测定血清中药物浓度,用DAS软件计算药代动力学参数和相对生物利用度。结果试验药物与对照药物的半衰期（t1/2）分别为（6．380±0．592）h和（6．412±0．511）h,达峰时间（nmax）分别为（0．925±0．294）h和（1．175±0．452）h,峰浓度（Cmax）分别为（3．753±0．609）μg／mL及（3．606±0．605）μg／mL,0～36h药时曲线下面积（AUC0-36）分别为（31．773±3．742）μg·h／mL72．（31．640±3．141）μg·h／mL,0～∞药时曲线下面积（AUC0～∞）分别为（32．597±3．786）μg·h／mL及（32．426±3．163）μg·h／mL。试验药物的相对生物利用度为（100．7±8．4）％。结论两种盐酸左氧氟沙星片剂生物等效。     

烧伤创面耐药金黄色葡萄球菌的分离及其norA基因突变分析

目的 探讨野生型耐药金黄色葡萄球菌的norA基因及其启动子的突变情况.方法 分离并筛选出10株烧伤刨面的耐药性金黄色葡萄球菌,对norA基因及其启动子进行测序并分析其改变.结果 共分离出金黄色葡萄球菌87株,它们对万古霉素100%敏感,对奎奴普汀和呋喃妥因也有很高的敏感性,而对其余抗生素的耐药率则非常高;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的阳性率达到91.7%.所有10株实验菌的norA基因编码区都有1 349位G→A的点突变,也就是氨基酸的291位处存在Gly(甘氨酸)→A8p(天冬氨酸)的突变.利血平逆转实验提示10株细菌对三种抗生素的MICs值均存在不同程度的下降.结论 norA基因突变是金黄色葡萄球菌耐药的机制之一.

Abstract：

Objective To investigate the genetic mutation of the norA gene and its promotor from the wild-type drug-resistance Staphylococeus aureus(S.aureus)strains. Methods A total of 10 antibiotic-resistant S.aureus strains were isolated and screened from the burn wound for the sequencing and analysis of the nora gene and its promoter. Results There isolated 87 S.aureus strains from the burn wound flora,which were completely sensitive to vacomycin,highly sensitive to Quinupristin and Nitrofurantoin,but highly resistant to the other antibiotics,even up to91.7% of MRSA.There found the same point mutation(G→A) located at 1 349 sites of the norA gene coding region in all the S.aureus strains,saying that the amino acid was changed from Gly(glycin)to Asp(agpartic acid) in 291 sites.The resetpine reverse test showed that the MICs value of three antibiotics was lowered at various degrees in all 10strains.Conclusion NorA gene mutation is one of the mechanisms for antibiotic-resistance of S.aureus.     

烧伤创面金黄色葡萄球菌耐药株的分离及其形态学研究

金黄色葡萄球菌是烧伤创面主要的优势菌群之一,随着抗生素的长期广泛应用,其耐药性逐渐增强,已经成为烧伤患者主要的耐药细菌.因此,及时了解烧伤患者创面金黄色葡萄球菌的耐药情况并对其机制进行分析,对于合理选择抗菌药物及控制耐药性的蔓延十分重要.笔者在分离鉴定烧伤患者创面耐药金黄色葡萄球菌的基础上,观察其形态学的变化,并探讨这些改变与其耐药性的关系.     

复方异丙安替比林片在健康人体的药代动力学研究

目的研究复方异丙安替比林片在健康人体内药动学特征。方法12名受试者随机交叉单次空腹口服复方异丙安替比林片1、2、3片（每片含异丙安替比林220mg、苯海拉明20mg）;另12名受试者多次给药1片,连续10次,每8小时服药1次。采用高效液相色谱-质谱法测定血浆和尿中异丙安替比林、苯海拉明的浓度,计算药动学参数。结果多次和单次给药（1片）后苯海拉明的峰浓度（Cmax）分别为（143．75±33．995）μg/L和（63．608±56．908）μg/L,终末半衰期（t1/2x）分别为（16．619±26．588）h和（9．507±4．932）h;曲线下面积（AUC0-4）分别为（1226．022±476．67）h·μg/L和（470．161±219．52）h·μg/L。多次和单次给药（1片）后异丙安替比林的Cmax分别为（3220±1304．781）μg/L和（3252．083±1135．837）μg/L,终末半衰期（t1/2x）分别为（3．029±1．856）h和（2．826±1．211）h;AUC0-4分别为（6522．007±1714．091）h·μg/L和（8055．037±2418．651）h·μg/L。20mg苯海拉明多次给药后平均稳态高峰血药浓度（Cmaxss）为（143．750±33．995）μg／L,平均稳态谷浓度（Cminss）为（49．225±39．187）μg／L,平均稳态浓度（Cavss）为（65．399±14．942）μg/L,多次给药后的波动度（DF）为（1．627±0．532）,蓄积因子（R）为（3．098±1．444）。220mg异丙安替比林Cmaxss为（3320．0±1304．781）μg/L,Cminss为（151．211±138．197）μg/L,Cavss为（749．052±183．166）μg/L,DF为（4．255±1．294）,R为（1．222±0．800）。结论健康受试者口服复方异丙安替比林片后苯海拉明体内过程复杂,个体差异较大,血浆中苯海拉明和异丙安替比林浓度和AUC随剂量依赖性增加。按每次1片,每日3次给予复方异丙安替比林片后苯海拉明在人体内有显著蓄积。     

高良姜抗菌作用现代研究进展

近年来随着临床细菌耐药性问题日趋严重,中药抗菌药物成为了医学领域研究的热点。传统中药高良姜富含多种抗菌活性成分,其中黄酮类、二芳基庚烷类、挥发油等成分经抑菌实验研究证实均具有较理想的抗菌作用,并且与抗生素联用时有协同增效作用。综合近年高良姜抗菌作用的国内外研究进展,从其主要抗菌成分、抗菌效果以及应用前景进行整理分析,为其抗菌机制的深入研究、临床应用及产品开发提供借鉴与参考。