HPLC-CAD法测定盐制前后知母中知母皂苷BⅡ和菝葜皂苷元

目的 利用HPLC-电雾式检测器（charged aerosol detector,CAD）联用技术建立知母中知母皂苷BⅡ和菝葜皂苷元的测定方法,并比较知母盐制前后两种成分的变化。方法 知母皂苷BⅡ以乙腈-水（25：75）为流动相,进样量为10 μL;菝葜皂苷元以甲醇-水（95：5）为流动相,进样量为20 μL;其他色谱条件均采用Thermo C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,体积流量为1 mL/min,柱温为30℃;Corona参数：氮气压力为241.3 kPa,Filter：High,Range：200 pA。结果 知母皂苷BⅡ在0.305～4.880 μg线性关系良好,r=0.999 4,平均回收率为99.1%,RSD值为1.2%;菝葜皂苷元在0.490～7.840 μg线性关系良好,r=0.999 1,平均回收率为98.0%,RSD值为1.3%。知母中知母皂苷BⅡ为3.16%～5.92%,盐制后为4.15%～7.20%;知母中菝葜皂苷元为0.42%～1.39%,盐制后为0.52%～1.54%。结论 CAD检测器具有较为平稳的基线和较高的灵敏度,更加适用于知母皂苷类及含有较弱或无紫外吸收成分的测定,知母盐制后知母皂苷BⅡ和菝葜皂苷元的量均有所升高。     

盐知母不同有效部位改善链脲佐菌素诱导2型糖尿病大鼠糖代谢的研究

目的探究盐知母不同溶剂萃取物对2型糖尿病大鼠糖代谢的影响,旨在寻找盐知母降血糖作用的有效部位。方法 SD雄性大鼠ig脂肪乳10 g/kg,1次/d。4周后,ip链脲佐菌素35 mg/kg,建立2型糖尿病模型。造模成功的大鼠按血糖值随机分为模型组、阿卡波糖(0.2 g/kg)组以及石油醚萃取物、氯仿萃取物、醋酸乙酯萃取物、正丁醇萃取和萃余物组,连续ig给药14 d。于给药7、14 d后测定空腹血糖值(FBG),末次给药后测定口服葡萄糖耐量(OGTT),眼眶取血测定糖化血红蛋白(HbAlc)、血清胰岛素(FINS),计算胰岛敏感指数(ISI)和Homa胰岛素抵抗(HOMA-IR)指数。结果与模型组比较,盐知母氯仿萃取物能够明显降低FBG、HbA1c、FINS、HOMA-IR指数,升高ISI,改善OGTT;盐知母醋酸乙酯萃取物能够显著降低HbAlc、HOMA-IR指数,改善OGTT;盐知母正丁醇萃取物能够显著降低FINS;盐知母萃余物能够显著降低FBG、FINS、HOMA-IR指数,升高ISI。结论盐知母不同溶剂萃取物对2糖尿病大鼠糖代谢具有较好的改善作用,其中氯仿萃取物的作用最强。     

知母中牡荆素的分离及盐炙前后含量比较

目的：对知母化学成分进行研究,建立测定知母中牡荆素含量的方法,比较盐炙前后牡荆素含量差异。方法采用硅胶柱色谱等技术对知母70%乙醇提取物进行分离、纯化,通过理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。采用高效液相色谱法测定,Ecosil 色谱柱（4.6 mm±150 mm,5μm）,乙腈-0.2%冰醋酸溶液（14.5∶85.5）为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长340 nm。结果该化合物为牡荆素,在0.0398～1.99μg范围内线性关系良好,r＝0.9998,平均回收率为98.02%,RSD＝0.21%。生知母中牡荆素含量为0.0085%,盐知母含量为0.0081%。结论从知母中首次分离得到牡荆素,所建立的方法准确、专属性强、灵敏度高,知母盐炙后牡荆素含量略降低。     

HPLC法测定盐炙前后知母中新芒果苷、芒果苷和异芒果苷

目的建立HPLC法同时测定盐炙前后知母中新芒果苷、芒果苷、异芒果苷,并比较盐炙前后3种成分的差异。方法采用HPLC法,Ecosil色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相乙腈–0.2%冰醋酸,梯度洗脱,体积流量1.0 m L/min,检测波长258 nm,柱温室温,进样量10μL。结果新芒果苷、芒果苷、异芒果苷分别在0.860 0~17.200 0μg、0.806 5~16.130 0μg、0.039 0~0.780 0μg与峰面积的线性关系良好;平均回收率分别为98.32%、98.30%、97.27%,RSD值分别为0.87%、0.74%、0.71%(n=6)。知母盐炙后新芒果苷、异芒果苷的量减少,而芒果苷的量增加。结论该方法准确、专属性强、灵敏度高,可用于知母中新芒果苷、芒果苷、异芒果苷的质量控制方法。新芒果苷、芒果苷之间可能在炮制过程中发生了转化,可为进一步研究盐知母炮制机制提供参考。     

知母盐炙前后滋阴作用比较

目的： 比较知母、盐知母对甲亢阴虚大鼠的影响,以阐明盐知母增强滋阴降火作用的炮制原理。方法： SD雄性大鼠,随机分为空白对照组,模型对照组,生知母、盐知母低剂量组（1 g·kg^-1）,生知母、盐知母高剂量组（2 g·kg^-1）;各组大鼠每天ig甲状腺素溶液（1.25×10^-2g·kg^-1）与相应样品水煎液（10 mL·kg^-1）,空白组ig等体积的生理盐水,模型组ig等体积的甲状腺素溶液和生理盐水,连续3周,眼眶取血,分离血清,抗原抗体反应法测游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）,游离甲状腺素（FT4）,收集尿液,取上清液,紫外-可见光分光光度计（410 nm）测定17-羟皮质类甾醇（17-OHCS）的含量。结果： 与空白组比较,模型组的FT3,FT4均显著升高（P<0.01）;与模型组比较,除生品低剂量组的FT3外,其余各给药组的FT3,FT4均有显著性差异（P<0.05或P<0.01）;各给药组尿17-OHCS均有下降趋势,盐知母高剂量组与模型组比较有显著性差异（P<0.01）,优于生知母组;与生知母等剂量组比较,盐知母各剂量组FT3,FT4及尿17-OHCS均低于生知母组,其中盐知母高剂量组的17-OHCS较生知母有显著性差异（P<0.05）。结论： 知母、盐知母均有滋阴作用,盐炙后作用增强。     

HPLC-CAD法测定盐制前后知母中知母皂苷BⅡ和菝葜皂苷元

目的：利用HPLC-电雾式检测器（charged aerosol detector,CAD）联用技术建立知母中知母皂苷BⅡ和菝葜皂苷元的测定方法,并比较知母盐制前后两种成分的变化。方法知母皂苷BⅡ以乙腈-水（25∶75）为流动相,进样量为10μL;菝葜皂苷元以甲醇-水（95∶5）为流动相,进样量为20μL;其他色谱条件均采用Thermo C18柱（250 mm＆#215;4.6 mm,5μm）,体积流量为1 mL/min,柱温为30℃;Corona参数：氮气压力为241.3 kPa,Filter：High,Range：200 pA。结果知母皂苷BⅡ在0.305-4.880μg线性关系良好,r＝0.9994,平均回收率为99.1%,RSD值为1.2%;菝葜皂苷元在0.490-7.840μg线性关系良好,r＝0.9991,平均回收率为98.0%,RSD值为1.3%。知母中知母皂苷BⅡ为3.16%-5.92%,盐制后为4.15%-7.20%;知母中菝葜皂苷元为0.42%-1.39%,盐制后为0.52%-1.54%。结论 CAD检测器具有较为平稳的基线和较高的灵敏度,更加适用于知母皂苷类及含有较弱或无紫外吸收成分的测定,知母盐制后知母皂苷BⅡ和菝葜皂苷元的量均有所升高。     

知母盐制前后对α-葡萄糖苷酶抑制作用比较

目的 比较知母和盐知母提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,从体外方面探讨知母不同炮制品的降血糖作用.方法 以对-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷（PNPG）为底物,采用HPLC法分析水解产物中的对-硝基酚（PNP）浓度,比较知母、盐知母5种不同浓度的水煎液对α-葡萄糖苷酶的抑制作用.结果 在低浓度下,各组均表现出较弱的抑制作用;在2.6 ～65mg/ml浓度下,知母、盐知母水煎液均表现出一定的抑制作用,盐知母抑制作用强于知母,与浓度呈正相关,且优于阳性对照阿卡波糖.结论 知母和盐知母均能抑制α-葡萄糖苷酶的活性,盐制后作用增强.