防旋型股骨近端髓内钉内固定术对老年股骨粗隆间骨折患者髋关节功能及下肢血栓形成的影响

目的探讨防旋型股骨近端髓内钉内固定术对老年股骨粗隆间骨折患者髋关节功能及下肢血栓形成的影响。方法回顾性分析三峡大学人民医院2013年1月~2015年1月间收治入院的老年股骨粗隆间骨折患者62例,其中30例采用动力髋螺钉髓外固定(对照组),32例防旋型股骨近端髓内钉内固定术(观察组),观察两组患者术中及术后基本情况。比较两组患者髋关节功能、切口外形美观度、下肢深静脉血栓形成及其他并发症情况以及凝血酶原时间(PT)、血液D-二聚体、活化部分凝血活酶时间(APTT)指标水平。结果观察组手术切口、手术时间以及下床活动时间均较对照组优,组间差异有统计学意义(P0.05),术中出血量比较,两组未见统计学差异(P0.05),而观察组术中透视次数显著较对照组多,差异有统计学意义(P0.05)。观察组术后Harris评分高于对照组,髋关节功能恢复优良率也明显较对照组高(93.75%vs 73.33%),下肢深静脉血栓形成率较对照组低(3.13%vs 20.00%),组间差异有统计学意义(P0.05);观察组患者对切口外形美观度满意度显著高于对照组(96.87%vs 70.00%),组间差异有统计学意义(P0.05);观察组术后7 d D-二聚体水平、APTT显著低于对照组,PT显著高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论防旋型股骨近端髓内钉内固定术用于老年股骨粗隆间骨折治疗疗效确切,可有效缩短卧床时间,避免下肢静脉血栓形成,但术中透视次数增加。     

一种分离提取非实体瘤凋亡细胞的方法

分离提取凋亡细胞对许多研究有重要意义 ,我们参考Ｍａｒｔｉｎ等[1] 的方法 ,建立了一种简便易行的非实体瘤凋亡细胞分离提取方法。1　材料和方法1 1　细胞培养　ＨＬ 6 0细胞株 (本院血液病研究室提供 ) ,常规ＲＰＭＩ 16 40培养基 (Ｇｂｉｃｏ产品 )培养 ,隔天换液 ,所有用于实验的细胞均处于对数生长期。1 2　凋亡细胞诱导　调整细胞浓度至 10 6/ｍｌ,加入以二甲基亚砜 (ＤＭＳＯ)溶解的抗癌药物ＶＰ 16 (Ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ ,Ｓｉｇｍａ产品 )至所需浓度 (0、5、10、2 0、40 μｇ/ｍｌ)作用 3 5ｈ ,ＰＢＳ(ｐＨ 7 2 ,不含Ｃａ+ 、Ｍｇ2…     

裂缝性气藏气井的分形渗流产能方程

在裂缝性气藏中, 常规模型难以准确描述裂缝发育的非均质性。如何更准确的评价单井的产能, 是现场开 发生产中面临的紧迫问题。在分形渗流研究基础上, 引入裂缝发育参数, 用于表征井控范围内裂缝的分布与连通情况, 建立了分形渗流稳态产能方程, 明确了裂缝对产能计算结果的影响, 并用塔里木油田克深区块实际井例进行了验证。相 对于常规模型, 分形渗流产能方程使预测产量与实测产量误差由20. 9%下降为3. 53%, 预测结果与现场实测更加吻合。     

尿液Ⅳ型胶原与尿微量蛋白变化预测糖尿病早期肾脏损害的临床价值

目的 探讨尿液Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）与尿微量蛋白变化预测糖尿病（DM）患者早期肾脏损害的临床价值。方法 根据微量尿白蛋白／肌酐（mAlb／Cr）比值，将72例DM患者分为正常白蛋白尿组（A组）、微量白蛋白尿组（B组）和大量白蛋白尿组（C组），检测各组尿Ⅳ-C、mAlb、转铁蛋白（TRF）和α1-微球蛋白（α1-MG）含量，分析Ⅳ-C／Cr与mAlb／Cr、TRF／Cr、α1-MG／Cr的相关性。结果 A组尿Ⅳ-C／Cr高于正常，B、C组尿Ⅳ-C／Cr、mAlb／Cr、TRF／Cr和α1-MG／Cr均显著高于正常（P〈0．05，〈0．01）。DM各组比较，C组各项指标显著高于B组，B组显著高于A组（P〈0．05，〈0．01）。Ⅳ-C／Cr与mAlb／Cr、TRF／Cr、α1-MG／Cr呈显著性正相关（r分别为0.3237、0．3749、0．4328）。结论 尿Ⅳ-C作为DM患者早期肾脏损伤的敏感指标优于尿微量蛋白，尿Ⅳ-C／Cr、mAlb／Cr、TRF／Cr和α1-MG／Cr进行性升高反映肾脏损害程度，联合检测对预测DM早期肾脏损害的发生和进展具有重要意义。     

外泌体作为肺癌诊断和预后生物学标志物的研究进展

肺癌仍是全球范围内癌症相关死亡的主要原因之一。尽管新兴的癌症免疫疗法是肺癌治疗的重大突破,但肺癌的晚期诊断和不良预后常导致治疗失败及癌症复发。外泌体(exosome)是直径约为30～120 nm,且由脂质双分子层包被的小膜囊泡。外泌体包含有起源细胞的多种生物活性分子,在介导细胞间交流及调节肿瘤-宿主相互作用中发挥重要功能。外泌体广泛存于人体血液及其他体液中,在癌症的诊断、治疗和预后中具有潜在的临床效用。该文主要综述了目前关于外泌体中miRNA和蛋白质作为肺癌诊断和预后生物学标志物的研究进展,并讨论了外泌体作为肺癌诊断和预后潜在生物学标志物的优点与局限性。     

ERCP和EST治疗胆总管结石复发危险因素分析

目的 分析影响胆总管结石患者行逆行胰胆管造影（ERCP）和内镜下乳头括约肌切开取石术（EST）治疗后结石复发的危险因素。方法 我院诊治的胆总管结石患者357例,常规行ERCP检查,发现胆管内有结石后行EST。对结石直径<1.0 cm者,用取石网篮取石;对结石直径≥1.0 cm者,用碎石篮碎石取出;对巨大结石,于胆管内置入支架,再择期取石。采用Logistic回归分析影响治疗后结石复发的危险因素。结果 在357例患者,行ERCP插管成功349例(97.8%),行EST取石成功334例（93.6%),其中一次取石成功者297例（88.9%）,两次取石成功者37例（11.1%）;随访发现结石复发138例,未复发219例;单因素分析结果显示,复发组病程、年龄和乳头切口分别为（10.9±2.5）年、（66.8±7.2）岁和（15.6±1.9） mm,显著长于或大于未复发组【分别为（7.6±1.7）年、（57.3±8.7）岁和（7.9±2.2） mm,P均<0.05】,复发组有胆道手术史、乳头旁憩室、胆道狭窄、合并胆管或胰腺炎、结石数量≥2枚和结石直径≥10 mm比率分别为18.8%、29.7%、30.4%、78.9%、81.9%和40.6%,显著高于未复发组的1.8%、7.3%、11.4%、40.6%、64.8%和9.6%（P均<0.05）;进一步行Logistic回归分析显示,胆总管直径≥10 mm和乳头切口≥15 mm为患者术后结石复发的独立危险因素。结论 对于乳头切口和胆总管直径较大的患者,临床应该警惕其术后结石复发,增加随访次数,以早期发现。     

DPA法检测细胞凋亡及其在白血病中的应用

目的建立一种检测白血病细胞凋亡的新方法。方法高速离心将DNA样品区分为小分子量DNA片段及高分子量DNA(分别来自凋亡和未凋亡细胞)两部分,二苯胺(DPA)法测定各部分DNA含量,计算DNA片段率,从而分析细胞凋亡情况。以此方法分析了白血病细胞株HL-60受不同剂量抗癌药物VP-16诱导时的凋亡情况。结果与FCM法相比,各剂量组细胞凋亡率无显著差别(P＞0.05),经密度梯度离心法分离提取的凋亡细胞,两种方法测得细胞凋亡率亦无明显差别(P＞0.05)。结论二苯胺法测定DNA片段是分析白血病细胞凋亡的一种简单有效方法。     

UPLC-MS/MS分析及NMR技术鉴定千金子中二萜类化合物

目的 研究千金子乙酸乙酯提取部分的二萜成分。方法 利用乙醇回流提取法进行提取,超高效液相色谱-质谱法（UPLC-MS/MS）结合对照品分析千金子乙酸乙酯部分化学成分;用硅胶和Sephadex LH-20型葡聚糖凝胶色谱技术进行分离;用核磁共振法对化合物12进行结构鉴定。结果 千金子乙酸乙酯提取部分的12个化合物分别鉴定为千金子素（euphorbia factor,EF）L25（1）、EFL1（2）、EFL13（3）、EFL7b（4）、EFL12/EFL12异构体（5）、EFL18（6）、EFL17（7）、EFL3（8）、EFL7a（9）、EFL23（10）、EFL11（11）、EFL2（12）。结论 基于对照品的UPLC-MS/MS结合传统提取分离法是用于研究千金子乙酸乙酯提取部分化学成分的有效方法。     

鸦胆亭上调miR-29a-3p抑制非小细胞肺癌H1299细胞增殖、迁移与侵袭

本研究主要探讨鸦胆亭(bruceantin,BCT)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞的增殖、侵袭与迁移的抑制作用及其机制。采用MTT法检测BCT对NSCLC细胞株的细胞毒作用;采用集落形成、划痕和Transwell实验分别检测细胞的增殖、迁移与侵袭能力;Western blot及RT-qPCR实验分别检测与细胞增殖、迁移与侵袭等的相关蛋白及miRNA、mRNA的表达情况;利用基因预测网站预测miRNA的下游靶基因。结果显示,BCT对NSCLC细胞株有强大的细胞毒作用,对H1299、PC-9和A549细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为0.12±0.02、0.31±0.20和2.07±0.70μmol·L^-1。当0、0.03、0.15和0.75μmol·L^-1BCT分别作用H1299细胞24 h后,其增殖、迁移与侵袭能力呈现浓度依赖性地抑制。值得关注的是,多种与细胞迁移与侵袭相关的miRNA,如miR-29a-3p、miR-21-3p、miR-183-5p与miR-34b-5p的表达水平随着BCT给药浓度的增加而增加,尤其对miR-29a-3p的作用最为明显;通过基因预测网站预测整合素β1(integrinβ1,ITGB1)可能为miR-29a-3p的靶基因;Western blot结果进一步显示,多种与细胞增殖、迁移与侵袭相关的蛋白,如整合素家族多种蛋白以及下游β-catenin、p-Src和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白的表达均呈浓度依赖性减低,其中ITGB1蛋白降低最明显;而RT-qPCR结果显示ITGB1的mRNA表达与给药浓度无关。由此推测,BCT有可能是通过上调miR-29a-3p抑制ITGB1蛋白的表达,且与其mRNA水平无关,深入的机制仍需进一步探讨。本研究初步提示BCT在NSCLC的治疗中具有继续开发的研究潜力。