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2.
目的:建立PC12细胞的蛋白质组学研究的技术体系,全面展示PC12细胞的蛋白质表达谱。方法:提取PC12细胞的蛋白质,建立固相pH梯度双向电泳图谱,应用图像扫描仪及ImageMaster 2D Evolution分析软件获得蛋白质点的数字化和匹配性信息,挑选匹配良好的高峰度蛋白点,进行基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)的鉴定。结果:成功构建出PC12细胞的双向电泳图谱,并用MALDI-TOF-MS成功鉴定出19种PC12细胞的蛋白质,分属于以下6类:分子伴侣及相关功能蛋白、细胞结构/骨架蛋白、代谢相关蛋白、凋亡相关蛋白、激素结合相关蛋白和神经内分泌相关蛋白。结论:PC12细胞样品的蛋白质样品双向电泳图谱重复性良好,初步建立了PC12细胞的蛋白质组学研究技术,证明以PC12细胞为模型的神经系统疾病蛋白质组学研究的可行性。 相似文献
3.
目的研究体外培养的系膜细胞诱生型一氧化氮合成酶(iNOS)表达水平对细胞外基质成分(IV型胶原、纤维连接蛋白)含量的影响。方法胎肾培养原代系膜细胞,取Ⅲ代细胞进行实验。采用TRLzolRNA一步法提取系膜细胞总RNA。半定量逆转录聚合酶链反应法(RT—PCR)测定iNOSmRNA表达,以β-action为内对照。酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养液中细胞外基质成分IV型胶原、纤维连接蛋白(FN)的含量。硝酸还原酶法检测培养液中NO的含量。对照组为RPMI1640 10%小牛血清(FGS) 1mM左旋精氮酸(L-arginine),实验组为1脂多糖(LPS)10ug/ml,观察24h。结果系膜细胞中iNOSmRNA的表达;在未刺激的MC中无iNOSmRNA表达;刺激后4小时可检测到iNOSmRNA表达,6小时明显增加,24小时达到高峰;至48hr,iNOSmRNA表达仍继续增加。上清中的NO:(1)6小时LPS组与对照组无明显差别,24小时后LPS组NO含量增加:(2)LPS诱导的NO含量的增加可被L—NAME抑制。上清IV型胶原,FN含量:(1)4小时、6小时、24小时、48小时LPS组与对照组比较含量降低(P(O,05)(2)I。PS诱导的IV型胶原、FN的降低被L—NAME明显抑制。结论我们的研究发现肾小球MC确含有iNOS,且在生理状态下呈稳定状态,病理状态下iNOS表达上调;MC分泌的ECM与i—NOS表达有关;NO可降低ECM的含量,提示iNOS诱导的NO在肾小球硬化的发生和发展中起到了重要作用;各种因素对iNOS影响的最终结果是NO的变化.能够引起iNOS表达变化的各种因素均可引起NO含量的变化,从分子水平进一步证实肾小球MC-氧化氮合成酶的表达水平与细胞外基质密切相关。 相似文献
4.
目的:观察大剂量丙种球蛋白联合纳洛酮治疗乙型脑炎的疗效。方法安康市中心医院2012年6月至2014年9月收治的95例乙型脑炎患儿随机分成两组。对照组47例,给予常规综合治疗(抗病毒治疗+营养支持+对症治疗);研究组48例,在常规综合治疗的基础上,给予丙种球蛋白静脉输注1g·kg-1·d-1联合纳洛酮(0.01~0.02)mg/kg治疗。结果研究组患儿平均退热时间、抽搐时间及意识障碍持续时间较对照组明显缩短(t值分别为4.526、3.371、4.487,均P<0.01);研究组较对照组呼吸衰竭发生率明显降低(χ2=14.341,P<0.05);研究组治愈率显著高于对照组(χ2=19.234,P<0.01)。结论丙种球蛋白联合纳洛酮治疗乙型脑炎较单纯综合治疗更为有效,能够显著降低死亡率,提高治愈率,减少后遗症的发生,应在临床治疗中普遍推广及应用。 相似文献
5.
6.
7.
目的探讨雷帕霉素对PC12细胞氧糖剥夺损伤(oxygen and glucose deprivation,OGD)的作用。方法选取处于对数生长期的PC12细胞,分为正常组、OGD组、溶剂组和1 nmol、10 nmol、100 nmol、500 nmol雷帕霉素组,OGD同时给予雷帕霉素处理,8 h后通过倒置显微镜观察细胞形态学的变化、MTT法检测细胞存活率的变化以及LDH活性检测细胞受损程度。结果与正常组相比,单纯OGD组细胞活性明显下降,且具有统计学意义(P0.05);与溶剂组相比,1、10、100、500 nmol雷帕霉素组细胞存活率均存在不同程度的增高,其中10、100、500 nmol组具有统计学意义(P0.05)。结论雷帕霉素对PC12细胞OGD损伤具有保护作用。 相似文献
8.
目的研究甘草甜素(glycyrrhizin,GL)对癫痫持续状态大鼠(status epilepticus,SE)神经损伤保护作用及相关分子机制。方法取清洁健康成年雄性SD大鼠60只,采用腹腔注射氯化锂-匹罗卡品的方法建立大鼠癫痫持续状态(SE)模型,随机分为甘草甜素组(SE+GL)和生理盐水组(SE+S),分别经尾静脉给予甘草甜素及生理盐水进行干预,取正常大鼠作为对照组(control group,C);根据给予GL剂量不同将其分为高剂量组(HGL,20 mg/kg)、中剂量组(MGL,10 mg/kg)及低剂量组(LGL,5 mg/kg);通过尼氏染色(NS)观察各组大鼠SE后24 h时大脑皮质神经元损伤情况,分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)和蛋白印迹实验(Western blot)检测各组大鼠SE后24 h时血清及大脑皮质中高迁移率族蛋白(HMGB1)的表达水平。结果 SE+S组大鼠大脑皮质神经元在癫痫持续状态后24 h明显受损,SE+GL各组皮质受损神经元数量较SE+S组减少,且在不同给药剂量组间存在显著差异(P0.05);SE+GL各组在SE后24 h时大脑皮质及血清中HMGB1的表达水平较SE+S组显著降低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论经尾静脉给予GL能有效地减少SE后大鼠大脑皮质神经元损伤,且其神经保护作用呈剂量依赖性,其机制可能与其抑制血清及大脑皮质炎性因子HMGB1的表达有关。 相似文献
9.
目的探讨红花黄色素氯化钠注射液联合普萘洛尔治疗冠心病心绞痛的临床效果。方法选取2015年10月—2018年12月资阳市人民医院收治的冠心病心绞痛患者92例,随机分成对照组(46例)和治疗组(46例)。对照组饭后口服盐酸普萘洛尔片,10 mg/次,3次/d。治疗组在对照组基础上静脉滴注红花黄色素氯化钠注射液,100 mL/次,1次/d,滴速应≤30滴/min。两组患者均连续治疗14 d。观察两组患者临床疗效和心电图疗效,同时比较治疗前后两组患者心绞痛发作情况、心电图参数、心肌耗氧指数(MOCI)值、血流变学指标、血小板最大聚集率(MAR)、血浆B型利钠肽(BNP)和C反应蛋白(CRP)水平。结果经治疗,对照组临床有效率和心电图疗效分别为82.6%和69.6%,均明显低于治疗组的95.7%和87.0%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组心绞痛发作次数、持续时间和硝酸甘油用量均显著下降(P0.05),且治疗组心绞痛发作情况明显低于对照组(P0.05)。治疗后,两组心电图各项参数ST段下降导联数(NST)、ST段压低数值总和(∑ST)、心肌缺血时间及MOCI值均显著降低(P0.05),且治疗组心电图参数和MOCI值明显低于对照组(P0.05)。治疗后,两组WLV、WHV和PV值较治疗前均显著减小(P0.05),且治疗组WLV、WHV和PV值明显小于对照组(P0.05)。治疗后,两组患者MAR值和血浆BNP、CRP水平均显著降低(P0.05),且治疗组MAR值及BNP、CRP水平明显低于对照组(P0.05)。结论红花黄色素氯化钠注射液联合普萘洛尔治疗冠心病心绞痛,能有效控制心绞痛发作,改善患者心电图及心功能,减少心肌耗氧量。 相似文献
10.