双吲哚马来酰亚胺衍生物L6诱导白血病细胞凋亡机制的研究

目的探讨双吲哚马来酰亚胺衍生物L6诱导白血病细胞的凋亡作用及其分子机制。方法采用MTT比色法检测L6对白血病细胞HEL、K562、KG1a的杀伤作用。流式细胞术检测L6对HEL细胞凋亡、周期和分化的影响。Western blotting法检测细胞凋亡相关蛋白的表达。通过体内实验研究L6治疗小鼠白血病的作用效果。结果 MTT比色法结果显示L6对HEL、K562、KG1a细胞具有比阳性对照米哚妥林(PKC412)更显著的抑制活性,半数抑制浓度(IC50)分别为(0.05±0.03)、(0.32±0.01)、(0.19±0.10)μmol/L。L6可以诱导HEL细胞发生凋亡和G2/M期阻滞,诱导HEL细胞向巨核细胞方向分化,且呈剂量效应。Western blotting检测结果表明L6主要通过激活Caspase-3执行细胞凋亡。小鼠肝组织苏木精-伊红(HE)染色显示肝组织内HEL细胞浸润有所减轻,但L6组减轻的效果更明显,表明其可延缓白血病细胞的转移,且效果优于米哚妥林。结论双吲哚马来酰亚胺衍生物L6有较强的抗白血病活性,为新型白血病药物的研发提供参考。     

新生儿苯丙酮尿症两种实验室筛查方法的质量评价

目的比较筛查新生儿苯丙酮尿症(PKU)的2种检测苯丙氨酸(Phe)的方法——细菌抑制法(B IA)和荧光法。方法参加美国疾病控制中心(CDC)质量评价,分析B IA和荧光法的批内、批间误差及相对偏差,比较2种方法的结果。结果用CDC质控品测得BIA批内变异系数(CV)为14.29%,荧光法为5.85%;用不同浓度质控品测得B IA批间CV分别为25.34%、20.86%、34.78%和25.72%,荧光法为16.46%、13.22%、19.53%和15.41%;B IA的PKU阳性检出率为5.04/10万,荧光法为7.79/10万。结论荧光法较B IA具有更灵敏、准确、可定量、费时少的优点,国内今后应顺应其发展趋势,普及推广运用荧光法筛查新生儿PKU。     

两面针的化学成分和飞龙掌血酮内酯的晶体结构

目的 研究两面针Zanthoxylum nitidum的化学成分。方法 应用硅胶柱色谱和Sephadex LH-20凝胶柱色谱分离化合物，通过化合物的理化性质和光谱数据(包括单晶X射线衍射)鉴定结构。结果 从两面针中分离得到7个化合物，分别为2个香豆素：飞龙掌血酮内酯(Ⅰ)和飞龙掌血内酯(Ⅱ)；5个生物碱：6-甲氧基-5，6-二羟基两面针碱(Ⅲ)、白鲜碱(Ⅳ)、岩椒碱(Ⅴ)、茵芋碱(Ⅵ)和5-甲氧基白鲜碱(Ⅶ)。对化合物Ⅰ进行了单晶X射线衍射实验。结论 化合物Ⅰ～Ⅲ、Ⅴ、Ⅶ为首次从该植物中分离得到；首次得到化合物Ⅰ的单晶X射线衍射晶体结构数据。     

海洋来源放线菌Actinoalloteichus cyanogriseus WH1-2216-6 产浅蓝霉素A的发酵条件优化

目的 对海洋来源放线菌Actinoalloteichus cyanogriseus WH1-2216-6 产浅蓝霉素A的发酵条件进行优化,提高浅蓝霉素A的产量。方法 对培养基的组成、接种量、起始pH、盐度、发酵时间、前体浓度及大孔吸附树脂添加量等条件的研究,通过单因素和正交试验,选择最优发酵条件;结果 获得了浅蓝霉素A的最佳发酵条件,培养基组成(可溶性淀粉20 g,甘油20 g,蛋白胨20 g,CaCO₃2 g,2-吡啶甲酸400 mg,XAD-16大孔吸附树脂50 g,陈海水1 L)、装液量150/500 mL(体积分数)、5 d种龄、3.3%盐度、起始pH=7.5、摇床(180 r/min,28℃)发酵12 d。结论 以最佳发酵条件发酵,优化后的浅蓝霉素A的产量为优化前的7.0倍,达到610.5 mg/L。     

用时间分辨荧光免疫法测定孕早期妇女血清甲胎蛋白的初步研究

本文用时间分辨荧光免疫法(Tr-FIA)测定了孕6-16周(W)妇女的血清甲胎蛋白(MSAFP)水平.共742份血清标本,其中无流产史组300份标本/300例,有习惯性流产史组238份/61例,为了便于筛查,前者用毛细管微量采血与静脉血测定MSAFP浓度对照为204份.在无流产史组中有1例MSAFP浓度显著增高,为死胎;习惯性流产史组中215份/52例保胎成功,23份/8例保胎失败,其中3例为染色体核型异常.     

骨碎补内生菌Lecanicillium sp. GZWMJZ-847中3个新3-氢化萘特特拉姆酸衍生物

目的 研究骨碎补内生蜡蚧菌Lecanicillium sp. GZWMJZ-847的次级代谢产物和抑菌活性。方法 采用大米培养基对菌株Lecanicillium sp. GZWMJZ-847发酵;采用凝胶柱色谱、正反相硅胶色谱等方法对化合物进行分离纯化;采用核磁共振谱、质谱、NMR计算等方法确定化合物的化学结构;采用营养肉汤稀释法测试化合物对病原细菌及酵母菌的抑菌活性、平板法测试化合物对病原霉菌的抑菌活性。结果 从菌株的发酵产物中分离鉴定了3个新的和3个已知的3-氢化萘特特拉姆酸衍生物,包括蜡蚧特特拉姆酸A（1）、蜡蚧特特拉姆酸B（2）、蜡蚧特特拉姆酸C（3）、Sch 210971（4）、Sch 210972（5）、Sch 213766（6）。化合物1和4～6对4株人体革兰阳性病原菌和1株植物革兰阴性病原菌具有抑制作用,最小抑菌浓度（minimun inhibitory concentration,MIC）为7.8～125 mmol/L。化合物6对油菜菌核病菌和小麦赤霉病菌表现出一定的抑制作用,半数抑制浓度分别为（22.05±0.62）、（55.54±1.72）μg/mL。结论 蜡蚧特特拉姆酸A～C（1～3）为新的3-氢化萘特特拉姆酸衍生物,骨碎补内生菌Lecanicillium sp. GZWMJZ-847产生的3-氢化萘特特拉姆酸对人体病原菌和植物病原菌可表现出抑制作用。     

三烯霉素J——来自深海细菌Ochrobactrum sp.的新安莎霉素

目的探究深海来源细菌Ochrobactrum sp. OUCMDZ-2164中的细胞毒活性代谢产物。方法利用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和高效液相色谱等手段对发酵产物进行分离纯化,运用紫外、红外、质谱、核磁共振及圆二色谱等方法鉴定化合物的结构,采用MTT和细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法分别评价化合物对乳腺癌MCF-7细胞和肺癌A549细胞及慢性髓性白血病K562细胞的增殖抑制活性。结果从细菌Ochrobactrum sp. OUCMDZ-2164的发酵产物中分离获得了4个化合物,分别鉴定为3-O-去甲基三烯霉醇(1)、flazin(2)、flazin-3-carboxylicacid(3)和胸腺嘧啶(4)。化合物1在10μmol/L浓度下对MCF-7细胞的增殖抑制率为61.5%。结论化合物1为新的安沙霉素类化合物,命名为三烯霉素J,其具有一定的乳腺癌细胞毒活性。     

新生儿甲状腺功能低下症的筛查

我院自1986年11月～1991年6月对91683名新生儿,以TR—FIA测定滤纸干血滴标本TSH浓度,筛查先天性甲状腺功能低下症。确诊20例,筛查患病率1:4586。确诊病例中12例为典型的T_4低、TSH增高,8例为T_4≥6μg/dl(81nmol/L),TSH增高的非典型病例。对后者我们认为先予以密切观察,但必需在小儿3个月前治疗。目前应用干甲状腺片替代治疗,按L-甲状腺素每日5～7.5μg/kg折算,逐渐加量,根据临床症状及实验室TSH、T_4测定监护。我室随访病例的体格及智力发育皆在正常范围。     

1株链霉菌产胞外多糖ZS-11的结构表征及抗氧化活性研究

目的 对来源于南海深海海泥链霉菌Streptomyces pratensis OUCMDZ-3159所产胞外多糖的结构和抗氧活性进行研究。方法 利用醇沉法和柱色谱法对菌株所产胞外多糖进行分离纯化,利用多种仪器分析方法,包括PMP柱前衍生高效液相色谱法、红外光谱法和气相质谱联用法等分析了多糖的化学组成和结构,通过测定DPPH自由基清除活性、超氧阴离子自由基清除活性、羟基自由基清除活性和还原能力,对多糖的抗氧化活性进行评价。 结果 从链霉菌Streptomyces pratensis OUCMDZ-3159发酵液中得到了1种分子量为25.0 kDa的多糖组分ZS-11,它是由甘露糖和半乳糖以14.5:1的比例构成;糖链中包含(1→)-Manp,(1→2)-Manp,(1→3)-Manp,(1→6)-Manp,(1→2,3)-Galf和(1→2,6)-Manp连接方式;多糖ZS-11具有良好的抗氧化活性,在测定的4种活性指标中,清除DPPH自由基的能力最强。结论 首次从深海海泥放线菌Streptomyces pratensis OUCMDZ-3159中分离得到抗氧化活性显著的胞外多糖ZS-11,它是1种结构新颖的半乳甘露聚糖。